某縣級醫院2012
—2014年不同臨床標本分離大腸埃希菌ESBLs檢出率及其耐藥性

夏浩海, 王學敏

(通山縣人民醫院, 湖北 通山　437600)

·論著·

某縣級醫院2012
—2014年不同臨床標本分離大腸埃希菌ESBLs檢出率及其耐藥性

夏浩海, 王學敏

(通山縣人民醫院, 湖北 通山437600)

[摘要]目的分析某山區縣級醫院大腸埃希菌臨床感染分布及耐藥性，為該區域臨床合理治療大腸埃希菌感染提供依據。 方法對2012—2014年某院臨床送檢的各類標本進行細菌培養、菌株鑒定與藥敏試驗，超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)檢測用微量稀釋法初篩,紙片擴散法做確證試驗；采用 WHONET 5.6及SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析。 結果271株大腸埃希菌, 主要分離自中段尿(占26.94%)。產ESBLs大腸埃希菌檢出率為49.82%，以痰標本檢出率最高(56.52%)，但不同標本分離的大腸埃希菌中產ESBLs菌株檢出率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。藥敏結果顯示，對青霉素類耐藥率最高(>90%)，對頭孢噻吩和頭孢呋辛的耐藥率>75%，對阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦敏感性較好(耐藥率<10%)，未發現對碳青霉烯類抗生素耐藥的大腸埃希菌，產ESBLs株對大多數抗菌藥物的耐藥率高于非產ESBLs株。結論分離大腸埃希菌的標本主要來自中段尿，產ESBLs菌株耐藥性更高。

[關鍵詞]大腸埃希菌; 超廣譜β-內酰胺酶; 臨床分布; 抗藥性，微生物; 耐藥性

[Chin J Infect Control，2016，15(5)：327-329,333]

隨著廣譜和超廣譜抗菌藥物的不合理使用，致病菌對抗菌藥物的耐藥性也日趨嚴重。大腸埃希菌是人類腸道最重要的定植菌，也是臨床常見的致病菌，是最常見的產超廣譜β-內酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)細菌之一。2013年 CHINET耐藥監測顯示大腸埃希菌為臨床分離率最高的病原菌，占所有病原菌的19.86%[1]。產ESBLs是大腸埃希菌主要的耐藥機制，此類菌株一般有較高的耐藥性，能達到有效治療的抗菌藥物較少。本院是鄂南山區一所綜合性縣級醫院，近年來，抗菌藥物的不規范使用，尤其是昂貴的廣譜和超廣譜抗菌藥物的不合理使用，導致各種致病菌的耐藥性也日趨嚴重。因此，分析大腸埃希菌臨床感染分布及耐藥性，尤其是產ESBLs大腸埃希菌，對指導本區域臨床醫生合理使用抗菌藥物，控制醫院感染具有重要意義。本研究對2012—2014年住院及門診患者送檢的各種標本中分離的大腸埃希菌及其耐藥性進行統計分析，現報告如下。

1材料與方法

1.1菌株來源

收集2012年1月—2014年12月某院住院及門診患者送檢各類標本分離的大腸埃希菌，剔除同一患者重復分離株。質控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603，購自湖北省臨床檢驗中心。

1.2細菌鑒定及藥敏

根據第3版《 全國臨床檢驗操作規程》[2]及梅里埃試劑提供的試劑說明書規定，革蘭陰性桿菌接種于O/F反應管，發酵型細菌上梅里埃提供的ID32E板進行鑒定和ATB G5板進行藥敏試驗，16～24 h后，采用梅里埃ATB Expression型微生物鑒定與藥敏測試儀測定，ATB G5藥敏板條的判斷標準依據2011版美國臨床實驗室標準化協會(CLSI) M100-S21標準執行。

1.3ESBLs檢測

按照CLSI 規定，利用梅里埃ATB G5板條上1 μg/mL的頭孢他啶初篩，初篩陽性者，利用30 μg的頭孢他啶、30 μg/10 μg的頭孢他啶/克拉維酸和30 μg的頭孢噻肟、30 μg/10 μg的頭孢噻肟/克拉維酸的藥敏紙片進行產 ESBLs菌株表型確證實驗。

