廈門市同安區(qū)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查

李謂娟楊　濤

（1.廈門市同安區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所　福建廈門　361100；2.廈門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心　福建廈門　361009）

廈門市同安區(qū)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查

李謂娟1楊濤2

（1.廈門市同安區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所福建廈門361100；2.廈門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心福建廈門361009）

豬偽狂犬病是《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》中優(yōu)先防治的16種動(dòng)物疫病之一，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病都要達(dá)到規(guī)劃設(shè)定的考核標(biāo)準(zhǔn)。廈門市同安區(qū)為了配合做好豬場凈化工作，掌握全區(qū)豬群豬偽狂犬病的感染狀況，對其進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，估計(jì)轄區(qū)內(nèi)豬群豬偽狂犬病的血清學(xué)流行率。本研究使用豬偽狂犬病病毒gE-ELISA試劑盒，共檢測991份血清樣品，并實(shí)地調(diào)查20家豬場，了解豬場飼養(yǎng)管理和免疫情況。結(jié)果顯示，同安區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)場流行率為65.0%，個(gè)體真實(shí)流行率為47.5%（44.5%～50.4%）。

豬偽狂犬病血清學(xué)流行率

豬偽狂犬病（PR）是由偽狂犬病病毒（PRV）引起的豬的一種急性傳染病，不同階段豬表現(xiàn)不同癥狀，通常引起妊娠母豬流產(chǎn)，產(chǎn)木乃伊胎、死胎或弱仔，初生仔豬出現(xiàn)腹瀉和神經(jīng)癥狀，感染率和病死率可高達(dá)100%，母豬出現(xiàn)返情，育肥豬多呈隱性感染，可出現(xiàn)發(fā)熱和輕微的呼吸道癥狀，耐過后生長發(fā)育遲緩，飼料報(bào)酬降低，并可長期帶毒、排毒，成為頑固傳染源［1］。從2011年首先在天津等地區(qū)開始發(fā)現(xiàn)生長育肥豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀而死亡的新型豬偽狂犬病現(xiàn)象，到目前為止，我國主要養(yǎng)豬區(qū)域基本都有新型豬偽狂犬病發(fā)生。新型豬偽狂犬病感染主要表現(xiàn)在很多偽狂犬病陰性豬場PRV gE抗體檢測突然轉(zhuǎn)陽，新型豬PRV流行株比經(jīng)典毒株對豬的致病性更強(qiáng)，多數(shù)豬場的生長肥育豬先發(fā)病，之后出現(xiàn)母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、弱仔，哺乳仔豬、保育豬、育肥豬等均可能出現(xiàn)腹瀉、呼吸道癥狀、神經(jīng)癥狀等，死亡率很高，2014年開始福建許多豬場也出現(xiàn)該現(xiàn)象［2］。

《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020）》將豬偽狂犬病列為優(yōu)先防治的動(dòng)物疫病病種之一，并將豬偽狂犬病作為種畜禽凈化的重點(diǎn)疫病，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病都要達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)，中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心于2014年啟動(dòng)了規(guī)模化養(yǎng)殖場豬偽狂犬病凈化示范場和凈化創(chuàng)建場的評估。廈門市同安區(qū)近兩年來一直執(zhí)行生豬退養(yǎng)政策，只允許符合環(huán)保條件的規(guī)模豬場在限養(yǎng)區(qū)養(yǎng)殖，目前保留豬場20個(gè)，轄區(qū)內(nèi)有1家原種豬場正在開展豬偽狂犬病凈化。為了有效做好豬偽狂犬病的凈化工作，必須掌握轄區(qū)內(nèi)豬群豬偽狂犬病的感染狀況，從而為進(jìn)一步的控制和凈化措施提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，在廈門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心的指導(dǎo)下，同安區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所于2015年10月至11月在同安區(qū)開展了豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查，估計(jì)其場流行率和個(gè)體流行率。

1　材料與方法

1.1目標(biāo)群同安區(qū)目前保留豬場20個(gè)，將所有豬場作為目標(biāo)群，于2015年10月至11月采用橫斷面研究方法對20家豬場開展抽樣檢測，同時(shí)進(jìn)行現(xiàn)場問卷調(diào)查，估計(jì)其豬偽狂犬病血清學(xué)流行率，并了解豬場飼養(yǎng)管理水平和豬偽狂犬病免疫等情況。

1.2抽樣策略和樣本量豬場內(nèi)抽樣數(shù)量用估計(jì)流行率的方法進(jìn)行計(jì)算［3］，按95%置信水平（CL）和15%可接受絕對誤差（d），設(shè)預(yù)期流行率為30%（p），根據(jù)計(jì)算公式：N=（1.96）2p（1-p）/d2，確定需要抽取的樣本量（N）為36，即每場隨機(jī)抽取36頭豬。現(xiàn)場抽樣時(shí)采取系統(tǒng)隨機(jī)抽樣方法，按一定的欄位間隔進(jìn)行抽樣，抽取的豬群主要為育肥豬、生產(chǎn)母豬、保育豬和哺乳仔豬。

