美藤果油增強免疫力的試驗研究

◎李 慧，金 紅，王 曄，蘇風龍

（北京頤興堂生物科技有限公司，北京 100022）

美藤果產自于南美洲印加地區，在該地區已有千百年食用美藤果的歷史[1]。美藤果油是經美藤種子榨取提煉出的一類植物油，美藤果油中富含大量的不飽和脂肪酸、維生素等營養物質[2]。在美藤果油中不飽和脂肪酸的比例超過90%以上，其中ω-3與ω-4的比例為1∶0.75，與人體的吸收比例非常接近。相關研究指出不飽和脂肪酸與免疫機能有關[3]，但是有關美藤果油與免疫能力的相關報道較少，為了探究美藤果油與免疫能力的關系，做了相關研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 試驗動物及分組

雄性健康Wistar大鼠20只，雄性高血脂Wistar大鼠20只，體重（200±10）g，由北京市第一醫院動物實驗中心提供。試驗前，為使大鼠適應環境將大鼠放在實驗室飼養一周，隨后按照隨機法將健康Wistar大鼠分為實驗1組和對照1組，將雄性高血脂Wistar大鼠分為實驗2組和對照2組，每組10只。

1.2 飼料配制

對照1、2組大鼠使用普通大鼠飼料，實驗1、2組大鼠在對照組基礎上，每百克飼料中混合7 g美藤果油（購自于西雙版納印奇生物資源開發有限公司，批號：20140204）。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗儀器

24、96孔培養板（上海臥宏生物科技有限公司），高速離心機（張家港市中沃機械有限公司），全自動生化儀（普朗醫療器械有限公司）。

1.3.2 試驗方法

4組大鼠連續飼養10周。飼養結束后，將大鼠禁食12 h，無菌取出脾臟分離獲得脾淋巴細胞。

一是測定脾淋巴細胞增殖活性[4，5]。將在無菌條件下取出的脾臟碾碎并制作成單個細胞懸液，將細胞數調整為4×109個/L。將調整后的細胞懸液加入96孔平底板進行培養，每孔加入200 μL，共加入8孔，將8孔分為陽性孔和陰性孔，其中陽性孔4孔，其中每孔加入25 μL濃度為50 mg/L的刀豆素（ConA），陰性孔也4孔則不加入ConA，加好后的平地培養板置于CO2培養箱，在37 ℃溫度下培養48 h。在培養結束前4 h，將10 μL濃度為5 g/L的MTT10加入96孔平底培養板的每個孔中，在培養結束前2 h，將100 μL緩沖液加入各個孔中用于測定光密度，加完后開始測定光密度。其中，T淋巴細胞的增殖能力用刺激指數（Stimulation Index，SI）來反映。SI=ConA刺激的陽性孔的平均光密度值／ConA未刺激的陰性孔的平均光密度值。

二是白介素-2、4（interleukin，IL-2，IL-4）測定。將淋巴細胞懸液分別加入24孔平底培養板，每孔1 mL，隨后再向每孔加入100 μL濃度為50 mg/L的ConA，放入CO2培養箱中培養，溫度37 ℃，培養時間48 h。培養結束后，將培養板中的淋巴細胞上清液在無菌條件下吸取后，載分別裝入0.5 mL EP管中，置入-20 ℃的冰箱中保存，用于IL-2和IL-4含量的檢測。采用ELISA檢測試劑盒檢測檢測IL-2和IL-4的含量。

1.4 數據記錄與統計分析

飼養期間觀察4組大鼠的活動情況及死亡情況并記錄；對4組大鼠淋巴細胞的增殖能力用刺激指數及白介素-2、4結果進行記錄。

本次研究所獲得數據均采用SPSS20.0進行處理，組件比較采用t檢驗，以（x±s）表示，以P＜0.05為統計學存在差異。

2 結果

2.1 觀察結果

在飼養期間，4組大鼠均未出現死亡，且通過觀察發現實驗1組大鼠活力及精力均強于其他大鼠，且對照2組大鼠的精力及活力最差。

2.2 小鼠脾淋巴細胞增殖活性和白介素含量對比

實驗1組淋巴細胞刺激指數、IL-2、IL-4的含量顯著高于實驗2組、對照1組及對照2組大鼠（P＜0.05），實驗2組與對照1組則不存在顯著性差異（P＞0.05），對照2組大鼠顯著低于實驗2組（P＜0.05），詳見表1。

