苜蓿屬和草木樨屬種質資源親緣關系的過氧化物酶分析

陳立強，邊艷霞，馬春暉，徐利明，趙浩波，楊浩宏

(1.塔里木大學動物科學學院/塔里木畜牧科技兵團重點實驗室，新疆阿拉爾　843300；2.塔里木大學后勤管理處，

新疆阿拉爾　843300；3.石河子大學動物科技學院，新疆石河子　832000)

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苜蓿屬和草木樨屬種質資源親緣關系的過氧化物酶分析

陳立強1，邊艷霞2，馬春暉3，徐利明1，趙浩波1，楊浩宏1

(1.塔里木大學動物科學學院/塔里木畜牧科技兵團重點實驗室，新疆阿拉爾843300；2.塔里木大學后勤管理處，

新疆阿拉爾843300；3.石河子大學動物科技學院，新疆石河子832000)

摘要：【目的】分析苜蓿屬和草木樨屬種質資源的親緣關系，提高兩屬植物遠緣雜交的可預見性。【方法】以苜蓿屬(Medicago)3個種和草木樨屬(Melilotus)2個種共20份種質資源為材料，用過氧化物酶電泳技術對其親緣關系進行分析。【結果】苜蓿屬材料間、草木樨屬材料間、苜蓿屬和草木樨屬材料間的酶帶相似率分別介于30.00%～83.33%、33.33%～100.00%和0%～44.44%，相似系數分別介于0.417～0.917、0.667～1.000和0.083～0.667。供試材料在相似系數0.402處可聚為2類，草木樨屬材料為一類，苜蓿屬材料為一類。與草木樨屬相比，苜蓿屬材料在主成分分析圖中的位置相對分散，遺傳變異水平較高。【結論】部分遠緣種質資源的酶帶相似程度較高，親緣關系較近，雜交成功的可能性較大。

關鍵詞：苜蓿屬；草木樨屬；過氧化物酶；親緣關系；遠緣雜交

0 引 言

【研究意義】苜蓿屬(Medicago)和草木樨屬(Melilotus)隸屬于豆科(Leguminosae)、蝶形花亞科(Papilionoideae)。屬內植物多為優良牧草，長期以來，在我國畜牧業發展、生態治理、種植業結構調整及土壤肥力改良中發揮著重要作用。然而目前苜蓿屬和草木樨屬植物育種工作均相對滯后，現有品種遠不能滿足生產需求[1-2]。隨著苜蓿品種資源的日益枯竭，要想在育種領域取得突破，就必須通過遠緣雜交超越種間界限，創造新物種。育種實踐表明，遠緣雜交具有不可交配性，通常親本間親緣關系越近，雜交成功的可能性越大[3]。以此為依據，研究苜蓿屬和草木樨屬種間和屬間種質資源的親緣關系，對提高遠緣雜交可預見性、創造新物種具有重要意義。【前人研究進展】目前，已有研究對苜蓿及其近緣植物的親緣關系、草木樨資源的親緣關系進行了研究。劉磊等[4]用ISSR標記研究了紫花苜蓿(M.sativa)、黃花苜蓿(M.falcata)和胡盧巴屬(Trigonella)種質資源的親緣關系，結果表明，供試種質資源的相似系數介于0.850～0.940，胡盧巴(T.foenum-graecum)與黃花苜蓿的親緣關系較近。張宇等[5]用SRAP標記對扁蓿豆(M.ruthenica)-紫花苜蓿雜交種、紫花苜蓿和黃花苜蓿種質資源的遺傳多樣性進行了研究，結果表明，供試苜蓿材料具有較高的異質性。李飛飛等[6]用SSR和ISSR標記對黃花苜蓿、多變苜蓿(M.varia)及紫花苜蓿居群的遺傳多樣性及親緣關系進行了研究，結果表明，居群間的遺傳距離介于0.050～0.230，平均為0.120，多變苜蓿居群VG和黃花苜蓿居群FH表現出了較豐富的遺傳多樣性。Bagavathiannan等[7]用SSR標記對12個野生紫花苜蓿群體、10個紫花苜蓿栽培品種和1份黃花苜蓿種質資源的遺傳多樣性進行了研究，結果表明，野生群體的遺傳變異水平較高。狄紅艷等[8]用ITS序列和trnL-trnF序列對18個白花草木樨(M.alba)和黃花草木樨(M.officinalis)種群的遺傳多樣性進行了研究，結果表明，白花草木樨和黃花草木樨種群間遺傳距離較小，黃花草木樨種群的遺傳多樣性水平較高。【本研究切入點】育種實踐表明，苜蓿屬種間雜交能取得成功[9]，且苜蓿和草木樨的種子和實生苗均非常相似[10]，并可通過體細胞融合產生雜種愈傷組織[11]。據此推斷，若親本選配恰當，苜蓿屬和草木樨屬種間甚至屬間雜交前景廣闊。遠緣雜交親本選配，親緣關系的遠近是關鍵，然而目前還沒有紫花苜蓿、黃花苜蓿、雜花苜蓿、白花草木樨、黃花草木樨間親緣關系的研究報道。研究種質資源的親緣關系,提高遠緣雜交的可預見性。【擬解決的關鍵問題】研究選用過氧化物酶電泳技術，對新疆野生紫花苜蓿、野生黃花苜蓿、野生雜花苜蓿、野生白花草木樨、野生黃花草木樨和紫花苜蓿栽培品種間的親緣關系進行分析，為進一步開展苜蓿屬和草木樨屬資源遺傳改良、雜交親本選配及野生種質資源的開發利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材 料

