上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究

羅海峰，杜　漸，張雋開，鞏　鵬，譚　廣，王洪江

(大連醫科大學附屬第一醫院 普外二科，遼寧 大連 116011)

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上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究

羅海峰，杜漸，張雋開，鞏鵬，譚廣，王洪江

(大連醫科大學附屬第一醫院 普外二科，遼寧 大連 116011)

[摘要]目的研究miR-125b在肝癌發生發展中的作用機制，及其表達對于肝細胞癌化療耐受性的影響。方法采用qPCR檢測肝癌患者癌組織、癌旁組織、Huh-7細胞系(對照組)及轉染miR-125b mimic的Huh-7細胞系(轉染組)中miR-125b表達情況。采用流式細胞儀及MTT法檢測對照組及轉染組細胞周期及增殖情況。Western blot 檢測Huh-7細胞系轉染后Mcl-1蛋白表達。設3組：對照組為正常培養細胞，miRNA control組轉染miRNA control，miR-125b mimic組轉染miR-125b mimic。Western blot 檢測Mcl-1特異性siRNA阻斷Mcl-1蛋白表達后，細胞凋亡相關蛋白caspase3的表達情況。設3組：對照組細胞正常培養；順鉑組加入順鉑，終濃度50 μg/mL培養；轉染+順鉑組轉染Mcl-1-siRNA，48 h后加入順鉑，終濃度50 μg/mL。結果肝癌組織miR-125b表達較癌旁組織明顯減低，為癌旁組織的(46.24±8.53)%，P<0.05。 miR-125b mimic 轉染 Huh-7細胞后，轉染組細胞G1/S比例較對照組明顯增高(P<0.05)；Mcl-1蛋白表達較對照及miRNA control組下調(P<0.05)；轉染+順鉑組中的Caspase3蛋白表達較對照組及順鉑組明顯增高(P<0.05)。結論上調miR-125b的表達可以抑制肝癌細胞增殖，抑制靶蛋白Mcl-1表達，促進順鉑誘導凋亡，具有抑癌基因的作用。

[關鍵詞]miRNA；肝細胞癌；化療耐藥性

[引用本文]羅海峰，杜漸，張雋開，等.上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究[J].大連醫科大學學報，2016,38(1)：12-15.

肝細胞癌是威脅人們身體健康的重要惡性腫瘤之一，其發生、發展和化療耐藥性的研究對治療具有重要意義。miR-125b在肝細胞癌發生發展中所起到的作用越來越受到人們的重視。有研究表明miR-125b可能通過調控Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)，影響肝細胞癌的生物學特性。Mcl-l基因在許多正常組織中廣泛表達，對維持多種細胞的成熟與分化有重要的意義，而Mcl-l蛋白表達上調與許多腫瘤的發生相關。……