李洪 錢軍 呂朝軍 吳挺佳 岑選才 茍志輝
摘要:采用室內生物測定方法研究了薇甘菊(Mikania micrantha Kunth)次生物質對椰心葉甲(Brontispa longissima Gestro)產卵選擇行為的影響。結果表明,各溶劑提取物均對椰心葉甲表現出驅避作用,在處理后72、96 h,浸漬各提取物后葉片的成蟲著落量均顯著低于對照組,且三氯甲烷提取物和石油醚提取物的驅避效果最佳,處理后96h的驅避率分別為62.22%:和66.22%;產卵忌避試驗結果表明,甲醇提取物、三氯甲烷提取物和石油醚提取物處理后96、144h,椰心葉甲的產卵量與對照相比,均顯著下降。
關鍵詞:薇甘菊(Mikania micrantha Kunth);椰心葉甲(Brontispa longissima Gestro);次生物質;產卵忌避活性
薇甘菊和椰心葉甲均是近年來入侵中國的重要有害生物,并對當地的生態環境和相關產業的健康發展造成了嚴重影響。目前對這兩種有害生物的防控技術研究方面已經投入了大量的財力和物力,
眾所周知,自然界的植物均可通過本身的次生代謝物質來影響鄰近生物,這是植物長期以來為生存競爭而產生的自然化學調控現象,這些次生物質不僅影響其鄰近植物的生長發育,而且對昆蟲、病原菌同樣產生影響。本研究擬針對薇甘菊體內的次生物質,研究其對同為人侵生物的椰心葉甲的產卵忌避活性,開發其在椰心葉甲防治上的應用價值,以期為薇甘菊次生物質在害蟲綜合治理中的應用提供依據,也為薇甘菊的利用提供一條新的途徑。
1.材料與方法
1.1材料
供試昆蟲:椰心葉甲各蟲態均采集于田間,室內飼養不低于10代,選取大小一致的健康個體供試。
薇甘菊提取物制備:稱取薇甘菊干粉30 g,放入具塞三角瓶中,分別加入300 mL環己烷、丙酮和正丁醇。在室溫條件下超聲波提取10 min,減壓抽濾后得提取液。反復提取3次,合并所得提取液。置于旋轉蒸發儀(R-210)上減壓濃縮得到不同溶劑的薇甘菊提取物,將各提取物轉入棕色瓶中,稱重并計算提取率,置于4℃冰箱內保存備用。
1.2試驗方法
1.2.1薇甘菊次生物質對成蟲的驅避活性 參考李朝緒等的方法。將薇甘菊不同溶劑提取物用丙酮稀釋至10 mg/mL。選取新鮮未展開的海南本地椰子樹心葉,浸漬各提取物稀釋液5 s,充分晾干溶劑(丙酮)后,以7片葉子為一組用橡皮筋捆扎,懸掛于養蟲箱內。將即將羽化的椰心葉甲蛹200頭放入養蟲箱內,處理后每24 h統計一次各處理葉片上的椰心葉甲成蟲著落量,連續觀察4次。以只浸漬丙酮處理為對照,重復4次。
1.2.2成蟲產卵忌避活性 葉片處理方法同成蟲驅避活性。不同之處在于試驗蟲體為健康的處于產卵期的椰心葉甲成蟲200頭,雌雄比為1:1。接蟲后每48 h觀察一次,連續觀察3次,記錄捆扎葉片上的著卵量,之后重新將葉片捆扎。以只浸漬丙酮處理為對照,重復4次。計算驅避率。
1.2.3數據分析方法 采用Duncan新復極差法分析各處理數據之間的差異。
2.結果與分析
2.1薇甘菊次生物質對椰心葉甲成蟲的驅避活性
薇甘菊不同溶劑提取的次生物質對椰心葉甲成蟲驅避活性見表1和表2。結果表明,各溶劑提取物均對椰心葉甲表現出驅避作用。在處理后72 h和96 h,各提取物處理葉片的成蟲著落量均顯著低于對照組,且三氯甲烷提取物和石油醚提取物的驅避效果最佳,處理后96 h的驅避率分別為62.22%和66.22%,成蟲的著落量分別為21.25頭和19.00頭,而對照處理組高達56.25頭。
2.2薇甘菊次生物質對椰心葉甲成蟲的產卵忌避活性
薇甘菊不同溶劑提取的次生物質對椰心葉甲的產卵忌避活性見表3和表4。結果表明,除去離子水提取物外,在處理后96 h和144 h,甲醇提取物、三氯甲烷提取物和石油醚提取物中椰心葉甲的產卵量與對照相比均顯著下降。其中三氯甲烷提取物在藥后96 h和144 h對椰心葉甲的產卵忌避率分別為62.29%和68.30%,石油醚提取物的忌避率則為66.86%和69.93%。
3.小結與討論
產卵是植食性昆蟲行為活動中的一個重要環節,出于產卵活動的安全及后代的食料影響的考慮,昆蟲會慎重選擇產卵地點,這在一定程度上反映了植食性昆蟲對植物利用的策略,也影響了昆蟲種群的演化和繁衍。與此同時,植物的產卵刺激物質和驅避物質在調節昆蟲產卵行為過程中也起著十分重要的作用,植物氣味對昆蟲的嗅覺作用在寄主選擇中處于首要地位。
目前已有研究報道多種非寄主植物揮發物不僅對寄主氣味具有掩蔽作用,而且對植食性昆蟲還具有驅避作用,如接骨木揮發油對煙蚜和夜蛾的產卵量具有抑制作用:非寄主植物如薄荷和艾菊的揮發物對豆茅蚜則有驅避作用。薇甘菊揮發油對小菜蛾、黃曲條跳甲和猿葉蟲有顯著的產卵驅避作用,同時也具有一定的觸殺毒力。青葙提取物對紅脈穗螟的產卵忌避作用和卵孵化率亦具有影響,在產卵忌避試驗中,甲醇和石油醚提取物的驅避率和干擾效果最大,不同溶劑提取物處理均可影響紅脈穗螟卵的孵化,在對后期1齡幼蟲的影響中,甲醇、乙醇和石油醚提取物的作用最強,校正死亡率分別達53.00%,45.54%和51.75%。本研究結果表明,通過薇甘菊次生物質處理后,椰心葉甲在椰子心葉上的著落量顯著降低,其中三氯甲烷提取物和石油醚提取物的驅避效果最佳,處理后96 h的驅避率分別為62.22%和66.22%,其在心葉上的產卵量明顯減少,三氯甲烷提取物在處理后96 h和144 h對椰心葉甲的產卵忌避率分別高達62.29%和68.30%,石油醚提取物在處理后96 h和144 h的忌避率則分別為66.86%和69.93%。提取物的趨避作用直接導致了椰心葉甲在取食之前保護了植物免遭害蟲的侵害,這對保護椰樹具有重要價值,也符合有害生物綜合治理的策略。另外,供試的薇甘菊4種溶劑提取物對于椰心葉甲的產卵忌避效果之間存在差異,表明薇甘菊次生物質對椰心葉甲的生物活性是與其化學成分相關的,因此薇甘菊體內對椰心葉甲具有產卵忌避作用的次生化合物成分值得進一步深入研究。