1.4統計學方法

臨床感染標本分布及耐藥性采用WHONET 5.6統計，應用SPSS 19.0 統計軟件進行分析，P≤0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1標本來源分布

2012年1月—2014年12月共送檢各種臨床標本9 515份，1 664份標本培養陽性，陽性率為17.49%；分離大腸埃希菌271株，其中 135 株為產ESBLs，產ESBLs大腸埃希菌檢出率為49.82%。大腸埃希菌主要分離自中段尿，占26.94%。產ESBLs菌株檢出率以痰標本最高(56.52%)，但不同標本分離的大腸埃希菌中產ESBLs菌株檢出率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。具體分布情況見表1。

表1　2012—2014年大腸埃希菌及其產ESBLs株標本分布

2.2藥敏試驗結果

271株大腸埃希菌對20種臨床常用抗菌藥物藥敏結果顯示，對青霉素類耐藥率最高>90%；對頭孢噻吩和頭孢呋辛的耐藥率>75%；對阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦敏感性較好，耐藥率均<10%；未檢出耐亞胺培南或美羅培南的大腸埃希菌。除亞胺培南、美羅培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦外，產ESBLs的菌株耐藥性高于非產ESBLs菌株(χ2=9.69～167.99，均P<0.05)。大腸埃希菌對頭孢西丁的耐藥率低于青霉素類和頭孢菌素類抗生素(χ2=6.42～217.24，均P<0.05)。大腸埃希菌對第三代頭孢菌素類抗生素中頭孢噻肟的耐藥率高于頭孢他啶(χ2=14.29，P<0.05)。見表2。

表2　產ESBLs與非產ESBLs大腸埃希菌對常用抗菌藥物耐藥情況(株數，%)

3討論

大腸埃希菌是臨床感染性疾病中最常見致病菌， 其廣泛分布于自然環境中，可引起泌尿系統、呼吸系統，以及傷口感染等，嚴重時可引起血流感染。本研究結果顯示，大腸埃希菌主要分布于中段尿，與黃家祥、岑葉平等[3-4]報道的結果一致，在中段尿陽性標本中占48.67%，說明大腸埃希菌是引起泌尿系統感染的主要病原菌。

藥敏結果顯示，271株大腸埃希菌對亞胺培南、美羅培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率<10%，對阿莫西林/克拉維酸、奈替米星和頭孢西丁耐藥率在30%左右，而對其他被檢測的抗菌藥物耐藥率均>39%，對青霉素類抗生素的耐藥率>90%，可見本區域大腸埃希菌耐藥性已經十分嚴峻，可供經驗性使用的抗菌藥物非常有限。雖然碳青霉烯類抗生素治療大腸埃希菌引起的感染效果顯著，但碳青霉烯類抗生素的價格昂貴，且抗菌譜廣，易致菌群失調造成二重感染[5]，因此，碳青霉烯類抗生素應作為治療大腸埃希菌感染的最后選擇。

2012—2014年271株大腸埃希菌中135株產ESBLs，檢出率為49.82%， 略低于2013年中國CHINET關于大腸埃希菌產ESBLs檢出率54.00%的報道[1]， 接近于本省某縣級醫院48.75%的報道[6]，但是高于國內何衛平、儲從家等[7-8]低于40%的報道，可能與本區域大量使用第三代頭孢類抗生素有關。 頭孢西丁是頭霉素類抗生素，具有高度抗β-內酰胺酶活性，此也是本研究中大腸埃希菌對頭孢西丁敏感性高于青霉素類和頭孢菌素類抗生素的原因。第三代頭孢菌素類抗生素中，頭孢他啶對大腸埃希菌的耐藥率明顯低于頭孢噻肟，這與我國主要流行CTX-M型ESBLs有關[9]，CTX-M型ESBLs對頭孢噻肟的水解能力明顯強于頭孢他啶。本研究中，產ESBLs的大腸埃希菌對大多數抗菌藥物的耐藥率高于非產ESBLs株，且表現出多重耐藥性，可能是由于ESBLs由質粒介導，攜帶ESBLs編碼質粒的菌株往往同時攜帶AmpC酶，以及氨基糖苷類、喹諾酮類等抗菌藥物的耐藥基因，而呈現多重耐藥性[10]。

綜上所述，大腸埃希菌對常用抗菌藥物耐藥形勢較為嚴峻，尤其是產ESBLs大腸埃希菌的高檢出率應引起重視。臨床上應及時掌握細菌耐藥特性，嚴格按照藥敏結果指導臨床用藥，合理謹慎使用抗菌藥物。

[參 考 文 獻]

[1]胡付品, 朱德妹, 汪復, 等.2013年中國CHINET細菌耐藥性監測[J].中國感染與化療雜志, 2014, 14(5):365-374.

