適體熒光分析法檢測養(yǎng)殖廢水中四環(huán)素類抗生素

趙秋伶,張尤華,于曉艷

(遼寧工程技術(shù)大學(xué)　礦業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧　葫蘆島　125105)

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適體熒光分析法檢測養(yǎng)殖廢水中四環(huán)素類抗生素

趙秋伶*,張尤華,于曉艷

(遼寧工程技術(shù)大學(xué)礦業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧葫蘆島125105)

建立了核酸適體識別-熒光探針技術(shù)檢測養(yǎng)殖廢水中土霉素、四環(huán)素、金霉素及強(qiáng)力霉素4種四環(huán)素類抗生素(TCs)總殘留量的新方法。兩段DNA對TCs共同識別后折疊成穩(wěn)定的 “發(fā)卡型” 雙鏈結(jié)構(gòu)，核酸染料4′-6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)能插入“發(fā)卡”部位產(chǎn)生熒光信號發(fā)射，據(jù)此可實(shí)現(xiàn)對TCs的定量檢測。在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下，以土霉素為目標(biāo)分子建立工作曲線，在10～50 nmol/L范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與對應(yīng)濃度呈良好線性關(guān)系，土霉素的檢出限為2.3 nmol/L。用四環(huán)素、土霉素、金霉素和強(qiáng)力霉素分別進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，平均回收率為88.5%～102.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=5)為3.2%～6.7%。5個(gè)養(yǎng)殖場水樣中均有TCs檢出，檢出量在7.6～42.7 nmol/L之間。該方法簡單、靈敏、快速，可滿足養(yǎng)殖場廢水中TCs總殘留量的測定要求。

核酸適體；熒光分析法；四環(huán)素類抗生素；快速檢測；廢水

四環(huán)素類抗生素(TCs)是由放線菌產(chǎn)生的一類廣譜抗菌素，其結(jié)構(gòu)中含有并四苯基本骨架，在酸性和堿性條件下均不穩(wěn)定[1]。TCs主要品種有土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素等。TCs被廣泛用作獸藥，同時(shí)又作為一種生長促進(jìn)劑被添加到飼料中用于畜牧業(yè)、漁業(yè)等[2]。TCs在畜禽體內(nèi)難以被腸胃吸收，約 30%～90% 以母體化合物的形態(tài)排出，殘留于糞便、尿液及養(yǎng)殖水體中，并進(jìn)入土壤、地表水及地下水等環(huán)境受體中，給人類健康造成潛在危害[3]。……