精子質量異?；颊呷旧w變異分析

路興軍，李曉東，孫立寧，陶華娟，王磊

(濰坊市婦幼保健院，濰坊 261011)

男性生育力主要表現為能夠產生正常的精子，與卵母細胞受精，并實現精子DNA與卵母細胞DNA的融合。精子質量下降是導致男性生殖力下降的主要原因，既往研究表明，染色體畸變是導致男性精子質量異常的重要原因之一[1]。本文通過對男性不育患者的染色體結果進行總結分析，探討染色體變異與少精子癥、畸形精子癥和無精子癥的關系。

資料與方法

一、研究對象

回顧性分析2015年6月至2017年6月于濰坊市婦幼保健院就診的211例原發不育男性患者的臨床資料，根據精液常規檢測結果分為少精子癥組(107例)、畸形精子癥組(60例)和無精子癥組(44例)，以同期140例精液常規正常男性作為對照組。納入標準：(1)夫妻同居有正常性生活，未避孕超過1年，由于男方因素致使女方未能受孕；(2)患者至少經2次以上精液分析和精子形態學(WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊》第五版)檢查。對照組為同期精液各項指標正常，因女方因素而行IVF-ET治療的不孕不育夫婦的140例男性。所有患者均簽署知情同意書。

二、方法

抽取患者外周血2 ml，采取常規外周血淋巴細胞培養、制片和G顯帶。每例分析5個核型，計數20個分裂相。參照G顯帶320條帶人類染色體標準圖譜，根據人類細胞遺傳學國際命名體制(ISCN 2013)進行命名，至少有2名遺傳學家對染色體異常結果進行復核和認定。

三、統計學分析

應用SPSS統計軟件進行統計學分析，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為有統計學意義。

結 果

一、一般情況比較

211例原發不育男性患者中，診斷為少精子癥107例，畸形精子癥60例，無精子癥44例。少精子癥組平均年齡(33.8±6.3)歲，畸形精子癥組平均年齡(34.5±6.5)歲，無精子癥組平均年齡(32.6±6.0)歲，與對照組(32.6±6.0)歲比較差異均無統計學意義(P>0.05)。

二、4組間染色體畸變情況比較

107例少精子癥患者中，檢出3例男性染色體畸變(2.8%)；60例畸形精子癥患者，檢出3例染色體畸變(5.0%)；44例無精子癥患者，檢出4例染色體畸變(9.1%)；140正常對照男性，檢出染色體畸變2例(1.4%)，畸形精子癥組、無精子癥組染色體畸變率均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)(表1、2)。

三、4組間染色體多態情況比較

少精子癥組、畸形精子癥組和無精子癥組染色體多態率分別為5.6%(6/107)、8.3%(5/60)和6.8%(3/44)，與對照組比較(5.0%)，差異均無統計學意義(P>0.05)(表1、表3)。

討 論

在不孕夫婦中有近50%是由男性不育所引起的。導致男性不育的原因眾多，包括遺傳因素、免疫因素、內分泌因素和理化因素等，這些因素導致的最終結果主要表現在精液參數的異常。精子數量、形態、活動力是精液參數的重要指標，該研究主要對精子數量和形態與染色體變異的關系進行分析總結。

一、少精子癥與染色體變異

表1 不同組間染色體核型分布情況

注：與對照組比較，*P<0.05

表2 4組染色體畸變核型結果

表3 4組染色體多態核型結果

精子數量與男性生殖力密切相關，是精液參數的首要指標，精子質量下降被認為是當今社會的公共健康問題[2]。Levine等[3]對1973年至2011年185項研究結果進行META分析后發現，來自北美、歐洲、澳大利亞和新西蘭的男性精子濃度下降了52.4%，精子總數下降了59.3%。導致精子數量下降的原因眾多，包括經濟社會壓力、生殖系統疾病、內分泌異常以及不良生活習慣等[4]。在該研究中，發現少精子癥患者存在染色體的異常，異常率為2.8%，與張佳仕等[5]的研究結果基本一致(2.84%)，但與本研究對照組比較差異無統計學意義，考慮與樣本選擇和樣本量有關。既往研究表明，不育患者羅伯遜易位的發生率為2%～3%，明顯高于人群發生率(0.001%)，最常見的羅伯遜易位是der(13；14)，占羅伯遜易位類型75%；其次為der(14；21)，占10%。羅伯遜易位攜帶者表型正常，但可出現生精障礙，表現為精子密度和活力降低，畸形率增高[6]。在該研究中，少精子癥組和畸形精子癥組各有1 例羅伯遜易位患者。

二、畸形精子癥與染色體變異

畸形精子癥WHO第五版制定的標準為：正常形態的精子比率<4%。2013年歐洲泌尿外科學會男性不育的遺傳病指南推薦：畸形精子癥患者無論精子濃度如何，均應進行核型分析[7]，可見染色體異常與畸形精子癥密切相關。楊洋等[8]報道畸形精子癥患者染色體變異率為25.89%，明顯高于正常人群。在該研究中，雖然畸形精子癥患者的染色體畸變率僅有5.0%，但也高于正常人群，與對照組比較差異有統計學意義。值得注意的是，在該研究中，畸形精子癥患者發現的3 例染色體畸變全部為染色體重排，崔英霞等[9]通過對1 例13 號染色體重排所致嚴重少弱畸形精子癥患者研究發現，染色體重排導致的精子發生阻滯可能是由于生殖細胞第一次減數分裂同源染色體錯誤配對導致的?？梢姡尉影Y患者不僅存在外周血染色體異常的情況，其精子染色體異常率亦可明顯高于生育力和精液參數正常男性[10]。

三、無精子癥與染色體變異

非梗阻性無精子癥患者精液分析表現為精液量正常，離心后無精子。精子的發生是一個復雜的過程，受多種因素的精細調節以確保把正確的基因和表觀遺傳信息傳給子代[11]。染色體異?；蛳嚓P基因缺失可影響到精子的發生，在本研究中發現2 例47，XXY患者。47，XXY的發生機理是父親的精細胞或母親的卵細胞在減數分裂時期X染色體不分離所導致，源于卵細胞的不分離較多見。Falik-Borenstein等[12]研究發現，X染色體數量的改變可損害精細胞在睪丸內的分化、形成和發育，導致精細胞數量缺乏，出現無精子癥。另發現一例核型為46，XX男性，其具有正常的外生殖器和性功能，但精液常規檢查無精子存在，考慮其核型中存在性別決定(SRY)基因，而與精子生成相關的無精子因子(AZF)基因區域缺失。

染色體多態性改變主要發生在結構異染色質區，為DNA高度重復序列，不具有轉錄活性，因此傳統觀點認為，這些序列改變不具有臨床病理意義。相反，也有觀點認為，染色體異染色質的變異通過干擾減數分裂、基因位置效應和表觀遺傳學改變等，可能導致生殖功能異常[13-14]。本文中，少精子癥、畸形精子癥和無精子癥患者中存在一定比例的染色體多態性改變，但與對照組比較差異無統計學意義，與國內外研究一致[15-16]。

綜上所述，染色體畸變與畸形精子癥和無精子癥密切相關。對于此類患者進行外周血染色體檢查，有助于查找病因、明確診斷，為輔助生殖提供更合理的方案。

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