不同病理類型子宮內(nèi)膜組織中β-catenin、YAP-1、Survivin表達觀察

荊麗紅，嚴鵬，高玉彤

(1天津醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室，天津300070；2西安交通大學(xué)法醫(yī)學(xué)院)

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不同病理類型子宮內(nèi)膜組織中β-catenin、YAP-1、Survivin表達觀察

荊麗紅1，嚴鵬2，高玉彤1

(1天津醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室，天津300070；2西安交通大學(xué)法醫(yī)學(xué)院)

摘要：目的觀察不同病理類型子宮內(nèi)膜組織中β-鏈蛋白(β-catenin)、Yes相關(guān)蛋白1(YAP-1)和生存素(Survivin)的表達變化，并探討三者與子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)病的關(guān)系。方法 采用免疫組化法分別檢測增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的β-catenin、YAP-1、Survivin。結(jié)果β-catenin、YAP-1、Survivin在增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達依次增多(P均<0.05)；β-catenin在高分化、中分化、低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達依次減少(P均<0.05)。子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin與YAP-1、YAP-1與Survivin陽性表達均呈正相關(guān)關(guān)系(r分別為0.378、0.700，P均<0.05)。結(jié)論 子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin、YAP-1、Survivin陽性表達增高，三者可能協(xié)同參與了子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)病。

關(guān)鍵詞：子宮腫瘤；子宮內(nèi)膜樣腺癌；β-鏈蛋白；Yes相關(guān)蛋白1；生存素

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，以子宮內(nèi)膜樣腺癌最為常見，近年來發(fā)病率呈上升趨勢。現(xiàn)已證實，Wnt/β-鏈蛋白(β-catenin)、Akt/PI3K等與調(diào)節(jié)細胞周期和細胞分化有關(guān)的分子信號通路異常激活在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用[1,2]。各種因素引起Wnt信號通路異常激活，導(dǎo)致β-catenin在胞核中累積并與核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子TCF/LEF結(jié)合，進而激活下游靶基因表達。一項關(guān)于大腸癌的研究[3]結(jié)果表明，Wnt信號通路異常激活后，胞核內(nèi)累積的β-catenin還可與Yes相關(guān)蛋白1(YAP-1)/TBX5結(jié)合，并激活下游靶基因生存素(Survivin)表達，從而導(dǎo)致細胞惡變。本研究觀察了不同病理類型子宮內(nèi)膜組織中β-catenin、YAP-1、Survivin的表達變化，探討三者在子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源選取2009年12月~2015年3月存檔于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院病理科的子宮內(nèi)膜病理組織標(biāo)本80例份，其中包括增殖期子宮內(nèi)膜15例份(患者中位年齡43歲)，單純性增生子宮內(nèi)膜15例份(患者中位年齡46歲)，復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜20例份(患者中位年齡49歲)，子宮內(nèi)膜樣腺癌30例份(患者中位年齡59歲，高分化9例、中分化11例、低分化10例)。所有組織切片均按《乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)重新復(fù)診和分級。

1.2β-catenin、YAP-1、Survivin檢測方法所有蠟塊均經(jīng)4 μm連續(xù)切片，65~70 ℃溫箱烤片1.5~2 h，常規(guī)脫蠟至水，選用通用型二抗PV-6000行免疫組化染色，枸櫞酸鈉緩沖液(pH 6.0)微波熱修復(fù)，3 min×2次。YAP-1、Survivin以細胞核中呈現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性信號；每例份選取5個具有代表性的高倍視野，陽性細胞數(shù)百分比≤10%計1分、11%~50%計2分、51%~75%計3分、>75%計4分，無特異性著色計0分、淺棕色計1分、棕黃色計2分、棕褐色計3分；將陽性細胞百分比得分與染色強度得分相乘，≥2判定為陽性。β-catenin正常表達于細胞膜和細胞質(zhì)，出現(xiàn)于細胞核為異常表達，結(jié)果判定參照文獻[4]方法，高倍鏡下隨機計數(shù)500個細胞，當(dāng)>5%的細胞出現(xiàn)細胞核異常染色時判定為陽性表達。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1不同病理類型子宮內(nèi)膜組織中β-catenin、YAP-1、Survivin表達比較β-catenin、YAP-1、Survivin在增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達依次增多，同種指標(biāo)各組間兩兩相比，P均<0.05。見表1、圖1~3。

2.2不同組織學(xué)分級子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin、YAP-1、Survivin表達比較β-catenin在高分化、中分化、低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達依次減少，兩兩相比，P均<0.05。見表2。

