復方雙花片聯合西藥對急性分泌性中耳炎患者血清及分泌物炎癥因子的影響

沈宏忠，翁柏岳

(浙江新昌人民醫院 耳鼻喉科，浙江 紹興 312500)

復方雙花片聯合西藥對急性分泌性中耳炎患者血清及分泌物炎癥因子的影響

沈宏忠Δ，翁柏岳

(浙江新昌人民醫院 耳鼻喉科，浙江 紹興 312500)

目的 探討復方雙花片聯合西藥對急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)患者血清及分泌物腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的影響。方法 選擇2014年8月～2016年6月浙江新昌人民醫院收治的200例(244耳)SOM患者隨機分為2組，對照組100例(120耳)僅予常規西醫治療，治療組100例(124耳)在對照組基礎上聯合復方雙花片治療，治療前后分別采集患者外周靜脈血及中耳積液利用流式細胞術微球陣列法對TNF-α、IL-6及IL-10進行檢測，對比2組療效。結果 治療組的總有效率為97.58%高于對照組的85.00%，差異有統計學意義(P<0.05)。2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無明顯變化，差異無統計學意義。2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 復方雙花片聯合西藥治療SOM的療效顯著，可有效減少中耳積液中的TNF-α、IL-6、IL-10等炎癥因子。

復方雙花片；急性分泌性中耳炎；TNF-α；IL-6；IL-10

急性分泌性中耳炎(secretory otitis media，SOM)是以中耳積液為主要特征的中耳非化膿性炎性疾病，臨床表現主要為耳悶塞感、耳痛及聽力下降等，為臨床常見耳部疾病。研究顯示，感染、咽鼓管功能異常及自身免疫反應是引發SOM發病的主要原因，且在“上下呼吸道炎癥一致性”概念得到闡述后，自身免疫反應在SOM發生、發展過程中的作用越來越受關注[1]。腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)、白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)及白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)是機體在免疫應答中產生的重要炎癥介質，生物學活性多樣。研究表明，SOM患者耳積液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平異常升高，參與了局部免疫反應[2]。復方雙花片是國家中藥保護品種，主要成分包括金銀花、穿心蓮、連翹、板藍根，具有清熱解毒、反病開竅、消腫散結的作用，對慢性咽炎、上呼吸道感染、流行性腮腺炎等均具有良好的治療效果。本文旨在觀察復方雙花片聯合西藥治療SOM的效果，并探討其對血清及分泌物TNF-α、IL-6及IL-10的影響，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年8月～2016年6月浙江新昌人民醫院收治的200例(244耳)SOM患者。隨機分為對照組100例(120耳)：男51例，女49例，年齡18～66歲，平均(42.39±3.36)歲，病程1～9d，平均(5.23±0.75)d，左耳77只，右耳43只；治療組100例(124耳)：男54例，女46例，年齡18～63歲，平均(40.05±5.11)歲，病程1～10d，平均(5.45±0.63)d，左耳75只，右耳49只。2組基線資料比較差異無統計學意義。

納入標準：①滿足以下至少一項主訴：耳內悶塞感，耳鳴，耳痛，聽力下降；②耳內鏡或鼓氣耳鏡見鼓室積液征象，鼓膜充血、內陷或液平，活動度受限，鼓膜完整；③純音聽閾測試判斷為傳導性聽力損失，聲導抗圖為平坦型(B型)或高負力型(C型)；④病程10 d以內；⑤對本研究涉及藥物不過敏；⑥知情同意。

排除標準：①患有嚴重肝腎心疾病或者對本次研究具有影響的其他疾病；②處于哺乳期或者妊娠期婦女；③依從性差，未按照醫囑或者研究要求進行治療者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：對照組僅予常規西醫治療，口服頭孢類抗生素7 d，1片/次，2次/天；噴0.5%鹽酸羥甲唑啉噴霧劑(云南盤龍云海藥業有限公司，國藥準字H20113189)，2次/天；治療組在對照組基礎上聯合復方雙花片(陜西康惠制藥股份有限公司，國藥準字90Z610992)治療，4片/次，3次/天。2組均治療7 d復診。

