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高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

2016-09-12 02:29:48衛(wèi)莉玲簡艷婷林曉旭林亮中國廣州分析測試中心廣東廣州510070
化工管理 2016年4期
關(guān)鍵詞:血漿分析

衛(wèi)莉玲 簡艷婷 林曉旭 林亮(中國廣州分析測試中心, 廣東 廣州 510070)

高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

衛(wèi)莉玲 簡艷婷 林曉旭 林亮
(中國廣州分析測試中心, 廣東 廣州 510070)

高效液相色譜法具有測量速度快、靈敏度高、回收率好等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)在多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,本文將對該法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行簡要介紹。

高效液相色譜法;藥物分析;應(yīng)用

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,簡稱HPLC)是在氣相色譜理論的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,該法在高壓下測量,色譜柱壓降明顯,測量速度快,可達(dá)到0.1-10.0mL/min;靈敏度高,耗樣量少,分離效果好等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn),為實(shí)現(xiàn)對藥品的快速、高效、高靈敏度的分離測定奠定了基礎(chǔ)[1]。本文將圍繞高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行分析。

1 高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

1.1 1HPLC在天然藥物分析中的應(yīng)用

天然藥物主要來源于植物,此外,動物和礦物也是藥物來源的重要組成部分。天然藥物化學(xué)成分復(fù)雜,因此其藥效可能有一種,也可能有多種,這就給藥物質(zhì)量控制提出了嚴(yán)格的要求。HPLC法的利用可對天然藥物的成分進(jìn)行準(zhǔn)確分析,并能對其含量進(jìn)行精確測定。以西洋參為例:西洋參是五加科植物,味苦、性涼、入心、肺、腎經(jīng),具有顯著的補(bǔ)益功能。西洋參的主要成分是皂苷類,尤其是Rb1、Rb2、Rc、Rd等7種皂苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到90%以上,成為評價(jià)西洋參藥性的重要指標(biāo)。2005年,陳軍輝等[2]利用HPLC法對12種西洋參的7種人參皂苷進(jìn)行測定,測定條件如下:梯度洗脫,Alltima Cu色譜柱,流動相為乙腈-0.05%磷酸水溶液;流速控制在1.2mL/min,溫度設(shè)定為35℃。實(shí)驗(yàn)儀器采用上海聲源超聲波儀器設(shè)備有限公司的高效液相色譜儀。在最佳色譜條件下,各種成分在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)聯(lián)性,7種人參皂苷的回收率達(dá)到94.%~97.9%,結(jié)果令人滿意。表1為實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄數(shù)據(jù)。

表1 人參皂苷加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=3)

1.2 HPLC在抗生素類藥物分析中的應(yīng)用

抗生素是通過微生物或其他方法產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì),該物質(zhì)在高度稀釋的情況下,仍然有很強(qiáng)的抑制或滅殺微生物的性能,因此在臨床得到了廣泛應(yīng)用。傳統(tǒng)的分析方法分析時(shí)間長、專一性較差,而高效液相色譜法在抗生素類藥物檢測中發(fā)揮了巨大的作用。Raphael Denooz等[3]利用高效液相色譜和紫外檢測器對人體血漿中的5中β-內(nèi)酰胺類抗生素進(jìn)行了檢測,流動相采用乙腈-磷酸鹽緩沖溶液(pH7.4),梯度洗脫;血漿樣品經(jīng)過固相萃取柱凈化后進(jìn)入HPLC進(jìn)行分析,血漿樣品回收率達(dá)到93.2%以上,結(jié)果令人滿意。

1.3 HPLC在毒物分析中的應(yīng)用

甲基苯丙胺(MA)的主要活性代謝物苯丙胺(PA)與MA具有類似的藥理作用,但其毒性較強(qiáng),成人一次用量達(dá)到PA30mg就會出現(xiàn)中毒反應(yīng),達(dá)到200mg就會使人中毒致死;MA和PA是濫用藥物“搖頭丸”的常見成分。楊小紅等[4]利用HPLC法對臨床中毒患者血漿中的MA和PA含量進(jìn)行了測定。測定方法如下:先將血漿樣品堿化,然后通過固相萃取柱凈化,再用鹽酸(0.3%)溶液洗脫;色譜柱選用島津CLCC18柱,流動相選用乙腈-甲醇-磷酸二氫鉀(25mmol/L)緩沖溶液,檢測波長定為210nm,檢測時(shí)間為60min,為臨床的快速診斷和搶救提供了可靠的依據(jù)。

1.4 HPLC在藥代動力學(xué)中的應(yīng)用

HPLC法除可對藥物成分和含量進(jìn)行分析外,還能對藥物在肌體內(nèi)的濃度進(jìn)行測定,然后結(jié)合相關(guān)的數(shù)據(jù)分析技術(shù),對藥物代謝動力學(xué)進(jìn)行分析。Gholamreza Bahramin等[5]利用高效液相色譜法對人血清中的阿奇霉素進(jìn)行了分析,方法如下:利用己烷對血清樣品進(jìn)行處理后用FMOC-Cl進(jìn)行衍生,然后熒光檢測;色譜柱選用苯基柱;流動相選用磷酸鹽緩沖-甲醇,定量方法為內(nèi)標(biāo)法。血藥濃度在10-500ng/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系,檢測靈敏度可達(dá)到10ng/mL。HPLC法在藥代動力學(xué)上的研究可為藥代動力學(xué)軟件提供數(shù)據(jù),經(jīng)過專業(yè)的數(shù)據(jù)分析后可獲得吸收半衰期、消除半衰期、達(dá)峰時(shí)間、最大血藥濃度一系列動力學(xué)參數(shù),為藥物的深入分析和研制提供了參考。

2 結(jié)語

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,HPLC技術(shù)將與其他的先進(jìn)技術(shù)聯(lián)合使用,進(jìn)一步提高藥物分析的速度、質(zhì)量和靈敏度,為我國醫(yī)學(xué)水平的提高和醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展提供重要保障。

[1]劉麗敏.高效液相色譜在中草藥和抗生素類藥物分析中的應(yīng)用[D].西南大學(xué),2008.

[2]朱余兵,周志娟,于翠霞,鄒建軍,張晶晶,楊小紅.HPLC法測定人血漿中奈韋拉平的濃度[J].中國藥房,2011,06:512-513.

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