1.3血樣收集和檢測從豬場采集的全血樣品置于一次性采血器中，送至廈門市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行血清分離，實(shí)施檢測前置于-20℃冷凍保存。血清樣品用ID.vet公司豬偽狂犬病病毒gE-ELISA試劑盒檢測PRV gE抗體。

1.4數(shù)據(jù)分析流行率估計(jì)：（1）群體水平流行率為檢測到的陽性場數(shù)量占所有檢測場數(shù)的比值，其中陽性場是指任何一個(gè)樣品檢測為gE抗體陽性，其所在豬場即定義為豬偽狂犬病陽性場。（2）個(gè)體水平表觀流行率為檢測到的陽性豬只數(shù)量占抽樣研究群數(shù)量的比值，必須通過直接標(biāo)化法計(jì)算出全區(qū)的個(gè)體表觀流行率（AP'），標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)算公式為：AP'=Σ （IhTh），其中Ih是不同豬場的陽性率，Th是不同豬群在總?cè)褐械姆植急壤傮w比例的95%置信區(qū)間（CI）根據(jù)公式：CI=AP'±Sp計(jì)算，Sp=［Σ（1-fh）/（nh-1）*Wh2*ph*（1-ph）］^0.5，式中，Sp是總體抽樣誤差，ph是第h層樣本中陽性率，Wh是第h層權(quán)重，nh是第h層樣本量，fh是第h層抽樣比例［4］；然后結(jié)合試劑敏感性（Se）和特異性（Sp）計(jì)算個(gè)體真實(shí)流行率（TP），計(jì)算公式：TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）。陽性率的95% CI根據(jù)公式：CI=p±z計(jì)算，其中p是陽性率，z為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布中概率為0.05所對應(yīng)的值，n為抽樣數(shù)量。

2　結(jié)果與分析

2.1豬場gE抗體檢測結(jié)果共采集了20個(gè)豬場的血清樣品991份，檢出gE抗體陽性樣品546份，其中豬偽狂犬病陽性場有13個(gè)，陽性場中g(shù)E抗體陽性率最低為9.5%，另有5個(gè)豬場gE抗體陽性率高達(dá)100%，具體檢測結(jié)果見表1。

2.2流行率估計(jì)調(diào)查結(jié)果顯示，同安區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)場流行率為65.0%，個(gè)體表觀流行率通過抽樣權(quán)重分析后為46.5%（見表1），根據(jù)ELISA診斷試劑盒的試驗(yàn)敏感性（Se=98%）［5］和特異性（Sp= 99.9%），得到同安區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)個(gè)體真實(shí)流行率為47.5%（44.5%～50.4%）。

表1　豬場gE抗體檢測結(jié)果

2.3不同豬群gE抗體陽性率比較從不同豬群gE抗體陽性率分布情況來看，育肥豬的gE抗體陽性率最低，其次為生產(chǎn)母豬和哺乳仔豬，保育豬的gE抗體陽性率最高，經(jīng)x2檢驗(yàn)，P=0.000，說明不同豬群之間gE抗體陽性率存在顯著差異，具體數(shù)據(jù)見表2。

表2　不同群豬gE抗體陽性率分布情況

2.4調(diào)查表統(tǒng)計(jì)結(jié)果調(diào)查問卷共設(shè)計(jì)20個(gè)問答題，涉及豬場飼養(yǎng)管理、免疫情況、豬偽狂犬病發(fā)病情況等內(nèi)容，并調(diào)查了豬場使用的豬偽狂犬疫苗生產(chǎn)廠家。對調(diào)查問卷進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)，20個(gè)豬場均對病死豬實(shí)行了無害化處理，都使用豬偽狂犬病病毒gE基因缺失活疫苗，除個(gè)別一兩家外，生產(chǎn)管理和生物安全水平都比較好，豬偽狂犬病疫苗分別來自6個(gè)廠家，其中4個(gè)為國產(chǎn)疫苗，2個(gè)為進(jìn)口疫苗，調(diào)查內(nèi)容見表3。

表3　20家豬場問卷調(diào)查結(jié)果

3　討　論

3.1同安區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)流行率較高調(diào)查結(jié)果顯示，同安區(qū)豬偽狂犬病血清學(xué)流行率較高，20個(gè)豬場中13個(gè)為豬偽狂犬病陽性場。同安區(qū)生豬養(yǎng)殖高峰期在2013年，未執(zhí)行生豬退養(yǎng)政策前，規(guī)模化養(yǎng)殖與小型散養(yǎng)共存，養(yǎng)殖場（戶）技術(shù)水平、管理水平、養(yǎng)殖環(huán)境參差不齊，疫病防控工作難度較大，自福建省豬場在2014年出現(xiàn)新型豬PRV感染現(xiàn)象后，同安區(qū)豬場也未能幸免，這可能是偽狂犬病流行率居高不下的主要原因。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，7個(gè)豬偽狂犬病陰性場有6個(gè)建成與投入使用的時(shí)間都在2009-2011年，屬于比較新的場，而且場址均位于半山區(qū)，周圍3 km內(nèi)無其他養(yǎng)殖場，且有天然山體屏障，由于便于疫病防控，降低了豬偽狂犬病傳入豬場的風(fēng)險(xiǎn)。