1.2.2 一般檢查：檢查癥狀及體征，進行純音測聽檢查以及聲阻抗鼓室導抗檢查。

1.2.3 標本采集與檢測：治療前后分別采集外周靜脈血2 mL，EDTA抗凝，血清分離后保存于-80 ℃環境中備用；同時在耳內鏡下在鼓膜緊張部前下象限穿刺抽取中耳積液0.3～0.5 mL，保存于-80 ℃環境中備用。利用流式細胞術微球陣列法檢測血清及中耳積液中的TNF-α、IL-6及IL-10水平。取連續倍比稀釋的標準品和待測樣品(樣品量為50 μL)，樣品孵育嚴格按試劑盒說明書執行，通過流式細胞儀與BDCBA軟件對有關數據進行處理分析。具體方法見文獻[2]。

1.2.4 療效評價標準：參照生部頒發的分泌性中耳炎臨床研究指導[3]：①治愈：臨床癥狀消失，耳鏡檢查無異常，聲阻抗鼓室圖為A型，聽力恢復正常；②好轉：臨床癥狀好轉，耳鏡檢查輕微異常，聲阻抗鼓室圖為C型，純音測聽氣骨導減小，但未完全正常，聽力有所恢復；③無效：不滿足前述2點。總有效率=(治愈例數+好轉例數)/總例數×100%。

2 結果

2.1 2組患者療效比較 治療組患者的總有效率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。2組患者治療期間無明顯不良反應病例。見表1。

表1 2組療效比較[n(%)]Tab.1 Comparison of clinical efficacy between two groups[n(%)]

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比較 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無明顯變化，組間比較均無統計學意義。見表2。

表2 2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平比較Tab.2 Comparison of serum levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

2.3 2組治療前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比較 2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對照組，組間比較有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組治療前后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平比較Tab.3 Comparison of the levels of TNF-α,IL-6 and IL-10 pre-and post-treatment between two ±s,pg/mL)

*P<0.05，與本組治療前比較，compared with same group pre-treatment；#P<0.05,與治療后對照組比較，compared with control group post-treatment

3 討論

SOM為臨床的常見病與多發病，兒童發病率高于成人，較多患者是繼發于上呼吸道感染，由于難以明確病因，所以較難實現個體化治療，導致預后差異較大，個別患者遷延不愈可致粘連性中耳炎、鼓室硬化等嚴重后果而造成聽力損失。目前認為，SOM的基本病因是咽鼓管功能異常，此外，其與感染、自身免疫學反應也有關。研究指出，SOM患者的中耳腔內可能存在一種局部細胞因子網，對炎癥因子的活化與黏膜酶的活性起著重要作用，直接或間接地決定SOM的轉歸[4]。SOM患者伴有淋巴細胞亞群異常情況，既往研究發現，與健康人比較，上呼吸道感染繼發的SOM患者外周血CD4+CD25+調節性T細胞(Tregs)的比例顯著提高[5]。Tregs具有免疫抑制功能，與TNF-α、IL-6、IL-10的關系緊密，Tregs可在自身抗原及多克隆激活劑的作用下活化，并分泌出TGF-β與IL-10等多種因子，且還可表達轉錄因子Foxp3等，參與炎癥反應、自身免疫性疾病以及腫瘤的發生發展[6]。IL-10具有多種效應，不僅可干擾調節性T淋巴細胞與效應T淋巴細胞的活性，而且還可抗血管生成及免疫抑制作用。IL-6參與機體抗感染免疫，并具有調節免疫應答的作用。TNF分泌適量可參與免疫反應，抑制Tregs功能，但分泌過量則會引起炎癥反應性疾病及自身免疫性疾病，早有研究證實，在SOM耳積液中的TNF可能多由耳粘膜局部產生并起免疫抑制作用，且含量過高可能會致病情經久不愈[7]。余少卿等[8]研究了多種細胞因子在SOM患者中的表達，結果發現這類患者與健康對照組比較，外周血中TNF、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6及IL-10等細胞因子的表達并無明顯差異，差異僅存在于耳積液分泌物中，前者耳積液中細胞因子的表達明顯偏高。這提示中耳粘膜參與急性分泌性中耳炎患者局部的免疫反應。中耳的原有保護性免疫被打破，處于免疫失衡狀態，炎癥因子參與中耳局部免疫反應，清楚了這一點，曾有學者采取地塞米松骨室局部注射對本病進行治療，結果發現患者病情緩解快，且全身用藥不良反應少[9]。