野生種質資源由塔里木大學草業科學學科組提供，均采自新疆，包括3份野生紫花苜蓿、2份黃花苜蓿、1份雜花苜蓿、5份白花草木樨和5份黃花草木樨。三得利、阿爾岡金和苜蓿王為新疆引進栽培品種，新疆大葉為新疆地方品種，種子由甘肅農業大學草業學院提供。列出試驗材料的名稱、種類、類型、花色、原產地和其他特性。表1

表1供試材料的名稱、種類、類型、花色、原產地和性狀
Table 1List of all the accessions used in this study along with the name, specie, type, flower color, origin and characters description

序號No.材料Accession種類Specie類型Type花色Flowercolor原產地Origin性狀Charactersdescription1紫花苜蓿ⅠM.sativa野生材料紫色新疆拜城植株高大2紫花苜蓿ⅡM.sativa野生材料紫色新疆阿拉爾半匍匐3黃花苜蓿ⅠM.falcata野生材料黃色新疆巴里坤抗寒4雜花苜蓿ⅠM.varia野生材料雜花新疆巴里坤抗寒5紫花苜蓿ⅢM.sativa野生材料紫色新疆阿拉爾抗旱6三得利M.sativa栽培品種紫色法國抗倒伏7新疆大葉M.sativa栽培品種紫色新疆和田葉片特大8阿爾岡金M.sativa栽培品種紫色加拿大抗寒、抗旱9苜蓿王M.sativa栽培品種紫色美國抗逆性強10黃花苜蓿ⅡM.falcata野生材料黃色新疆吉木乃縣抗旱11白花草木樨ⅠM.alba野生材料白色新疆巴里坤抗寒12黃花草木樨ⅠM.officinalis野生材料黃色新疆巴里坤抗寒13白花草木樨ⅡM.alba野生材料白色新疆阿拉爾植株矮小14黃花草木樨ⅡM.officinalis野生材料黃色新疆阿拉爾不分枝15白花草木樨ⅢM.alba野生材料白色新疆阿拉爾植株高大16黃花草木樨ⅢM.officinalis野生材料黃色新疆拜城植株高大17白花草木樨ⅣM.alba野生材料白色新疆拜城植株高大18白花草木樨ⅤM.alba野生材料白色新疆阿拉爾半匍匐19黃花草木樨ⅣM.officinalis野生材料黃色新疆吉木乃縣抗旱20黃花草木樨ⅤM.officinalis野生材料黃色新疆阿拉爾有分枝

1.2 方 法

1.2.1 酶液提取

過氧化物酶從幼苗中提取，每份材料隨機選取100粒種子，在培養箱中發芽，至第8 d，提取酶液。稱取幼苗，置于研缽中，按幼苗重(g)∶緩沖液體積(mL)=1∶4的比例，加入0.1 mol/L的Tric-HCl緩沖液(pH=8.0)[12]，研磨至勻漿，8 000 r/min離心10 min，取上清液分裝于1.5 mL離心管中，置于-80℃冰箱保存備用。

