采用線性質控品評價Coulter LH780血液分析儀的線性*

張 麗管曉媛段 兵黃一玲*田 蕾李一石

采用線性質控品評價Coulter LH780血液分析儀的線性*

張 麗①管曉媛①段 兵①黃一玲①*田 蕾①李一石①

目的:對Coulter LH 780全自動血液分析儀做線性評價.方法:采用原裝配套試劑、校準品和室內質控品,以原裝線性質控品為樣本評價白細胞計數(WBC)、紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白濃度(Hgb)以及血小板濃度(Plt)4項參數的線性范圍.結果:4項參數的檢測結果均呈良好線性關系,WBC、RBC、Hgb及Plt的線性范圍分別為(0.03～363.5)X109/L、(0.00～7.92)X1012/ L、0.3～236.0 g/L 以及(0.3～2511.0)X109/L.結論:LH 780血液分析儀的線性范圍寬泛,能滿足臨床實驗室的檢測要求.

血液分析儀;線性;白細胞;紅細胞;血紅蛋白;血小板

張麗,女,(1969- ),本科學歷,副主任技師.中國醫學科學院北京協和醫學院阜外醫院衛生部心血管藥物臨床研究重點實驗室,從事臨床檢驗工作.

[First-author's address]Key Laboratory of Clinical Trial Research in Cardiovascular Drugs, Ministry of Health, State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital, National

Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100037, China.

美國臨床實驗室修正案(clinical laboratory improvement amendment 88,CLIA'88)規定醫學實驗室檢驗儀器性能評估的最低要求中包括可報告范圍的評估[1];中國合格評定國家認可委員會在其文件"醫學實驗室質量和能力認可準則"的5.3.2.1條款中也指出:實驗室應在設備安裝和使用前驗證其能夠達到必要的性能,并符合相關檢驗的要求[2].對于血液分析儀而言,可報告范圍是指樣本未經任何預處理,即可由檢測方法直接測得的可靠結果范圍.可報告范圍的高值、低值應是檢驗方法所能達到的線性范圍的上限、下限,所以一般可報告范圍的評價是通過線性評價來進行.線性是臨床檢驗儀器測定方法的一個重要特性,對檢測方法做評價時,線性評價是一個重要的評價指標[3-4].參照美國臨床實驗室標準化委員會(national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)指南EP6-A[5]和我國衛生行業標準WS/T 408-2012[6]的要求,本研究擬對新儀器LH 780型血液分析儀進行白細胞計數(WBC)、紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白濃度(Hgb)以及血小板濃度(Plt)的4項測定,并通過其參數對該儀器進行線性評價.

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

(1)LH780型全自動血液分析儀(美國貝克曼庫爾特公司,儀器序列號AU43162)及其原裝配套試劑;校準品(S-CAL,LOT:4768);室內質控品(5C cell control,LOT: 886500,875800,865000).

(2)線性質控品(COULTER LIN-C Linearity Control,LOT:1754074k)共11份樣本,濃度水平自Level 0到Level 9逐漸遞增,Level 10為清洗液.WBC和Plt最高濃度可到Level 9,RBC和Hgb的最高濃度到Level 6.

1.2 儀器校準

(1)按照校準程序,先進行環境溫度、濕度及儀器輸入電壓等檢測.儀器要求環境溫度為15.5～32.0℃,濕度≤90%,輸入儀器的電壓為210～250 V.校準當日的室溫為23℃,濕度為48%,儀器輸入電壓為220 V,上述條件均滿足儀器的運行要求.

(2)啟動血液分析儀,做開機后的本底檢測.本底檢測顯示各參數本底結果均符合儀器設定要求,無異常報警提示.

(3)使用校準品校準儀器,儀器可自動計算檢測數據.校準結果顯示,各參數與靶值偏差在儀器允許范圍內,儀器無異常報警提示,無需對舊校準系數做修正,維持舊校準系數不變.血液檢測4項參數的校準結果見表1.

表1 血液檢測4項參數的校準結果

1.3 測定方法

(1)室內質控品的檢測.室內質控品包括低值、中值及高值3個水平,每個水平各1份樣本.每份樣本均檢測WBC、RBC、Hgb及Plt 4項參數,全部檢測結果都達到室內質控品的預期值要求,表明儀器檢測狀態正常,可進行下一步的測試.

(2)以線性質控品為樣本進行線性檢測.采用說明書中的8X8X8方式混勻樣本,即垂直放置樣本試管于兩手掌心,前、后搓動試管各8次,再上、下顛倒混勻8次,如此反復操作直至試管內含物均勻懸浮,然后將全部樣本按Level 0～10的順序以自動進樣模式檢測,每個濃度水平重復檢測6次.