[2]葉應嫵, 王毓三, 申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社, 2006:890-923.

[3]黃家祥, 葉書來, 周馨.臨床分離的2 208株病原體分布及耐藥性[J].中國感染控制雜志, 2014, 13(1):36-39.

[4]岑葉平, 常燕子, 費紅軍, 等.大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥分析[J].檢驗醫學與臨床, 2012, 9(7):838-840.

[5]王忠臣, 穆金智.94株泌尿系統感染產ESBLs大腸埃希菌的耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床, 2015, 12(7):961-962.

[6]趙華.某縣級醫院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性差異[J].中國感染控制雜志, 2014, 13(11):693-695.

[7]何衛平, 崔恩博, 王錢, 等.235株血流感染大腸埃希菌耐藥性分析[J].中國感染控制雜志, 2015, 14(3):170-173.

[8]儲從家, 孔繁林, 王樹坤, 等.149株血培養大腸埃希菌的檢測及耐藥性[J].中國感染控制雜志, 2011, 10(5):376-377.

[9]Liu W, Chen L, Li H, et al. Novel CTX-M (bete)-lactamase genoptype distribution and spread into multiple species of Enterobacteriaceae in Changhai, Southern China [J].J Antimicrob Chemother,2009,63(5)：895-900．

[10] 秦湧, 馮旰珠, 趙水娣, 等.2005—2007年醫院感染大腸埃希菌產ESBLs、AmpC酶及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志, 2009, 19(17):2337-2340.

(本文編輯：文細毛)

Detection of extended-spectrum β-lactamases and antimicrobial resistance ofEscherichiacoliisolated from different clinical specimens of a county hospital in 2012-2014

XIAHao-hai，WANGXue-min(ThePeople’sHospitalofTongshanCounty,Tongshan437600,China)

[Abstract]ObjectiveTo analyze the distribution and antimicrobial resistance of Escherichia coli (E. coli) causing infection in a county hospital, and provide basis for clinical treatment of E. coli infection. MethodsFrom 2012 to 2014, all kinds of clinical specimens in a hospital were performed bacterial culture, identification， and antimicrobial susceptibility testing； extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) were initially screened by broth microdilution method, and confirmed by disc diffusion method； data were statistically analyzed by WHONET 5.6 and SPSS 19.0 software. Results271 isolates of E. coli were detected, and mainly isolated from midstream urine (26.94%). The detection rate of ESBLs-producing E. coli was 49.82%, most were isolated from sputum specimens ( 56.52%), but there was no significant difference in detection rates of ESBLs-producing E.coli isolated from different specimens (P>0.05). Antimicrobial susceptibility testing results showed that the resistance rate of E.coli to penicillins was the highest (>90%), to cefalotin and cefuroxime were both >75%, susceptibility rates to amikacin and piperacillin / tazobactam were both high (resistance rates<10%), carbapenem-resistant strain was not found, resistance rates of ESBLs-producing strains to most antimicrobial agents were significantly higher than non-ESBLs-producing strains.ConclusionE. coli is mainly isolated from midstream urine specimens, antimicrobial resistance of ESBL-producing strains is more serious.

[Key words]Escherichia coli; extended-spectrum β-lactamase; clinical distribution; drug resistance, microbial; drug resistance

[收稿日期]2015-09-29

[作者簡介]夏浩海(1979-)，男(漢族)，湖北省通山縣人，主管檢驗師，主要從事細菌耐藥性監測研究。 [通信作者]夏浩海E-mail:xiahh008@163.com

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2016.05.010

[中圖分類號]R378.2+1

[文獻標識碼]A

[文章編號]1671-9638(2016)05-0327-04