1.2.2 電泳及染色

試驗選用聚丙烯酰胺垂直板凝膠電泳技術對酶液進行分離，膠板厚1.5 mm。分離膠濃度為7%，濃縮膠濃度為4%。選用高離子強度的電極緩沖液(pH=8.3)。以6×DNA loading buffer(溴酚藍，二甲苯青)為指示劑，上樣量20 μL，恒壓電泳，初始電壓100 V，待指示劑凝成藍線后，電壓升至200 V，指示劑移至玻璃板末端時終止電泳，采用醋酸聯苯胺法[13]進行染色。

1.3 數據統計

用遷移率定義不同酶帶，遷移率=酶帶中部的遷移距離/指示劑的遷移距離。以酶帶在相對遷移位置的有無，賦值為“1”或“0”，多態位點百分率=(多態性酶帶數/總酶帶數)×100%，酶帶相似率=(共有酶帶數/總酶帶數)×100%。用NTSYSpc 2.1軟件計算相似系數(genetic similarity，GS)，進行聚類分析和主成分分析，構建聚類圖和主成分二維圖。

2 結果與分析

2.1 酶帶的分布特征及相似程度

過氧化物酶在供試材料中共檢測到了12條酶帶，Rf依次為0.015、0.080、0.125、0.165、0.215、0.250、0.285、0.320、0.345、0.380、0.443和0.500，多態位點百分率為100.00%。紫花苜蓿酶譜共表現出了11條酶帶，Rf為0.080、0.285和0.320的酶帶為共有條帶，Rf為0.125、0.165、0.215、0.250、0.345、0.380、0.443和0.500的酶帶為多態性條帶，多態位點百分率為72.73%，Rf為0.215的酶帶僅出現在黃花苜蓿Ⅱ的酶譜中。草木樨酶譜共表現出了6條酶帶，Rf為0.015、0.038和0.443的酶帶為共有條帶，Rf為0.285、0.345和0.500的酶帶為多態性條帶，多態位點百分率為50.00%。圖1

注:圖中序號與表1同

Note:the accession numbers were the same as those in Table 1

圖120份苜蓿屬和草木樨屬材料過氧化物酶的電泳結果
Fig. 1Electrophoresis results of 20MedicagoandMelilotusaccessions generated by peroxidase electrophoresis

苜蓿屬材料間的酶帶相似率介于30.00%～85.71%，黃花苜蓿Ⅰ和阿爾岡金、新疆大葉和苜蓿王的酶帶相似率最高，為85.71%，黃花苜蓿Ⅰ和雜花苜蓿Ⅰ次之，為83.33%，然后是紫花苜蓿Ⅰ和紫花苜蓿Ⅱ，為80.00%。三得利和黃花苜蓿Ⅱ的酶帶相似率最小，為30.00%。

草木樨屬材料間的酶帶相似率介于0%～100.00%，白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ、黃花草木樨Ⅱ之間，黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ、黃花草木樨Ⅳ之間的酶帶相似率最高，均為100.00%。黃花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅰ、黃花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅱ、黃花苜蓿Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ的酶帶相似率最小，為0%。

苜蓿屬和草木樨屬材料的酶帶相似率介于0%～44.44%。阿爾岡金和白花草木樨Ⅲ的酶帶相似率最大，為44.44%，阿爾岡金和黃花草木樨Ⅰ次之，為37.50%，然后是紫花苜蓿Ⅰ和白花草木樨Ⅲ、紫花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅲ，為36.36%。紫花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅰ、紫花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅱ、紫花苜蓿Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ、紫花苜蓿Ⅲ和白花草木樨Ⅰ、紫花苜蓿Ⅲ和白花草木樨Ⅱ、紫花苜蓿Ⅲ和黃花草木樨Ⅱ、新疆大葉和白花草木樨Ⅰ、新疆大葉和黃花草木樨Ⅰ、新疆大葉和白花草木樨Ⅱ、新疆大葉和黃花草木樨Ⅱ、苜蓿王和白花草木樨Ⅰ、苜蓿王和黃花草木樨Ⅰ、苜蓿王和白花草木樨Ⅱ、苜蓿王和黃花草木樨Ⅱ之間的酶帶相似率最小，為0。表2

2.2相似系數

供試材料的相似系數介于0.083～1.000，平均為0.582。苜蓿屬材料的相似系數介于0.417～0.917，平均為0.698，黃花苜蓿Ⅰ和雜花苜蓿、黃花苜蓿Ⅰ和阿爾岡金、新疆大葉和苜蓿王之間的相似系數最大，親緣關系最近；三得利和黃花苜蓿Ⅱ之間的相似系數最小，親緣關系最遠。

