用氣相色譜法分析測定蘆筍中多種有機氯和擬除蟲菊酯殘留量

肖利龍，花　錦，劉曉琳

（1.太原學(xué)院，山西太原　030032；2.山西出入境檢驗檢疫局，山西太原　030024）

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用氣相色譜法分析測定蘆筍中多種有機氯和擬除蟲菊酯殘留量

肖利龍1，花錦2，劉曉琳2

（1.太原學(xué)院，山西太原030032；2.山西出入境檢驗檢疫局，山西太原030024）

建立了蘆筍及其制品中9種有機氯類與5種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的定性和定量分析方法。蘆筍樣品用乙酸乙酯-環(huán)己烷混合溶液（1+1，V/V）提取，凝膠色譜凈化，以弗羅里硅土小柱作為分離柱，經(jīng)程序升溫分離各組分，以峰面積外標(biāo)法定量，能有效分離9種有機氯和5種擬除蟲菊酯農(nóng)藥，消除基質(zhì)干擾效果好。該法在0.01～0.10 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.995，回收率為78.3%～103.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.1%～7.3%。有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥檢出限分別為0.002 mg/kg和0.005 mg/kg。該方法靈敏度高、重現(xiàn)性好，適用于國內(nèi)外對農(nóng)藥殘留限量的檢測要求，為蘆筍的出口提供技術(shù)保障。

氣相色譜；有機氯；擬除蟲菊酯；蘆筍

0　引言

蘆筍又稱石刁柏，是一種富含蛋白質(zhì)和維生素的蔬菜。隨著社會對食品安全問題的日益關(guān)注，最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)要求越來越嚴(yán)，而我國蘆筍產(chǎn)品出口量很大，農(nóng)藥殘留已成為蘆筍出口一個很重要的限制指標(biāo)［1］。因此，針對蘆筍建立一種快速可靠、高靈敏度和安全實用的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)非常必要。

當(dāng)前，對蘆筍中農(nóng)藥殘留的研究，大多集中于有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥［2-3］。以往雖對果蔬中有機氯、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測較多，但果蔬種類繁多，多數(shù)蔬菜基質(zhì)復(fù)雜［4］，因此有必要對蘆筍進(jìn)行特定的檢測。晁文等人［5］對蘆筍有機磷、有機氯農(nóng)藥殘留進(jìn)行了分析，只涉及4種六六六有機氯農(nóng)藥，同時有機氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為高效殺蟲劑，在蔬菜、瓜果中廣泛使用。因此，建立蘆筍及其制品中有機氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，具有十分重要的意義。

1　試驗部分

1.1試劑與溶液

乙酸乙酯，分析純、色譜純；乙腈，分析純；環(huán)己烷，分析純；正己烷，色譜純；乙酸乙酯-環(huán)己烷混合溶劑（1+1，V/V）；無水硫酸鈉；弗羅里硅土小柱，0.5 g/3 cc；11種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，純度98.4%～99%，均購于德國Dr公司。

1.2試驗儀器

氣相色譜儀，GC 2010型附電子捕獲檢測器（ECD），超聲波清洗器，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，Accuprep MPS型全自動凝膠色譜儀，半自動固相萃取儀，氮吹儀，TALBOYS型渦流混合器。

2　試驗方法

2.1試樣制備

從原始樣品中取部分代表性樣品，用絞肉機粉碎，混勻后按四分法縮分出不少于100 g，試樣裝入潔凈容器內(nèi)，密封，并標(biāo)明標(biāo)記。將試樣于-18℃以下冷凍貯藏。

2.2提取

稱取10.00 g均勻樣品于50 mL離心管中，加10 mL蒸餾水，20 mL乙酸乙酯-環(huán)己烷混合溶液（1+1，V/V），超聲提取15 min，離心，取上層清液過無水硫酸鈉于150 mL梨型瓶中，再向殘渣中添加20 mL乙酸乙酯-環(huán)己烷（1+1，V/V），超聲提取15 min，離心，合并上層清液于150 mL梨型瓶中，在45℃水浴中減壓旋轉(zhuǎn)濃縮至近干，準(zhǔn)確加入10.0 mL乙酸乙酯-環(huán)己烷（3∶8）溶解殘渣，并過0.45 μm濾膜，待凝膠色譜凈化。

2.3凝膠色譜凈化

凝膠色譜凈化條件為凝膠凈化柱，300 mm× 20 mm（i.d.），Bio Beads S-X3型；流動相，環(huán)己烷-乙酸乙酯（1+1）；流速4.7 mL/min；樣品定量環(huán)5 mL；收集時間7.5～12.5 min。

將10 mL待凈化液按上述條件凈化，在線濃縮系統(tǒng)濃縮后用正己烷（色譜純）定容至1.0 mL，供固相萃取凈化。

2.4固相萃取凈化

取0.5 mL經(jīng)GPC凈化后的溶液上柱，棄去，用5 mL配比為9∶2的正己烷和乙酸乙酯混合溶液洗脫，收集洗脫液于試管中，于40℃下氮吹至近干，用0.5 mL正己烷定容，渦流混合均勻。

2.5儀器參數(shù)與測定條件

2.5.1色譜測定條件

色譜柱：BPX608型，柱長25 m，柱內(nèi)徑0.32 mm，膜厚0.4 μm，毛細(xì)管柱；柱溫：50℃保持1 min，以10℃/min速度升至200℃，以5℃/min速度升至290℃（10 min）；進(jìn)樣口溫度：260℃，檢測器溫度：310℃；N2為載氣，載氣流量1.0 mL/min。

