咪鮮胺與戊唑醇及混劑對蘋果斑點落葉病的毒力測定

關(guān)春林 石玉星

摘要：采用病菌毒力測定法，測定了咪鮮胺與戊唑醇及其混劑對蘋果斑點落葉病菌的毒力測定結(jié)果表明：咪鮮胺與戊唑醇混配比為1∶4、 1∶1時表現(xiàn)為增效作用，4∶1、1∶3、3∶1時為拮抗作用，其中咪鮮胺與戊唑醇以1∶1混合后，其共毒系數(shù)最高，為184.13，其LC50為0.2728ug/ml.

關(guān)鍵詞：咪鮮胺；戊唑醇；蘋果斑點落葉病；毒力測定；增效作用

基金項目：國家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（201203030）

中圖分類號： TV698 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.17.029

蘋果斑點落葉病又稱褐紋病、褐色葉枯病、褐色斑點病和大星病等，其病原為鏈格孢蘋果專化型 （Alternaria m ali），屬半知菌亞門鏈格孢屬。蘋果斑點落葉病主要對葉片造成為害，使得葉片早落，同時也為害新梢和果實，對樹勢和產(chǎn)量顯著影響。葉片染后，發(fā)病病初期為褐色點狀，其后逐漸擴(kuò)大為紅褐色，邊緣紫褐色，病部中央常具一深色小點或同心輪紋。空氣濕度較大時，病部正反面均可長出墨綠色至黑色霉?fàn)钗铮床【姆稚咦庸：头稚咦印Ｏ摹⑶锛靖邷馗邼瘢【敝沉看螅l(fā)病周期縮短，秋梢部位葉片病斑迅速增多，一片病葉上常有病斑10～20個，多斑融合成不規(guī)則大斑，葉即穿孔或破碎，生長停滯，枯焦脫落。葉柄、1年生枝和徒長枝上，出現(xiàn)褐至灰褐色病斑，邊緣有裂縫。幼果出現(xiàn)1～2毫米的小圓斑，有紅暈，后期變黑褐色小點或成瘡痂狀。影響葉片正常生長，常造成葉片扭曲和皺縮，病部焦枯，易被風(fēng)吹斷，殘缺不全。果實染病，在幼果果面上產(chǎn)生黑色發(fā)亮的小斑點或銹斑。病部有時呈灰褐色瘡痂狀斑塊，交界處有龜裂，病斑不剝離，僅限于病果表皮，但有時皮下淺層果肉可呈干腐狀木栓化。

咪鮮胺又叫撲菌唑、撲霉挫，是廣譜性殺菌劑，主要是通過抑制甾醇的生物合成，使病菌細(xì)胞壁受到干擾。雖不具內(nèi)吸作用，但具有一定的傳導(dǎo)作用。當(dāng)通過種子處理進(jìn)人土壤的藥劑，主要降解為易揮發(fā)的代謝產(chǎn)物，易被土壤顆粒吸附，不易被雨水沖刷。此藥在土壤中對土壤內(nèi)其他生物低毒，但對某些土壤中的真菌有抑制作用，對于子囊菌和半知菌引起的多種農(nóng)作物病害防效極佳。

戊唑醇是一種高效、廣譜、內(nèi)吸性三唑類殺菌農(nóng)藥，具有保護(hù)、治療、鏟除三大功能，殺菌譜廣、持效期長。已有研究表明，與所有的三唑類殺菌劑一樣，戊唑醇能夠抑制真菌的麥角甾醇的生物合成。戊唑醇在全世界范圍內(nèi)用作種子處理劑和葉面噴霧，殺菌譜廣，不僅活性高，而且持效期長。戊唑醇主要用于防治水稻、花生、小麥、香蕉、蘋果、梨以及玉米高粱等作物上的多種病害，其在全球50多個國家的60多種作物上取得登記并廣泛應(yīng)用。該品用于防治油菜菌核病，不僅防效好，而且具有抗倒伏，增產(chǎn)作用明顯等特點對病菌的作用機(jī)制為抑制其細(xì)胞膜上麥角甾醇的去甲基化，使得病菌無法形成細(xì)胞膜，從而殺死病菌。有關(guān)戊唑醇的合成研究很多，其中多以對氯甲醛為起始原料，經(jīng)過醛酮縮合、催化加氫、環(huán)氧化反應(yīng)、加成反應(yīng)等步驟制備戊唑醇。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1供試病菌 蘋果斑點落葉病菌由山西農(nóng)大實驗室提供