草木樨屬材料間的相似系數介于0.667～1.000，平均為0.867，白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ之間，黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ和黃花草木樨Ⅳ之間的相似系數最大。白花草木樨Ⅰ和白花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅱ和白花草木樨Ⅲ、黃花草木樨Ⅱ和白花草木樨Ⅲ、黃花草木樨Ⅰ和黃花草木樨Ⅴ之間的相似系數最小。

苜蓿屬和草木樨屬材料間的相似系數介于0.083～0.667，平均為0.402，雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅲ、三得利和黃花草木樨Ⅲ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅳ、三得利和白花草木樨Ⅳ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅴ、三得利和白花草木樨Ⅴ、雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅳ、三得利和黃花草木樨Ⅳ間的相似系數最大，親緣關系最近。紫花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅰ、新疆大葉和黃花草木樨Ⅰ、紫花苜蓿Ⅱ和白花草木樨Ⅱ、紫花苜蓿Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ間的相似系數最小，親緣關系最遠。表3

2.3聚類分析

對供試材料進行聚類分析，構建聚類圖。結果表明，20份材料在相似系數0.402處可聚為2類，第Ⅰ類由苜蓿屬材料組成，在相似系數0.726處可聚為3個亞類，第Ⅰ亞類包括紫花苜蓿Ⅰ、紫花苜蓿Ⅱ和黃花苜蓿Ⅱ；第Ⅱ亞類包括黃花苜蓿Ⅰ、雜花苜蓿、阿爾岡金、紫花苜蓿Ⅲ和三得利；第Ⅲ亞類包括新疆大葉和苜蓿王。第Ⅱ類由10份草木樨屬材料組成，在相似系數0.831處可聚為2個亞類，第Ⅰ亞類包括白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ、黃花草木樨Ⅱ、黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ、黃花草木樨Ⅳ和黃花草木樨Ⅴ；第Ⅱ亞類包括黃花草木樨Ⅰ和白花草木樨Ⅲ。同一類或亞類材料間的親緣關系較近。圖2

圖220份苜蓿屬和草木樨屬材料基于相似系數的UPGMA聚類圖
Fig. 2UPGMA dendrogram of 20MedicagoandMelilotusaccessions revealed by cluster analysis based on genetic similarity coefficients

2.4主成分分析

用NTSYSpc 2.1軟件進行主成分分析，構建分析圖，圖中材料位置相互靠近者表示親緣關系較近，遠離者表示親緣關系較遠。苜蓿屬材料在圖中相對分散，遺傳變異水平較高，部分材料間親緣關系較遠。草木樨屬材料在圖中相對集中，彼此間親緣關系較近。白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ，黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ和黃花草木樨Ⅳ在圖中的位置相同，親緣關系較近，用過氧化物酶不能區分其遺傳差異。圖3

圖320份苜蓿屬和草木樨屬材料基于過氧化物酶的主成分分析二維圖
Fig. 3 Two-dimensional plot of 20MedicagoandMelilotusaccessions as revealed by principal component analysis using peroxidase data

3 討 論

3.1供試種質資源的親緣關系

研究表明，苜蓿屬3個種10份材料間的相似系數介于0.417～0.917，平均為0.698，與張宇等[5]用SRAP標記研究紫花苜蓿和黃花苜蓿種質資源親緣關系時所得結果相近，低于陳立強等[14]用過氧化物酶電泳技術研究紫花苜蓿品種親緣關系時所得結果、Talebi等[15]和Mandoulakani等[16]分別用不同分子標記研究紫花苜蓿群體遺傳多樣性時所得結果、周良彬等[17]用SRAP標記研究雜花苜蓿種質資源遺傳多樣性時所得結果、高素玲等[18]用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術研究黃花苜蓿種質資源遺傳多樣性時所得結果。與理論推理一致，種間資源的平均相似系數遠小于種內資源，親緣關系較遠。

與苜蓿屬相比，草木樨屬材料間的相似系數較高，介于0.667～1.000，平均為0.867，與狄紅艷等[8]用ITS和trnL-trnF序列研究白花草木樨和黃花草木樨種群遺傳多樣性時所得結果相近。研究結果還表明，部分草木樨材料間的相似系數為1.000，親緣關系太近，用過氧化物酶不能區分其遺傳差異，與狄紅艷等[8]所得結論完全相符，總體上，草木樨種質資源親緣關系較近。