2.5.2儀器測定

將標(biāo)準(zhǔn)使用液或試樣液進(jìn)樣1 μL，以保留時間定性；測量峰面積，與標(biāo)準(zhǔn)比較進(jìn)行定量。

3　結(jié)果與討論

3.1色譜柱的選擇

在14種有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的分析中，分別選用HP-5毛細(xì)管柱和弗羅里硅土小柱同等規(guī)格的色譜柱。在其他分離條件一致的情況下，HP-5毛細(xì)管柱對氯氰菊酯、β-666的響應(yīng)值較低；而使用弗羅里硅土小柱，雜峰較少、響應(yīng)值高，取得了較好的分離效果。

3.2標(biāo)準(zhǔn)物的線性方程和相關(guān)系數(shù)

將有機氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)儲備液用正己烷稀釋，制備0.01，0.02，0.05，0.08，0.10 mg/kg 5個不同水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的色譜條件下，根據(jù)定量目標(biāo)離子的峰面積與質(zhì)量濃度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

有機氯和擬除蟲菊酯加標(biāo)試驗氣相色譜見圖1（圖中色譜峰序號所標(biāo)注的農(nóng)藥種類與表1中的序號相對應(yīng)）。

圖1　有機氯和擬除蟲菊酯加標(biāo)試驗氣相色譜

有機氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)物保留時間、線性方程和相關(guān)系數(shù)見表1。

由表1可知，有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥在0.01～0.10 mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.995。

3.3回收率與精密度

在空白蘆筍樣品中添加0.002，0.010，0.020，0.050 mg/kg等4個不同水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率試驗。每個添加質(zhì)量濃度平行重復(fù)6次，計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative standard deviation，RSD）。

有機氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)物檢出限、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和回收率見表2。

表1　有機氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)物保留時間、線性方程和相關(guān)系數(shù)

表2　有機氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)物檢出限、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和回收率

由表2可知，14種農(nóng)藥加標(biāo)回收率為78.3%～103.5%，RSD為4.1%～7.3%。以3倍信躁比確定方法檢出限：有機氯類農(nóng)藥檢出限均為0.002 mg/kg，溴氰菊酯、氯氰菊酯類均為0.005 mg/kg。回收率、精密度和檢出限符合國外農(nóng)藥殘留限量檢測要求［6］。

3.4樣品的測定

應(yīng)用本試驗建立的檢測方法，對產(chǎn)地為山西太原清徐縣和山西省永濟市的各20批蘆筍和10批蘆筍罐頭進(jìn)行檢測，其中清徐縣1批蘆筍中檢出了β-666農(nóng)藥超標(biāo)，永濟市2批蘆筍中分別檢出溴氰菊酯和六氯苯農(nóng)藥超標(biāo)；蘆筍罐頭中均沒有檢出。

4　結(jié)論

本試驗建立了測定蘆筍中多種有機氯和擬除蟲菊酯殘留量氣相色譜檢測的分析方法。該方法靈敏度高、重現(xiàn)性好，回收率、精密度和檢出限均滿足蘆筍中同時檢測有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留定性定量的檢測要求，為我國蘆筍出口的農(nóng)殘檢測提供了技術(shù)保障。

［1］宋歡，車蘭蘭，林勤保，等.蘆筍中農(nóng)藥最大殘留限量及檢測方法研究進(jìn)展 ［J］.食品工業(yè)科技，2012（12）：298-302.

［2］趙亞華，何學(xué)芳，李勇，等.食品中40種有機磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥多殘留快速檢測技術(shù)研究 ［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，17（11）：1 938-1 940.

［3］吳曼，陳九星，付啟明，等.氣相色譜法測定蘆筍及其土壤中的苯醚甲環(huán)唑殘留量 ［J］.精細(xì)化工中間體，2009，39（6）：71-76.

［4］葉宇飛，許秀琴，王立君，等.氣相色譜法測定水果蔬菜中農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)研究 ［J］.安徽農(nóng)學(xué)通報，2015，21（5）：114-117.

［5］晁文，趙俊芳，呂銀德，等.蔬菜中有機磷、有機氯農(nóng)藥殘留量分析 ［J］.包裝與食品機械，2012，30（2）：30-33.

［6］中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.GB 2763—2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留量 ［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2014.◇

Determination of Organochlorines and Pyrethroid Pesticides in Asparagus by Gas Chromatography

XIAO Lilong1，HUA Jin2，LIU Xiaolin2
（1.Taiyuan University，Taiyuan，Shanxi 030032，China；2.Shanxi Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Taiyuan，Shanxi 030024，China）

Gas chromatography method of 9 kinds of organochlorines pesticides and 5 kinds of pyrethroid pesticides in asparagus and asparagus products are constituted.The samples of asparagus are extracted with ethyl acetate-cyclohexane solution（1+1，V/V） and pontificated by gel chromatography.Using Florida silica column chromatography as separate pole can effectively separate of 9 kinds organochlorine pesticides and 5 kinds of pyrethroid pesticides and eliminate interference. The results show that the calibration curves are linear（R2＞0.995） in the range of 0.01～0.10 mg/L for all the pesticides.The average recoveries are between 78.3%and 103.5%，and relative standard deviations are among 4.1%～7.3%.The limits of detection for organochlorines and pyrethroid pesticides are 0.002 mg/kg and 0.005 mg/kg.The advantages of the method are sensitive and stable.It applies to domestic and international limits for pesticide residue testing requirements and provides technical support for the export of asparagus.

gas chromatography；organochlorine；pyrethroid；asparagus

O657.7

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2016.07.041

1671-9646（2016）07b-0042-03

2016-05-30

肖利龍（1986— ），男，碩士，助教，研究方向為食品質(zhì)檢。