3.2加強(qiáng)免疫是目前防控豬偽狂犬病的主要手段目前不同階段豬群PRV gE抗體陽性率均較高，現(xiàn)階段開展豬場豬偽狂犬病凈化難度非常大。林文耀等對2011-2015年規(guī)模化豬場偽狂犬病野毒感染血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查的結(jié)果表明，豬偽狂犬病流行有持續(xù)上升的趨勢，仍是未來一段時(shí)間養(yǎng)豬業(yè)重要傳染病之一［6］。王繼春等用豬偽狂犬病活疫苗（Barta K61株）對仔豬免疫1次，1周后用豬偽狂犬病病毒變異株（AH02LA）攻毒，結(jié)果顯示可以抵御偽狂犬病病毒變異株攻擊［7］，因此，在現(xiàn)階段，加強(qiáng)偽狂犬病疫苗免疫，選擇質(zhì)量穩(wěn)定的疫苗，制定合理免疫程序，增加免疫次數(shù)，特別是加強(qiáng)仔豬和生豬肥育豬的免疫，是防控偽狂犬病的有效手段。

3.3加強(qiáng)監(jiān)測，開展種豬群凈化問卷調(diào)查結(jié)果顯示，50%豬場有外購種豬經(jīng)歷，90%豬場認(rèn)為購入種豬時(shí)經(jīng)過檢測，經(jīng)深入調(diào)查發(fā)現(xiàn)，檢測的項(xiàng)目主要為國家強(qiáng)制免疫的疫病抗體，豬場對引進(jìn)種豬雖然有隔離，但并未能執(zhí)行嚴(yán)格的隔離檢測措施，這是豬場疫病防控的重大隱患。因此，豬場必須加強(qiáng)引種管理，要從偽狂犬病陰性豬場引進(jìn)種豬，建設(shè)獨(dú)立的引種隔離舍，隔離后檢測合格方可混養(yǎng)。針對母豬群PRV gE抗體陽性的豬場，可根據(jù)陽性率高低制定相應(yīng)的凈化措施，逐步監(jiān)測淘汰陽性種豬，同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，通過養(yǎng)殖設(shè)施改造、對不同階段豬群進(jìn)行隔離飼養(yǎng)、嚴(yán)格執(zhí)行生物安全措施和滅鼠等綜合措施防控偽狂犬病。

［1］斯特勞B E，阿萊爾S D，蒙加林W L，等.豬病學(xué)［M］.8版.趙德明，張中秋，沈建忠，等譯.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000：239-253.

［2］白挨泉.新型豬偽狂犬病流行情況及凈化措施［J］.獸醫(yī)導(dǎo)刊，2016（2）：22-24.

［3］沈朝建，王幼明.獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測抽樣技術(shù)手冊［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2013：43.

［4］孫向東，劉擁軍，王幼明.獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測：抽樣技術(shù)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011：85-86.

［5］Morenkov O S，F(xiàn)odor N，F(xiàn)odor I.Indirect ELISAs based on recombinant and affinity-purified glycoprotein E of Aujeszky's disease virus to differentiate between vaccinated and infected animals［J］.Acta Vet Hungarica，1999，47（1）：137-150.

［6］林文耀，曾容愚，李聰，等.2011-2015年規(guī)模化豬場偽狂犬病野毒感染血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查［J］.養(yǎng)豬，2016（2）：113-116.

［7］王繼春，曾容愚，Daniel T，等.豬偽狂犬病活疫苗 （Bartha K61株）對變異株的保護(hù)效力［J］.畜牧與獸醫(yī)，2015，47（12）：1-4.

Epidemiological investigation of pseudorabies in Tongan，Xiamen

Li Weijuan1Yang Tao2
（1.Tongan Animal Health Inspection Institute，Xiamen 361100；2.Xiamen Center for Animal Disease Control and Prevention，Xiamen 361009）

According to the Chinese National Medium and Long-term Plan for Animal Epidemic Prevention and Control，all swine breeding farms must to achieve criteria of pseudorabies（PR）elimination by 2020.In order to understand the infection status of pseudorabies in Tongan，an epidemiological investigation was conducted to estimate the prevalence of pseudorabies.PRV gE-ELISA kit was used to test gE antibody，a total of 991 serum samples were tested and 20 pig farms were investigated to know management and immune state.The result showed that the herd prevalence of pseudorabies was 65.0%and the individual true prevalence was 47.5% （44.5%～50.4%）.

Pseudorabies Serologic Prevalence

A

1003-4331（2016）04-0015-04