1.1.2供試藥劑 30%戊唑醇SC（江蘇克勝集團(tuán)有限公司）

25%咪鮮胺EC（江蘇輝豐農(nóng)業(yè)有限公司）

1.2實驗方法

1.2.1藥劑的配制 用丙酮將咪鮮胺和戊唑醇原藥溶解，制成1000μg/ml母液。再按1∶4、4∶1、1∶1、7∶1、1∶7、1∶3、3∶1的配比制成混劑，根據(jù)預(yù)設(shè)實驗結(jié)果將藥劑稀釋到0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml六個濃度。

1.2.2毒力測定 用菌絲生長速率法。將PDA培養(yǎng)基加熱熔化，待其冷卻至40℃～45℃ 時分別配置藥劑的母液，母液分別用定量無菌水稀釋成所需濃度，加入到冷卻的培養(yǎng)基中，制成含不同濃度藥劑的含藥培養(yǎng)基平板冷卻備用。培養(yǎng)基凝固后，用打孔器取活菌菌餅，將菌絲那面覆蓋其培養(yǎng)基中央，每處理3次重復(fù)，放到恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，4天后十字交叉測量不同濃度的培養(yǎng)基上的菌落直徑，計算生長抑制率，求出毒力回歸方程。

1.3數(shù)據(jù)處理

用Finney機(jī)率值分析法對濃度——菌落直徑進(jìn)行分析，然后運(yùn)用DPS軟件計算出線性回歸方程式及LC50值。

采用孫云沛法計算各配比組合的共毒系數(shù)（CTC）

KA=LC50（A）/LC50（A）×100%

KB=LC50（A）/LC50（B）×100%

KM=LC50（A）/LC50（M）×100%

KM^=KA×PA+KB×PB

CTC=KM/KM^×100%

（KA：試劑A的毒力指數(shù)；KB：試劑B的毒力指數(shù)；KM：混劑的實際毒力指數(shù)；KM^：混劑的理論毒力指數(shù)；PA：混劑中組分A的比例；PB：混劑中組分B的比例）

共毒系數(shù)判定標(biāo)準(zhǔn)CTC>120為增效作用；CTC<80為拮抗作用；80

2結(jié)果與分析

2.1單劑的毒力測定結(jié)果

以下為咪鮮胺和戊唑醇的毒力測定結(jié)果，兩種單劑對蘋果斑點落葉病菌的毒力相差較大，咪鮮胺LC50為0.3337μg/ml，戊唑醇LC50為1.0155μg/ml.

2.2 混配劑毒力及共毒系數(shù)測定結(jié)果

由表1看出，咪鮮胺和戊唑醇混合后7種混合比例混劑LC50（μg/ml）分別為：0.4296，0.2728，0.7723，0.9034，0.4541，

1.2008，0.5513。經(jīng)計算得各比例混劑共毒系數(shù)，混配3 、6 、7，CTC值分別為49.91、55.97、72.73，表現(xiàn)拮抗作用；混配4、5，CTC值為104.75、80.22，表現(xiàn)為相加作用；混配1、2，CTC值為167.81、184.13，表現(xiàn)增效作用，其中混配2增效作用最為明顯，毒力最高，其LC50為0.2728μg/ml，CTC值為184.13 。

3討論

本實驗測得了咪鮮胺、戊唑醇及其5種比例混劑對蘋果斑點落葉病菌的毒力，結(jié)果表明，單劑及混配的LC50分別為：咪鮮胺0.3337μg/ml、戊唑醇1.0155μg/ml、混配（1∶4）0.4296μg/ml、混配（1∶1）0.2728μg/ml、混配（4∶1）0.7723μg/ml、混配（1∶7）0.9034μg/ml、混配（7∶1）0.4541μg/ml、混配（1∶3）1.2008、混配（3∶1）0.5513μg/ml 。7種混配比例的CTC值分別為：167.81、184.13、49.91、104.75、80.22、55.97、72.73 。兩種藥劑按照1∶4、1∶1比例混配表現(xiàn)出了增效作用，其中1∶1混配組合增效作用最高，CTCT值為184.13，此混配組合對蘋果斑點落葉病菌的毒力也最高，LC50為0.2728μg/ml 。4∶1、1∶3、3∶1三組比例混配表現(xiàn)出了拮抗作用，其CTC值為49.91、55.97、72.73 。

由此證明這兩種農(nóng)藥具有混配的可行性，但也應(yīng)注意其表現(xiàn)拮抗作用的混配比例。由于時間關(guān)系，且供試菌源有限，本試驗只進(jìn)行了7種比例的混劑毒力測定，其他混配比例及效果有待進(jìn)一步驗證。

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作者簡介：關(guān)春林，碩士，山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，助理研究員，研究方向：旱作農(nóng)業(yè)研究。