卡式配血法常見原因分析及應對措施

吳 娟（江蘇省泗洪縣人民醫(yī)院檢驗科 223900）

臨床上在輸注全血、紅細胞懸液或血漿之前，必須進行受血者和獻血者之間的交叉配血試驗，以確保輸血安全。目前，國內大中型醫(yī)院輸血科交叉配血試驗常用柱凝集（CAT）試驗，又名微柱凝膠卡式法。該法基于分子篩過濾作用，采用密度梯度離心分離游離紅細胞和凝集的紅細胞［1］。在配血過程中會遇到不同程度的凝集現(xiàn)象，這給結果判斷帶來一定程度的干擾。作者通過臨床實驗研究，對于在卡式配血中出現(xiàn)的假陽性結果進行原因分析并尋求解決的辦法，現(xiàn)總結如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 對2011年1月至2012年2月在本實驗室進行卡式配血的2 095例結果進行分析研究。進行交叉配血的受血者樣本均采用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）抗凝的全血。

1.2 儀器與試劑 試劑卡為強生公司提供的Ortho BioVueR System，孵育器和雙相離心機均是Ortho BioVueR System專用。

1.3 方法

1.3.1 交叉配血操作方法 將受血者與獻血者的全血標本離心分離紅細胞，分別將受血者與獻血者紅細胞與等滲生理鹽水配成0.3%紅細胞懸液。首先在主、次側凝膠管中加入50μL BLISS，將受血者血清40μL與獻血者紅細胞懸液10μL加入主側凝膠管中，將受血者紅細胞懸液10μL與獻血者血清40 μL加入次側凝膠管中，加樣后將試劑卡置于Ortho BioVue孵育器中37℃溫育10min，卡取出后使用Ortho BioVue雙相離心機離心5min，取出肉眼觀察結果。

1.3.2 結果判定 陰性結果：紅細胞完全沉降于凝膠管底部，表明受血者與獻血者血型相合。陽性結果：紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中存在紅細胞凝塊（拖尾）［2］，表明受血者與獻血者血型不相合。按陽性結果的復檢處理程序是對受血者和獻血者進行血型鑒定，采用試管法作為復檢對照。檢查儀器參數(shù)、操作過程進行復檢。

2 結 果

通過對2 095例卡式交叉配血過程和結果進行分析，發(fā)現(xiàn)假陽性12例。其原因為溫育時間縮短的5例，占41.7%，高脂血標本3例，占25.0%，紅細胞懸液混勻不充分2例，占16.7%，離心速度和時間不夠1例，占8.3%，產(chǎn)生不規(guī)則抗體1例，占8.3%。

3 討 論

該試劑卡是基于微柱凝集的原理而設計。正常具有抗原的紅細胞將與相應的抗體發(fā)生凝集反應，Ortho BioVue試劑卡的微柱中含有玻璃珠介質和試劑。加入紅細胞并將試劑離心后，發(fā)生凝集的紅細胞會被阻擋在玻璃珠的上面，而未凝集的游離紅細胞則會在離心力的作用下通過玻璃珠之間的間隙到達微柱的底部。然而，由于各種原因很可能造成假陽性反應［3］。

作者所在輸血科對造成假陽性的原因進行各方面的分析，有時急診為了節(jié)省時間縮短了溫育時間，尤其在冬天，由于溫育時間短或存在冷凝集的原理，假陽性發(fā)生率較高，常表現(xiàn)為拖尾，可通過檢查儀器參數(shù)，試管法復檢發(fā)現(xiàn)。試管法可通過顯微鏡鏡檢凝集、聚集、假凝集，而在卡式法則全部表現(xiàn)為陽性結果。配血的標本是隨機抽的，有部分標本是高脂血，脂血中存在顆粒狀物質，導致結果假陽性（占25.0%），遇到高脂血標本先將紅細胞用等滲生理鹽水洗2～3遍再配成紅細胞懸液，可以預防假陽性發(fā)生。由于紅細胞懸液配制不均，懸液中存在凝集紅細胞被吸到凝膠管中，而這種凝集紅細胞可能因為抗凝不充分引起。紅細胞在凝膠柱離心不下去，造成假陽性占16.7%。不抗凝或抗凝不充分可造成假陽性［4］，通過試管法復檢可發(fā)現(xiàn)。離心時間和速度不充分造成假陽性占8.3%，表現(xiàn)為主、次側均為陽性結果，通過檢查儀器參數(shù)可發(fā)現(xiàn)。產(chǎn)生不規(guī)則抗體占8.3%，一般是反復輸血的患者，通過抗體篩查可發(fā)現(xiàn)［5］。

由于卡式法的靈敏度高、特異性好、結果準確、操作簡單、快速、結果可以長期保存，有利于復檢和會診，易于實現(xiàn)自動化、標準化、提高管理水平。卡使用前一定先離心，以防運輸過程及揮發(fā)造成凝膠附著于微柱上，撕膜動作要輕，以防止試劑濺出，影響反應結果。紅細胞懸液濃度過高、血清中含有高效價凝集素、血清中含纖維蛋白原、溫育時間過短、離心不徹底、血清中存在不規(guī)則抗體［6］、血清蛋白異常增高都會導致假陽性。所以在卡式配血中一定要嚴格按操作規(guī)程執(zhí)行，陽性結果一定要進行復檢，確保輸血安全。

［1］ 施新顏，沈強，孔惠良.微柱凝集技術在交叉配血試驗中的應用［J］.浙江中西醫(yī)結合雜志，2004，14（7）：420－421.

［2］ 閆朝春，蔣玲，陳麗梅.導致微柱凝膠卡式交叉配血試驗假陽性結果的原因分析［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32（15）：1737－1738.

［3］ 王培華.輸血技術學［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：167－168.

［4］ 陳才生，翁彬，王雷萍.微柱凝膠技術配血影響因素分析［J］.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志，2006，21（6）：56－57.

［5］ 陳燕萍，王長奇，朱方，等.微柱凝膠技術鑒定血型和篩檢不規(guī)則抗體的臨床應用［J］.實驗與檢驗醫(yī)學，2008，26（6）：719.

［6］ 龔建光，詹慧芳.IgG抗－C致配血不合1例［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2010，7（3）：284.