1.4 統計學方法

使用EXCEL軟件進行直線相關分析,去除各參數每個濃度水平第1次的測定結果(充當灌注),以后5次檢測結果的平均值為實測值以及分別以線性質控品說明書中各參數、各水平預期結果的上限、下限的平均值為理論值,要求線性回歸方程的斜率在1±0.05范圍內,相關系數r2≥0.95[7].

2 結果

2.1 線性質控品檢測結果

經檢測,WBC、RBC、Hgb及Plt的4項參數每個水平樣本6次檢測結果非常接近,表明該儀器批內精密度良好;各項參數的檢測結果從Level 0～10逐步遞增,表現出良好的線性關系.血液中的4項參數及各水平樣本6次檢測結果見表2～5.

2.2 質控品檢測結果的線性統計

以橫坐標為理論值,以縱坐標為實測值做線性統計圖.經統計分析,一定濃度范圍內各參數線性回歸方程的斜率均在1±0.05范圍內,相關系數r2≥0.95,滿足線性回歸分析要求.4項參數的線性范圍分別為:①WBC:(0.03～363.5)X109/L;②RBC: (0.00～7.92)X1012/L;③Hgb:0.3～236.0 g/L;④Plt:(0.3～2511.0)X109/L.統計結果表明:各項參數檢測結果線性范圍寬泛,基本涵蓋了臨床樣本濃度范圍,能滿足臨床樣本檢測需求.4項參數檢測結果的線性統計如圖1～4所示,線性回歸方程也顯示在圖中.

表2 WBC線性檢測結果(109/L)

表3 RBC線性檢測結果(1012/L)

表4 Hgb線性檢測結果(g/L)

表5 Plt線性檢測結果(109/L)

3 討論

血液分析儀是血常規檢測最常用分析儀,因其精密度較高、分析快速及準確等特點,已被廣泛應用于臨床實驗室[8-11].LH 780型血液分析儀采用電導、射頻及激光等技術對血細胞進行分析,可直接檢測得到WBC、RBC、Hgb及Plt[12-14].由于血液中的4項參數是臨床上最為常用的診斷指標,故本研究通過測定這4項參數的線性范圍來評價新儀器的線性,以證明該儀器能否符合臨床要求.

線性評價中,最理想的樣本是來自經過稀釋制備而成的患者新鮮全血樣本,且檢測項目的濃度應該接近預期測定上限[15].但是最理想樣本在短時間內較難獲取,并且患者血樣本可能會存在溶血、脂血、黃疸或某些特定藥物成分而影響檢測結果[16-17].此外.倍比稀釋過程也會引入檢測誤差[18-19].原裝配套的線性質控品主要由懸浮于等滲培養基中的經處理的、穩定的人類紅細胞組成,不含對測定方法有明確干擾作用的物質,與臨床全血樣本相似,適用于血液分析儀的線性評價.本研究中,LH 780型血液分析儀4項參數的檢測結果均表現出良好的,且線性范圍寬泛,基本涵蓋了臨床樣本濃度范圍,表明該儀器線性良好,能滿足實驗室中臨床樣本檢測的需要.

4 結語

圖1 WBC線性統計圖

圖2 RBC線性統計圖

圖3 Hgb線性統計圖

圖4 Plt線性統計圖

根據臨床實驗室質量管理的要求,在醫學檢驗儀器應用于臨床前,必須對其性能做必要的評價或驗證,以保證檢測結果的可溯源性.在本儀器的評價過程中,操作人員不但熟悉儀器的校準、使用方法,還具有良好的檢測技術,操作嚴謹、規范,能夠保證檢測結果的科學性、有效性.同時,本研究過程具有可重復性,可作為全自動血液分析儀線性評價的模板,具有一定的參考價值.

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Evaluation of the linearity of Coulter hematology analyzer LH 780

ZHANG Li, GUAN Xiaoyuan, DUAN Bing, et al

Objective: To evaluate the linearity of Coulter automated hematology analyzer LH 780. Methods: The linearity control used to be samples, the linear range of WBC, RBC, Hgb, Plt were evaluated with Coulter original reagents, calibrator and control. Results: The test results of the four parameters showed good linear relationship. The linear range of WBC, RBC, Hgb, Plt were (0.03～363.5)X109/L, (0.00～7.92)X1012/L, 0.3～236.0 g/L and (0.3～2511.0)X109/ L, respectively. Conclusion: For Coulter hematology analyzer LH 780, there is a wide linearity that can meet the demands of clinical laboratories.

Hematology analyzer; Linearity; White blood cell count; Red blood cell count; Hemoglobin concentration; Platelet concentration

1672-8270(2016)07-0022-04 [中圖分類號] R197.39

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.07.008

國家"十二五"重大新藥創制科技專項(2012ZX09303-008-001)"心血管創新藥物臨床研究技術平臺建設"

①中國醫學科學院北京協和醫學院阜外醫院衛生部心血管藥物臨床研究重點實驗室 北京 100037

hylhyl@foxmail.com

2015-10-21