康定獨活種子揮發油化學成分的研究

鄭立，高必興，蘭志瓊，鄧晶晶，盧先明，艾青青，陳玲

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康定獨活種子揮發油化學成分的研究

鄭立，高必興，蘭志瓊，鄧晶晶，盧先明，艾青青，陳玲

目的：分析康定獨活種子揮發油的化學成分，以期為康定獨活種子的開發利用以及種子質量評價提供實驗依據。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取康定獨活揮發油，利用氣相色譜-質譜聯用法（GC-MS）對其揮發油化學成分進行測定及分析，歸一化法測定其相對含量。結果：檢出134個色譜峰，鑒定出47個化合物，占揮發油總量的76.03%。結論：首次通過科學實驗發現康定獨活種子揮發油中主要成分為醇類、酯類化合物，其中1-辛醇（41.99%)、丁酸辛酯(14.86%)、醋酸辛酯（4.03%）、異丁酸辛酯（1.59%）等，占總揮發油量62.47%。

康定獨活;種子;揮發油;GC-MS

目前，我國藥用獨活因產地不同而形成不同的商品，著名的有川獨活、資丘獨活、恩施獨活、巴東獨活、浙獨活等[1]。從古今多種本草學論著來看，獨活的原植物是有多種的，大多數屬于傘形科當歸屬（Angelica L.）和獨活屬（Heracleum L.）的植物，也有五加科樟木屬（Atalia L.）的植物[2]。其中康定獨活來源于傘形科獨活屬植物康定獨活Heracleum souliei de Boiss. Herb.的干燥根。主產于四川西部和西北部，生長于海拔2600-3500米的山坡上[3]。康定獨活資源豐富，在主產地甘孜州、阿壩州常作為止血良藥供臨床藥用，也常被作為藏藥“珠佳”用以殺蟲，治潰瘍，麻風，疥瘡，止血。康定獨活種子資源豐富，且與其根一樣富含揮發油。但目前國內外尚未有對康定獨活種子揮發油成分鑒定的研究。本文首次采用水蒸氣蒸餾的方法從康定獨活的種子中提取出揮發油，并運用GC-MS法分析其主要的化學成分,為進一步開發利用該潛在藥用資源及為其種子質量評價提供科學的依據。

1 儀器和材料

1.1 儀器與試劑

色譜柱Agilent Technologies 7890A GC System；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。

1.2 材料

供試材料經成都中醫藥大學藥學院盧先明教授鑒定為傘形科獨活屬植物康定獨活Heracleum souliei de Boiss. Herb.的干燥種子。

2 方法

2.1 康定獨活種子揮發油的提取

參考《中國藥典》2015年版四部通則揮發油測定法甲法提取[4]。提取的揮發油用無水Na2SO4干燥，封裝備用，得油率為8%（v/w）。

2.2 康定獨活種子揮發油定性分析

2.2.1 氣相色譜-譜分析條 色譜柱為Agilent 19091S-433HP-5MS(0.25 mm×30 m×0.25 μm)；進樣口溫度280℃；載氣為氦氣，流量：1.0 mL/min；分流比50∶1，進樣量1 μL；升溫程序柱溫60 ℃，保持3 min，以5 ℃/min升至120 ℃，再以2 ℃/min升至180 ℃，最后20 ℃/min升至260 ℃，然后保持至分析完成。

2.2.2 氣相色譜-質譜分析條件 電離方式：EI，電子轟擊能：70 eV；離子源溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃；掃描范圍：50～500 amu；掃描頻率：2.1次/s。

3 結果

取適量康定獨活種子揮發油，用正己烷溶解稀釋，過0.22 μm微孔濾膜。揮發油成分經過質譜計算機數據系統檢索（質譜數據庫NIST08）與CAS號查詢，結合相關文獻，綜合各項分析鑒定，確定其成分，共確定47種化合物，占總揮發油的76.03%，具體結果見表1、圖1。

