葛根素的大孔樹脂純化及抗氧化性研究

呂夢

摘 要：主要研究了大孔樹脂純化葛根素工藝及抑菌性質(zhì)。以葛根素吸附率為指標，通過正交試驗確定大孔樹脂純化葛根素最佳工藝條件，即上樣液濃度0.8 g·mL-1，吸附流速9 BV·h-1，乙醇濃度80%，洗脫流速4 BV·h-1。同時試驗結(jié)果表明，葛根素對羥自由基具有較強清除能力，因此，葛根素具有較好的抗氧化活性。

關(guān)鍵詞：葛根素；大孔樹脂；純化；抗氧化性

中圖分類號：TS202.3 文獻標識碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.08.004

Abstract： This study mainly discussed the purification of puerarin by macroporous resin adsorption and its antioxidant activity. Taking the adsorption rate of puerarin as indicator， the optimum condition of purification of puerarin by macroporous resin adsorption were also determined by orthogonal test， they were sample concentration for 0.8 g·mL-1， adsorption current velocity for 9 BV·h-1， ethanol concentration for 80%， desorption current velocity for 4 BV·h-1. And the experimental results showed that puerarin had strong scavenging ability to hydroxyl free radical， so puerarin had strong antioxidant activity.

Key words： puerarin； macroporous resin adsorption； purification； antioxidant activity

葛根是將野葛根部干燥加工得來，具有較高的藥用價值，通常作為中藥成分適用，味甘、辛、性平，有生津、壯陽、退熱、透疹等多種功能，目前已被我國收入到藥食資源目錄當中。葛根中富含的葛根素具有較高的保健功能和價值，是保健食品常用成分之一。葛根素有利于提高心肌功能、疏通血管、擴張冠脈、增強心肌收縮性、加快血液循環(huán)等，在治療冠心病、心絞痛、心肌梗塞、視網(wǎng)膜動脈靜脈阻塞、耳聾等疾病方面有不錯的效果[1-3]。

為提高葛根素利用價值和經(jīng)濟效益，解決葛根素生產(chǎn)成本過高的問題，本試驗采用大孔樹脂吸附法提取葛根素，這種方法操作簡單，成本較低，有助于進一步改進葛根素提純工藝，促進行業(yè)技術(shù)水平發(fā)展[4]。

1 材料和方法

1.1 原料與試劑

葛根：廣東省農(nóng)科院提供；AB-8大孔樹脂：廣東環(huán)凱生物科技公司；葛根素標準品：廣東環(huán)凱生物科技公司；乙醇、硫酸、氫氧化鈉、石油醚、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚等：實驗室提供。

1.2 試驗儀器與設(shè)備

HK-02型小型中藥粉碎機（湖南中誠制藥機械廠）；UV-1900紫外分光光度計（美析儀器）；電子天平（深圳立遠儀器）；TG16-WS臺式高速離心機（上海美伊設(shè)備公司）；RV 8 V旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國IKA）等。

1.3 試驗方法

1.3.1 大孔樹脂純化葛根素工藝流程 葛根素提取液→上柱→AB-8大孔樹脂→乙醇洗脫→收集→減壓濃縮→冷凍干燥→葛根素[5-6]。

1.3.2 葛根素的測定

吸附率=（C0-C1）/ C0×100%[7-8]

式中，C0為原液中葛根素濃度，mg·mL-1；C1為吸附液中葛根素濃度，mg·mL-1。

1.3.3 羥自由基清除能力的測定 采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法測定[9-12]。

2 結(jié)果與分析

2.1 大孔樹脂純化葛根素工藝優(yōu)化

2.1.1 不同乙醇濃度的純化效果 選取40%，50%，60%，70%，80%，90%等6個水平的乙醇濃度，設(shè)定其他各因素條件，在不同梯度乙醇濃度下，觀察葛根素純化效果。由圖1可以看出，乙醇濃度為70%時，葛根素純化效果較好。

2.1.2 不同吸附流速的純化效果 選取3，5，7，9，11，13 BV·h-1等6個水平的吸附流速，設(shè)定其他各因素條件，在不同梯度吸附流速下，觀察葛根素純化效果。由圖2可以看出，吸附流速為9 BV·h-1時，葛根素純化效果較好。

2.1.3 不同洗脫流速的純化效果 選取2，4，6，8，10，12 BV·h-1等6個水平的洗脫流速，設(shè)定其它各因素條件，在不同梯度洗脫流速下，觀察葛根素純化效果。由圖3可以看出，洗脫流速為6 BV·h-1時，葛根素純化效果較好。

2.1.4 不同上樣液濃度的純化效果 選取0.2，0.4，0.6，0.8，0.10，1.2 g·mL-1等6個水平的上樣液濃度，設(shè)定其他各因素條件，在不同梯度上樣液濃度下，觀察葛根素純化效果。由圖4可以看出，上樣液濃度為0.8 g·mL-1時，葛根素純化效果較好。

2.1.5 葛根素純化條件優(yōu)化試驗 由表1、表2可以看出，葛根素的大孔樹脂純化工藝的各因素主次順序為D > B >A>C，即洗脫流速>吸附流速>上樣液濃度>乙醇濃度。葛根素的大孔樹脂純化工藝條件最優(yōu)組合為A2B2C3D1，即上樣液濃度0.8 g·mL-1，吸附流速9 BV·mL-1，乙醇濃度80%，洗脫流速4 BV·h-1。