表1　增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織

注：A為增殖期子宮內(nèi)膜；B為單純性增生子宮內(nèi)膜；C為復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜；D為子宮內(nèi)膜樣腺癌。

圖1增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織

及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin的表達

注：A為增殖期子宮內(nèi)膜；B為單純性增生子宮內(nèi)膜；C為復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜；D為子宮內(nèi)膜樣腺癌。

圖2增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織

及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中YAP-1的表達

注：A為增殖期子宮內(nèi)膜；B為單純性增生子宮內(nèi)膜；C為復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜；D為子宮內(nèi)膜樣腺癌。

圖3增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織

及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中Survivin的表達

表2　不同組織學(xué)分級子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin、

2.3子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin、YAP-1、Survivin表達的相關(guān)性子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin與YAP-1、YAP-1與Survivin的陽性表達均呈正相關(guān)關(guān)系(r分別為0.378、0.700，P均<0.05)。

3討論

大量實驗數(shù)據(jù)證實，與細胞周期調(diào)節(jié)和細胞分化有關(guān)的分子信號通路的異常激活參與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生發(fā)展。Wnt/β-catenin信號通路參與細胞周期調(diào)節(jié)，與細胞增殖、凋亡及遷移有關(guān)[5]，其核心分子β-catenin在胞核內(nèi)異常累積與多種惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān)[6~8]。近年研究顯示，β-catenin在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中也有異常表達。有學(xué)者[2]發(fā)現(xiàn)，胞核中累積的β-catenin除與TCF/LEF形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物啟動下游靶基因表達外，也可與YAP-1/TBX-5形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物并激活Survivin及BCL2L1表達，從而導(dǎo)致大腸癌的發(fā)生。

YAP-1是一種細胞內(nèi)連接蛋白和轉(zhuǎn)錄輔激活因子[9]，定位于人類染色體11q22[10]。通常情況下，YAP-1高度保守，其高表達可導(dǎo)致細胞增殖及細胞周期調(diào)控異常，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，增強腫瘤侵襲能力[11]。研究[12]顯示，在卵巢癌、肝癌、胃癌、大腸癌、前列腺癌等多種實體腫瘤中均發(fā)現(xiàn)YAP-1高表達。Zhang等[13]研究顯示，YAP-1高表達可增強卵巢癌細胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力，YAP-1在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜不典型增生組織及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達率逐漸升高，同時還發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中YAP-1與Survivin表達呈正相關(guān)關(guān)系，但其機制尚不清楚。

Survivin作為Wnt信號通路的重要靶基因，主要參與細胞增殖、細胞凋亡與細胞周期的調(diào)控。Survivin在多數(shù)正常組織中不表達或少量表達，而在多種腫瘤組織中呈異常高表達[14]。Lee等[15]研究顯示，結(jié)腸癌組織中β-catenin與Survivin表達呈正相關(guān)關(guān)系，梁海紅等[16]在乳腺癌相關(guān)研究中同樣發(fā)現(xiàn)了這一現(xiàn)象。

本研究檢測了不同子宮內(nèi)膜病變組織中的β-catenin、YAP-1、Survivin，結(jié)果顯示β-catenin、YAP-1、Survivin在增殖期、單純性增生、復(fù)雜性增生子宮內(nèi)膜組織及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達逐漸增多，β-catenin在高分化、中分化、低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達逐漸減少，提示β-catenin、YAP-1和Survivin均與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)病有關(guān)，且β-catenin與腫瘤惡性程度相關(guān)。我們通過Pearson相關(guān)分析還發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中β-catenin與YAP-1、YAP-1與Survivin表達均呈正相關(guān)關(guān)系，推測在子宮內(nèi)膜樣腺癌發(fā)生過程中，β-catenin在細胞核中與YAP-1形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物，激活下游靶基因Survivin表達，三者起到了協(xié)同作用。

結(jié)合上述研究結(jié)果，我們推測，在經(jīng)典Wnt信號通路中至少存在兩種轉(zhuǎn)錄復(fù)合物參與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)病，即β-catenin-TCF/LEF轉(zhuǎn)錄復(fù)合物和β-catenin-YAP1轉(zhuǎn)錄復(fù)合物。進一步研究β-catenin、YAP-1、Survivin三者之間相互作用的關(guān)系及具體機制有望為子宮內(nèi)膜樣腺癌的臨床治療、預(yù)后判斷等提供幫助。

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(收稿日期：2016-09-07)

中圖分類號：R737.33

文獻標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)07-0044-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.07.016

通信作者：高玉彤(E-mail: emmagao_2010@163.com)