在SOM的治療方面，西醫治療主要是通過抗生素抗炎癥、鹽酸羥甲唑啉或鹽酸氨溴索等抑制黏液分泌以及使用鼻部收斂劑等，雖然有一定療效，但部分患者無法達到預期效果；而鼓膜穿刺等治療又受到患者配合度的制約。中醫認為，SOM屬“耳鳴”、“耳脹痛”、“卒聾”等范疇，耳僅為癥狀的表現，真正病因乃肺。目前，中西醫結合已成為臨床治療的一大趨勢。在中西醫聯合治療SOM的報道中，已出現香菊膠囊、檸蒎腸溶軟膠囊等幾種中成藥輔助西醫治療并取得滿意效果[10-11]。復方雙花片是來源于我國民間醫藥寶庫并經現代工藝制成的中成藥，方中的金銀花、連翹、板藍根均具有清熱解毒的功效，幾味藥合用加強清熱解毒，而穿心蓮具有清肺解毒的功效。經藥理研究證實，復方雙花片中4味藥材的提取物具有較強的殺菌、抗病毒、消炎作用，體內外的抗菌效果均較為突出[12-13]。目前尚無關于復方雙花片聯合西藥治療SOM的報道，從本研究看，治療組的總有效率97.58%明顯高于對照組的85.00%(P<0.05)，這表明復方雙花片可有效增強療效，治療效果確切。

本研究結果顯示，2組治療后分泌物TNF-α、IL-6、IL-10水平明顯降低，且治療組明顯低于對照組(P<0.05)，但2組治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-10水平無明顯變化，組間比較均無統計學意義。這提示復方雙花片對SOM中耳積液中的TNF-α、IL-6、IL-10有明顯影響，但對血清中的炎癥因子卻影響不大，這可能是與中耳粘膜參與SOM患者的局部免疫反應有關。既往研究發現，SOM患者雖然Tregs比例異常增高，但外周血中的TNF-α、IL-6、IL-10卻與健康人無較大差異，三種因子僅在中耳積液中表達上調[14-15]，這體現出了免疫調節的復雜性。由表2也可看出，SOM患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10處于較低表達狀態，且不受治療明顯影響，符合上述結論。

綜上所述，復方雙花片聯合西藥治療SOM的療效顯著，可有效減少中耳積液中的TNF、IL-6、IL-10等炎癥因子。

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(編校：薛雪)

Effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum and secretions of inflammation factors in acute secretory otitis media

SHEN Hong-zhongΔ, WENG Bai-yue

(Department of ENT, Zhejiang Xinchang People’s Hospital, Shaoxing 312500, China)

ObjectiveTo investigate the effect of compound Shuanghua tablets combined with western medicine on serum secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of patients with secretory otitis media.MethodsA total of 200 cases(244 ears) with acute secretory otitis media in Zhejiang Xinchang People’s Hospital from August 2014 to June 2016 were randomly divided into two groups.The control group with 100 case (120ears) were only given conventional western medicine therapy,and the treatment group with 100 case (124ears) were given compound Shuanghua tablets on the basis of the control group.Peripheral venous blood and middle ear effusion of each patient was collected before and after treatment,and to detect the level of TNF-α,IL-6 and IL-10 by cytometric bead array,meanwhile the curative effect of the two groups were compared.ResultsThe curative effect of the treatment group( 97.58%) was higher than the control group(85.00%),the difference were statistically significant(P<0.05).There were no significant difference on serum TNF-α,IL-6 and IL-10 between the two groups before and after treatment.The secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 of the two groups after treatment were significantly reducing,and the treatment group were lower than the control group,the difference were statistically significant(P<0.05).ConclusionCompound Shuanghua tablets combined with western medicine in traetment SOM is effective distinctly,and can reduce secretions TNF-α,IL-6 and IL-10 effectly.

compound Shuanghua tablets; secretory otitis media; TNF-α;IL-6;IL-10

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.11.042

沈宏忠，通信作者，男，本科，主治醫師，研究方向：急性中耳炎的臨床治療，E-mail：lian0610@sina.com。

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