苜蓿屬和草木樨屬材料間的相似系數介于0.083～0.667，平均為0.402，遠低于劉磊等[4]用ISSR標記研究苜蓿屬和胡盧巴屬種質資源親緣關系時所得結果，與胡盧巴屬相比，苜蓿屬和草木樨屬種質資源的親緣關系相對較遠。

3.2種質資源地理分布與親緣關系的相關性

雜交和漸滲是生物界普遍存在的現象，是生物遺傳變異的重要途徑，在物種進化中扮演著重要角色[19-20]，有研究表明，至少25%的植物存在種間雜交和基因漸滲現象[21]。紫花苜蓿、黃花苜蓿、白花草木樨和黃花草木樨均屬異花授粉植物[3,22]，可借助風力和昆蟲傳粉，為其遺傳物質在自然條件下相互滲透創造了條件。供試材料中，雜花苜蓿和黃花苜蓿Ⅰ、白花草木樨Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ、白花草木樨Ⅳ和黃花草木樨Ⅲ兩兩間的采集地相同，在聚類分析中，也分別被聚于相同亞類，彼此親緣關系最近，可能與長期的種間基因漸滲有關。結合親緣關系和分布地區，巴里坤雜花苜蓿可能就是黃花苜蓿Ⅰ和當地紫花苜蓿栽培品種通過開放授粉產生的野生群體。供試材料中也有部分種質資源的親緣關系與地理來源沒有明顯的關系，這與張宇等[5]研究紫花苜蓿和黃花苜蓿種質資源遺傳多樣性時所得結論相同，這些種質資源在長期的進化過程中形成了完全的生殖隔離，即使分布地區相同，花期相遇，基因滲透程度也相對較小。

3.3苜蓿和草木樨屬間雜交的可行性論證和親和性預測

隨著種內資源的日趨枯竭，通過遠緣雜交實現種質創新越來越受到人們的重視。目前，我國在苜蓿遠緣雜交領域進行了大量研究和實踐，取得了豐碩成果。通過紫花苜蓿和黃花苜蓿雜交，育成了甘農1號、草原1號、草原2號、圖牧1號、赤草1號和新牧1號苜蓿；通過扁蓿豆和紫花苜蓿雜交，育成了龍牧801苜蓿和龍牧803苜蓿[23-25]。隨著生物工程技術的迅速發展，遠緣雜交也逐漸成為各種育種技術相互滲透，相互綜合的焦點。毛雅妮[26]對苜蓿和草木樨體細胞融合的基礎條件進行了研究，為體細胞融合奠定了基礎。賀輝[11]建立了完整的紫花苜蓿、草木樨組培體系，對紫花苜蓿、白花草木樨原生質體融合的條件進行了研究，并以PEG為融合劑，誘導產生了紫花苜蓿和白花草木樨雜種細胞和雜種愈傷組織。基于現代生物技術，苜蓿和草木樨雜交已初見成效，然而，目前的研究多集中于雜交和培養，親本選配方面的研究鮮見報道，實踐表明，正確選配親本，是遠緣雜交能否取得成功的關鍵，通常親本間親緣關系愈近，雜交成功的可能性就愈大[3]。黃花苜蓿Ⅰ和雜花苜蓿、黃花苜蓿Ⅰ和阿爾岡金之間，白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ之間，黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ和黃花草木樨Ⅳ之間，雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅲ、三得利和黃花草木樨Ⅲ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅳ、三得利和白花草木樨Ⅳ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅴ、三得利和白花草木樨Ⅴ、雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅳ、三得利和黃花草木樨Ⅳ之間的相似系數相對較大，親緣關系較近，雜交成功的可能性較大。

同工酶是基因表達的產物[13]，親本間共有的酶帶數越多，基因的相似程度就越大，理論上，遠緣雜交的親和性就越高。從酶帶相似程度分析，苜蓿材料中，黃花苜蓿Ⅰ和阿爾岡金酶帶相似率最高；草木樨材料中，白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ、黃花草木樨Ⅱ之間，黃花草木樨 Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ、黃花草木樨Ⅳ之間的酶帶相似率最高；苜蓿和草木樨材料中，阿爾岡金和白花草木樨Ⅲ的酶帶相似率最高，酶帶相似率越高，基因相似程度較高，雜交成功的可能性較大。