表1 鼠脾淋巴細胞增殖活性和白介素含量對比表（x±s）

3 討論

美藤果油是一種對人類健康十分有益的可食用植物油，而且也是世界上質量最佳的食用油之一[6]。相關報道指出[6]，美藤果油中含有豐富的蛋白質及不飽和脂肪酸，其中蛋白質含量遠遠高于花生中蛋白質的含量，而不飽和脂肪酸的含量僅僅低于核桃中不飽和脂肪酸的含量。劉付英[2]曾對美藤果油中不飽和脂肪酸的含量進行過分析，發現美藤果油中不飽和脂肪酸含量高達92.46%，其中亞麻酸的含量高達45.62%，進一步證明了美藤果油的營養價值。吳爭[7]等人曾對美藤果油做過相關安全性評價，結果發現，在實驗室條件下，并未觀察到美藤果油的不良生物學影響，說明美藤果油是一類無任何毒副作用的食品油。此外，還有學者就美藤果油的功效進行過研究，結果顯示美藤果油具有良好的降脂作用[8]，這可能與其含有豐富的不飽和脂肪酸有關，因為不飽和脂肪酸具有很好的降脂作用[9]，所以美藤果油也具有良好的降脂作用。研究結果還顯示，美藤果油具有保護上皮細胞完整的作用，筆者認為這與其含有豐富的蛋白質存在關系。

但是，目前臨床上有關美藤果油增強免疫力的報道較少，為了探究美藤果油與免疫力的關系，筆者做了相關研究，結果顯示4組大鼠均未出現死亡，且實驗1組大鼠活力及精力均強于其他大鼠，對照2組大鼠的精力及活力最差；實驗1組淋巴細胞刺激指數、IL-2、IL-4 的含量顯著高于其他組（P＜0.05），實驗2組與對照1組則不存在顯著性差異（P＞0.05），對照2組大鼠則顯著低于實驗2組（P＜0.05）。本次研究結果說明高血脂大鼠的免疫力低于健康大鼠，但是在喂養添加美藤果油的飼料后，健康大鼠及高血脂大鼠的免疫力均有提高，充分證實了美藤果油具有提高免疫力的作用。

綜上所述，美藤果油具有增強免疫力的功能，值得推廣食用。

參考文獻：

[1]Guillen MD，Ruiz A，Cabo N，et al. Characterization of Sachainchi（Plukenetia volublilisL. ）oil by FTIR spectroscopy and H-1NMR.Comparison with linseed oil[J]. J Am Oil Chem Soc，2003，80（8）：755-762.

[2]劉付英.美藤果及美藤果油的理化性質和油脂的脂肪酸組成分析[J].中國油脂，2014，39（7）：95-97.

[3]郭 艷，蘇宜香.多不飽和脂肪酸對小鼠血脂和免疫功能的影響[J].中國公共衛生，2003，19（11）：1341-1342.

[4]Morten BH，Svend EN，Kurt B. Re-examination and further development of a precise and rapid dye method for measuring cell growth/cell kill[J]. J of Immunological Methods，1989，119（2）：203-210.

[5]林忠寧，董勝璋，董書蕓，等.MTT法檢測T淋巴細胞增殖功能的方法學探討與應用[J].中國衛生檢驗雜志，2000，10（1）：8-10.

[6]蔡志全.特種木本油料作物星油藤的研究進展[J].中國油脂，2011，36（10）：1-6．

[7]吳 爭，丁 晟，蔡 宏，等.南美油藤果油的急性、亞急性及遺傳毒性的實驗研究[J].科技廣場，2012，25（12）：206-208.

[8]李 偉，王林元，王景霞，等.美藤果油對高脂血癥大鼠血脂的影響及對血管內皮細胞的保護作用[J].世界中醫藥，2015，10（8）：1227-1230.

[9]陳彩銳，李麗華，韓美娜，等.ω-3多不飽和脂肪酸血脂調節研究動態[J].食品安全導刊，2015，9（27）：170-172.