表1 康定獨活種子揮發油分析結果

29(3aS,3bR,4S,7R,7aR)-7-methyl-3-methylidene-4-(propan-2-yl)octahydro-1H-cyclopenta[1,3]cyclopropa[1,2]benzene24.038204C15H240.06 30(+)-花側柏烯25.085202C15H220.39 31l-b-Bisabolene25.235204C15H240.27 32異戊酸龍腦酯25.545238C15H26O20.11 331H-Benzocycloheptene,2,4a,5,6,7,8-hexahydro-3,5,5,9-tetramethyl-, (4aR)-26.186204C15H240.08 34γ-欖香烯27.233204C15H240.04 35欖香素27.607208C12H16O30.07 36Butanoic acid, dodecylester28.792256C16H32O20.25 37反-十氫化萘29.882204C15H240.06 386,10,14-三甲基-2-十五烷酮40.725268C18H36O0.07 39十九烷43.225268C19H400.08 40十七烷 52.220240C17H360.02 41葉綠醇52.872296C20H40O0.02 42茴芹內酯53.225246C13H10O50.04 43軟木花椒素57.113244C15H16O30.05 44正三十四烷59.602478C34H70-0.01 45二十一烷61.792296C21H440.09 46十八烷63.950254C18H380.03 47亞油酸64.623280C18H32O20.26

圖1 康定獨活種子揮發油總離子流圖

4 結論與討論

經鑒定，共確定康定獨活種子揮發油中47種化合物，占總揮發油的76.03% 。其中主要含有醇類，酯類，烯類。如1-辛醇、丁酸辛酯、右旋萜二烯，分別占揮發油含量的41.99%、14.86%、0.63%，其他還有醛類、烷類等物質。另外還檢識出一類香豆素類物質軟木花椒素，含量占總揮發油的0.05%。基于課題組前期研究發現，康定獨活根與其種子揮發油都主要以醇類，酯類為主。兩者都含有1-辛醇、異丁酸辛酯、丁酸辛酯、甲基丁香酚四種成分，其中康定獨活揮發油1-辛醇（7.12%）、乙酸-2-氯-1,3-苯基丙基酯（12.14%）、異戊酸龍腦酯(5.55%)含量較高。

本文首次采用水蒸氣蒸餾法提取康定獨活種子揮發油，結合高必興[5]關于白亮獨活生藥學研究基礎，下一步應通過實驗確定升溫程序，分流比，進樣口溫度，進樣量等最佳條件，以此建立一個以氣相色譜-質譜聯用分析康定獨活種子揮發油成分的方法，為進一步開發和利用該潛在藥用資源提供科學依據。

[1] 張才煜,張本剛,楊秀偉.獨活的化學成分研究[J].解放軍藥學學報,2007,23(4)：241-245.

[2] 周剛,馬寶花.中藥獨活的研究進展[J].中國當代醫藥,2012, 16：15-16.

[3] 中國科學院中國植物志編輯委員會編.中國植物志[M].第55卷第3分冊[M].北京：科學出版社,1992：202.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(四部)[S].2015年版.北京：中國醫藥科技出版社,2015：203-204.

[5] 高必興,鄧晶晶,鄭 佳,盧先明.GC-MS分析白亮獨活揮發油成分[J].中藥與臨床,2014,05：9-10.

（責任編輯：胡慧玲）

Research of volatile oil of Duhuo seed in Kangding

/ZHENG Li, GAO Bi-xing, LAN Zhi-qiong, DENG Jing-jing, LU Xianming, AI Qing-qing, CHEN Ling//(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective:To investigate the chemical composition of volatile oil of Duhuo seed in Kangding, in order to provide experimental evidence for the quality evaluation and development and utilization of Duhuo seed.Method:Volatile oil in Duhuo seed was extracted by steam distillation. Gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS) were used to detect the chemical composition of volatile oil, and the volatile oil content was measured using relative content normalization method.Result:134 peaks were detected, and 47 compounds were identified accounting for 76.03% of the total volatile oil.Conclusion:There are mainly alcohols and esters including 1-octanol (41.99%), butyric acid octyl ester (14.86%), acetic acid octyl ester (4.03%), isooctyl ester (1.59%) which accounting for 62.47% of volatile oil in Duhuo seed.

Duhuo in kangding; seeds; volatile oil; GC-MS

R282.6

A

1674-926X(2016)05-002-03

四川省藏藥標準的制定(301-377)；中藥飲片調劑包裝貯藏養護技術研究-成都中醫藥大學中藥基礎基地科研訓練及科研能力提高項目子課題（J1310034-07）

成都中醫藥大學藥學院 中藥材標準化教育部重點實驗室 四川省中藥資源系統研究與開發利用重點實驗室省部共建國家重點實驗室培育基地，四川 成都 611137

鄭立（1995-），女（漢族），本科生，主要研究方向為中藥品種質量與資源開發

Tel：18408210842 Email：1095148157@qq.com

蘭志瓊（1979－），女（漢族），博士，副教授，碩士生導師，第四批四川省中醫藥管理局學術帶頭后備人選，主要從事中藥品種質量與資源開發的教學、科研工作

Tel：028-61800231 Email：lanlan1979512@126.com

2015-10-27