安圖化學發光法檢測高血壓5項激素相關性分析

張 巖，劉運德

（1．天津醫科大學研究生院，天津300070；2．天津醫科大學代謝病醫院檢驗科，天津300070）

論著

安圖化學發光法檢測高血壓5項激素相關性分析

張 巖1，劉運德2

（1．天津醫科大學研究生院，天津300070；2．天津醫科大學代謝病醫院檢驗科，天津300070）

目的：分析不同廠家試劑盒檢測高血壓5項激素[腎素、血管緊張素Ⅱ（AⅡ）、醛固酮（ALD）、皮質醇（COR）和促腎上腺皮質激素（ACTH）]濃度值差異，并探討用化學發光法檢測高血壓5項激素濃度值對原發性和繼發性高血壓分型診斷、治療及研究的意義。方法：選取159例高血壓患者(收縮壓≥140 mmHg，舒張壓≥90 mmHg)，分別用DRG酶聯免疫試劑盒和安圖生物化學發光試劑盒測定腎素濃度；選取138例高血壓患者，分別用ENZO酶聯免疫試劑盒和安圖生物化學發光試劑盒測定AⅡ濃度；選取146例高血壓患者，分別用IBL酶聯免疫試劑盒和安圖生物化學發光試劑盒測定ALD濃度；選取239例高血壓患者及316例高血壓患者，分別用ROCHE全自動電化學發光試劑和安圖生物化學發光試劑盒測定COR及ACTH濃度。結果：不同廠家試劑盒檢測高血壓濃度存在一定的偏差，但相關性良好（相關系數R＞0．95）。結論：化學發光法做為一種高靈敏、高特異、高準確的定量檢測方法，定量檢測高血壓5項激素對原發性和繼發性高血壓分型診斷、治療及研究具有重要的意義。

腎素；血管緊張素Ⅱ；醛固酮；皮質醇；促腎上腺皮質激素；化學發光法；高血壓

據2010年全國居民營養與健康狀況調查資料顯示，我國成人高血壓患病率為18．8%，全國有高血壓患者約1．6億[1]。在高血壓的診治中,除原發性高血壓外，還有一組特殊群體—繼發性高血壓也不能忽視[2]。原發性高血壓憑目前的醫學技術尚無法查明病因，因此只能長期服降壓藥來控制，而繼發性高血壓則不同，由某些特定的病因引起，且往往由于血壓長期居高不下，藥物治療很難奏效，但可以通過查明病因來有效控制血壓[3]。目前檢測高血壓5項[腎素、血管緊張素Ⅱ（AⅡ）、醛固酮（ALD）、皮質醇（COR）、促腎上腺皮質激素（ACTH）]已成為原發性和繼發性高血壓分型診斷、治療及研究的重要指標[4-6]，而現今國內進行高血壓5項檢測采用ELISA以及放射免疫分析法（RIA）占多數。隨著中國檢驗技術的進步，化學發光法（CLIA）定量檢測試劑盒也進入了中國市場，不同廠家由于使用包被物、標記材料及方法學等方面的差異，會出現同一份標本用不同廠家試劑盒檢測數值方面的差異[7]，為此我們開展了該方面的研究。

1 資料和方法

1．1 一般資料

1．1．1 2013年3月-2014年3月天津市代謝病醫院收治的159例高血壓患者（收縮壓≥140 mmHg，舒張壓≥90 mmHg），男性106例，女性53例，年齡42～68歲，平均55歲，病程2～10年，其中輕型48例（149 mmHg≥收縮壓≥140 mmHg和/或99 mmHg≥舒張壓≥90mmHg），中型85例（179mmHg≥收縮壓≥160 mmHg和/或109 mmHg≥舒張壓≥100 mmHg），重型26例（收縮壓≥180 mmHg和/或舒張壓≥100 mmHg）[8]，用于進行腎素的測定。

1．1．2 2013年8月-2014年2月河南省人民醫院收治的146例高血壓患者，男性96例，女性50例，年齡45～65歲，平均57歲，病程2～10年，其中輕型48例，中型64例，重型26例，用于進行血管緊張素Ⅱ的測定。

1．1．3 2013年8月-2014年2月天津市代謝病醫院收治的138例高血壓患者，男性86例，女性52例，年齡42～68歲，平均55歲，病程2～10年，其中輕型48例，中型64例，重型34例，用于進行醛固酮的測定。

1．1．4 2012年l2月-2014年1月鄭州安圖生物有限公司收集的239例高血壓患者，男性158例，女性81例，年齡42～70歲，平均58歲，病程2～10年，其中輕型68例，中型124例，重型47例，用于進行皮質醇的測定。

1．1．5 2012年l2月-2014年1月鄭州安圖生物有限公司收集的316例高血壓患者，男性219例，女性97例，年齡42～68歲，平均55歲，病程2～10年，其中輕型98例，中型164例，重型54例，用于促腎上腺皮質激素的檢測。

1．1．6 由于標本用量和需要病人配合，另外可以減小隨機誤差，故每個比較組采用不同來源臨床標本。

1．1．7 測定前患者應停用降壓藥3周以上；停用利尿劑4周以上；停用避孕藥6周以上；不宜停藥的患者應改用對試驗影響較小的藥物。

區域噴發活動以石炭早期的噴發活動為主，二疊世噴發次之。巖性主要是輝石安山玢巖、安山玢巖。噴發類型為爆發相—噴溢相。海底噴發為主，陸相噴發次之。

1.2 不同試劑盒方法學和對比方法

1.2.1 由于代理商供貨問題，與安圖對比的試劑盒采用不同廠家的試劑盒，均為進口已上市公司。

1.2.2 DRG腎素定量檢測試劑盒（ELISA），為定量檢測試劑，正常參考值范圍為0.81～128 pg/mL。

1.2.3 ENZO血管緊張素Ⅱ定量檢測試劑盒（ELISA），為定量檢測試劑，正常參考值范圍為4.6～1 000 pg/mL。

1.2.4 IBL醛固酮定量檢測試劑盒（ELISA），為定量檢測試劑，正常參考值范圍為10～1 000 pg/mL。

1.2.5 羅氏全自動電化學發光儀，與其配套的皮質醇及促腎上腺皮質激素定量檢測試劑盒，正常參考值范圍分別為0.018～63.4μg/dL及1.0～2000pg/mL。

