顧棟樺,付琳琳,平金良
CAV1腳手架樣結構域多肽抑制HEp2細胞生長的實驗研究
顧棟樺,付琳琳,平金良
目的研究CAV1腳手架樣結構域(CSD)多肽對喉鱗癌細胞株HEp2細胞生長的影響及其機制。方法CSD多肽和亂序多肽由人工合成得到,并在N'末端用生物素標記,用免疫細胞化學法檢測CSD多肽在HEp2細胞中的內化情況,細胞生長能力用MTT法檢測;流式細胞儀檢測HEp2細胞的細胞周期及細胞凋亡;免疫印跡法檢測HEp2細胞中Erk1/2蛋白的表達及磷酸化程度。結果免疫細胞化學檢測顯示CSD多肽能夠較好的進入HEp2細胞內;用CSD多肽處理細胞能夠明顯抑制腫瘤細胞的生長,使更多的細胞處于G0/G1細胞靜止期,并能夠增加HEp2細胞的凋亡率;CSD多肽不影響HEp2細胞中Erk1/2蛋白的表達,但能明顯減少Erk1/2蛋白的磷酸化水平。結論CSD多肽能夠抑制HEp2細胞的生長,并且促進其細胞凋亡;Erk1/2蛋白的磷酸化水平下降可能是其重要的分子機制。
Caveilin-1;細胞生長;多肽;鱗狀細胞癌
Caveolin-1(CAV1)是一種細胞膜蛋白,是構成細胞膜上一種小凹結構的關鍵成分。目前研究發現CAV1在細胞膜上的信號轉導蛋白活性調節中發揮重要作用,并參與調控細胞的生物學行為。CAV1蛋白具有一個腳手架樣結構域(CSD),依賴這個結構可以和許多信號轉導相關蛋白結合,抑制蛋白的酪氨酸激酶活性[1]。本研究用體外細胞實驗來研究人工合成的CSD多肽對喉鱗癌細胞株 HEp2細胞生長的影響,并探討CSD多肽做為抗腫瘤藥物的可行性。現報道如下。
1.1材料與試劑CSD多肽序列由上……