4結 論

供試種質資源中，草木樨屬材料的平均相似系數最大，在主成分分析圖中的位置相對集中，大部分材料間的親緣關系相對較近。與之相比，苜蓿屬材料的平均相似系數較小，在主成分分析圖中的位置分散，材料間的親緣關系相對較遠。苜蓿屬和草木樨屬材料間的平均相似系數最小，在聚類分析中，供試種質資源被聚為兩類，苜蓿屬材料為一類，草木樨屬材料為一類，大部分材料間親緣關系較遠。

苜蓿材料中，黃花苜蓿Ⅰ和雜花苜蓿、黃花苜蓿Ⅰ和阿爾岡金之間親緣關系較近，雜交成功的可能性較大。草木樨材料中，白花草木樨Ⅰ、白花草木樨Ⅱ和黃花草木樨Ⅱ之間，黃花草木樨Ⅲ、白花草木樨Ⅳ、白花草木樨Ⅴ和黃花草木樨Ⅳ之間親緣關系較近，雜交成功的可能性較大。苜蓿和草木樨材料中，雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅲ、三得利和黃花草木樨Ⅲ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅳ、三得利和白花草木樨Ⅳ、雜花苜蓿和白花草木樨Ⅴ、三得利和白花草木樨Ⅴ、雜花苜蓿和黃花草木樨Ⅳ、三得利和黃花草木樨Ⅳ之間親緣關系較近，雜交成功的可能性較大；阿爾岡金和白花草木樨Ⅲ的酶帶相似率最高，基因相似程度較高，雜交成功的可能性較大。

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Genetic Relationship amongMedicagoandMelilotusGermplasm

Resources Revealed by Peroxidase Electrophoresis

CHEN Li-qiang1, BIAN Yan-xia2, MA Chun-hui3,XU Li-ming1,ZHAO Hao-bo1,YANG Hao-hong1

(1.CollegeofAnimalScience,TarimUniversity/KeyLaboratoryofTarimAnimalHusbandryScienceandTechnology,XinjiangProduction&ConstructionCorps,AlarXinjiang843300,China; 2.LogisticManagementOffice,TarimUniversity,AlarXinjiang843300,China; 3.CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShiheziUniversity,ShiheziXinjiang832000,China)

Abstract：【Objective】 This study aims to analyze the generic relationships among Medicago and Melilotus germplasm resources and enhance the predictability of distant hybridization of those accessions.【Method】The genetic relationships among 20 accessions of 3 Medicago species and 2 Melilotus species were investigated using peroxidase electrophoresis.【Result】The band similar rates within and between Medicago and Melilotus accessions ranged from 30.00% to 83.33%, 33.33% to 100.00% and 0% to 44.44%, respectively. The similarity coefficients of those accessions ranged from 0.417 to 0.917, 0.667 to 1.000 and 0.083 to 0.667, respectively. The Medicago and Melilotus accessions could be classified into two separate groups at the similarity coefficient of 0.402 based on cluster analysis. Compared to Melilotus accessions, the Medicago accessions in principal component analysis plot were relatively dispersed, indicating that the level of genetic variation within Medicago species was relatively higher.【Conclusion】Some accessions from different species and genera had relatively close genetic relationships and high band similar rates, therefore, the hybridization among them may be easy to succeed.

Key words:Medicago; Melilotus; peroxidase; genetic relationship; distant hybridization

中圖分類號：S812.3

文獻標識碼：A

文章編號：1001-4330(2016)03-0523-10

作者簡介:陳立強(1981-)，男，甘肅會寧人，講師，碩士，研究方向為牧草種質資源及遺傳育種，(E-mail)clqdky@126.com通訊作者:馬春暉(1966-)，男，新疆哈密人，教授，博士，研究方向為牧草生產與加工，(E-mail)chunhuima@126.com

基金項目:新疆生產建設兵團塔里木畜牧科技重點實驗室開放課題(HS201405)；塔里木大學校長基金項目(TDZKQN201502)；新疆生產建設兵團塔里木畜牧科技重點實驗室開放課題(HS201103)；國家牧草產業技術體系(CARS-35)

收稿日期：2015-07-09

doi:10.6048/j.issn.1001-4330.2016.03.019

Fund project:Open Projects of Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science & Technology (HS201405); Principal Foundation Project of Tarim University (TDZKQN201502); Open Projects of Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science & Technology (HS201103); National Forage Industry Technological System (CARS-35).