1.3 測定方法

1.3.1 腎素的測定 利用DRG腎素定量檢測試劑盒及鄭州安圖生物腎素定量檢測試劑盒分別測定159例高血壓患者血漿中腎素的含量。

1.3.2 血管緊張素Ⅱ的測定 利用ENZO血管緊張素Ⅱ定量檢測試劑盒及鄭州安圖生物血管緊張素Ⅱ定量檢測試劑盒分別測定138例高血壓患者血漿中血管緊張素Ⅱ的含量。

1.3.3 醛固酮的測定 利用IBL醛固酮定量檢測試劑盒及鄭州安圖生物醛固酮定量檢測試劑盒分別測定159例高血壓患者血漿中血管緊張素Ⅱ的含量。

1.3.4 皮質醇及促腎上腺皮質激素的測定 利用羅氏全自動電化學發光儀及鄭州安圖生物皮質醇及促腎上腺皮質激素定量檢測試劑盒分別測定239例及316例高血壓患者血漿中皮質醇及促腎上腺皮質激素的含量。

1.4 統計學處理 采用SPSS18.0統計分析軟件進行數據處理和統計分析，檢測結果進行χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 腎素檢測 DRG酶免定量試劑和安圖生物化學發光試劑在檢定血漿中腎素含量方面無顯著差別,回算樣本濃度值相關性R大于0.95，綜合分析對比結果,兩方試劑均按照統一標準進行定量溯源,相關性分析見圖1。

圖1 腎素檢測相關性分析Fig 1 Correlation analysis of renin detection

2.2 AⅡ檢測 ENZO酶免定量試劑和安圖生物化學發光試劑在檢定血漿中AⅡ含量方面無顯著差別，回算樣本濃度值相關性R大于0.95，見圖2。

圖2 血管緊張素Ⅱ檢測相關性分析Fig 2 Correlation analysis of angiotensinⅡdetection

2.3 ALD檢測 IBL酶免定量試劑和安圖生物化學發光試劑在檢定血漿中ALD含量方面無顯著差別，回算樣本濃度值相關性R大于0.95，見圖3。

圖3 醛固酮檢測相關性分析Fig 3 Correlation analysis of aldosterone detection

2.4 COR檢測 羅氏電化學發光試劑和安圖生物化學發光試劑在檢定血漿中COR含量方面無顯著差別，回算樣本濃度值相關性R大于0.95，見圖4。

圖4 皮質醇檢測相關性分析Fig 4 Correlation analysis of cortisol detection

2.5 ACTH檢測 羅氏電化學發光試劑和安圖生物化學發光試劑在檢定血漿中ACTH含量方面無顯著差別，回算樣本濃度值相關性R大于0.95，見圖5。

圖5 促腎上腺皮質激素檢測相關性分析Fig 5 Correlation analysis of the detection of ACTH

3 討論

通過對不同廠家試劑盒檢測高血壓5項激素濃度值進行相關性分析發現，在定量標準的選取方面和臨床樣本檢測方面，目前市場檢測高血壓的主要方法和鄭州安圖生物化學發光定量檢測試劑盒無顯著性差異，相關性R大于0.95。

化學發光免疫分析是將化學發光技術與免疫反應相結合，用于檢測微量化學物質的一項新型免疫測定技術。其檢測原理是借助發光底物自身的發光強度直接進行測定。酶促化學發光系統的原理在于免疫反應中的酶作用于發光底物,發光底物在酶的作用下,產生激發態的中間體。當這種中間體回到穩定的基態時,可發射出光子，利用發光信號測量儀器可測量光量子產額。由此可以建立標準曲線并計算樣品中待測物質的含量[9]?；瘜W發光免疫分析具有高靈敏度和寬線性范圍，廣泛適用于高血壓5項激素的定量檢測。

研究發現腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RAAS）基因的變異參與了原發性高血壓的發生[10]，RAAS是一個十分復雜的多層次的內分泌系統,有研究發現腎素活性（PRA）和ALD水平可能顯著影響著血壓的晝夜節律模式[11],并與靶器官損害有密切關系[12]。雖然目前COR導致血壓升高的機制仍不明確,但其可能通過多種作用途徑直接或間接的導致機體發生一系列異常,包括血容量的增加、外周血管阻力增加、心輸出量增加等病理生理改變[13-14]。高分泌的COR與皮質醇增多癥的高血壓發病機制相關，皮質醇增多癥分為ACTH依賴性（COR高、ACTH高）和ACTH非依賴性（COR高、ACTH低）兩種類型[15]。皮質醇增多癥是一種能夠引起繼發性高血壓的重要疾病,其中80%以上的成人皮質醇增多癥患者伴發高血壓，因此檢測高血壓5項激素已成為原發性和繼發性高血壓分型診斷、治療及研究的重要指標。

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（2015-10-25收稿）

R544．1

A

1006－8147（2016）03-0253-03

張巖（1984-），男，技師，碩士在讀，研究方向：免疫學；通信作者：劉運德,E-mail：yundeliu@126.com。