羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響

梁易曉，劉麗娜，秦順義，王　昕，唐曉娟，趙方紅

（天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津西青300384）

羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響

梁易曉，劉麗娜，秦順義*，王昕，唐曉娟，趙方紅

（天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津西青300384）

為研究羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能、血液硒含量及抗氧化功能的影響，本試驗(yàn)將120只KM小鼠（雌雄各半），隨機(jī)均分為C組、TI組和T2組，分別喂基礎(chǔ)日糧、添加亞硒酸鈉的基礎(chǔ)日糧和添加羧甲基殼聚糖硒的基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)持續(xù)28 d。結(jié)果表明：T2組小鼠采食量和料重比較C組和T1組分別降低了5.24%、8.66%和4.27%、4.29%；但T2組、T1組和C組間小鼠的采食量、料重比及增重均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。T2組小鼠全血硒含量和血漿總抗氧化能力（T-AOC），較C組和T1組分別提高了78.95%（P＜0.01）、17.50%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）8.05%（P＜0.05）；T1組小鼠全血硒含量和血漿T-AOC較C組分別提高了52.63%（P＜0.05）和8.75%（P＜0.05）。T2組和T1組小鼠全血谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 （GSH-Px）活性分別較C組提高了24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2組小鼠全血GSH-Px活性較T1組提高了9.22%，但未達(dá)差異顯著水平（P＞0.05）。T2組小鼠血漿丙二醛（MDA）含量分別較C組和T1組降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿MDA含量較C組降低了13.21%（P＜0.05）。結(jié)果提示：羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉；羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能無(wú)影響。

羧甲基殼聚糖硒；小鼠；生長(zhǎng)性能；硒含量；抗氧化功能

［Abstract］This experiment was conducted to determine the effects of carboxymethyl chitosan selenium on growth performance，blood selenium content and antioxidation capacity in mice.One hundred and twenty KM mice，female and male in half，were randomly assigned into three dietary treatment groups for a 28 days study，which were fed basal diets，basal diets supplemented with sodium selenite and basal diets supplemented with carboxymethyl chitosan selenium，respectively. The results showed that feed intake and feed/gain ratio（F/G）in T2 group were 5.24%，8.66%and 4.27%，4.29%lower than those in T1 group and C group，while there were no significant differences in feed intake，F(xiàn)/G and weight gains of mice among T2 group，T1 group and C group（P＞0.05）.Blood selenium contents and plasma total antioxidant capacity（T-AOC）levels in T2 group were 78.95%（P＜0.01），17.50%（P＜0.01）and 17.24%（P＜0.05），8.05%（P＜0.05）higher than those in C group and T1 group，blood selenium contents and plasma T-AOC levels in T1group were 52.63%（P＜0.05）and 8.75%（P＜0.05）higher than those of C group.Blood glutathione peroxidase（GSH-Px）activities in T2 group and T1 group were 24.65%（P＜0.01）and 14.13%（P＜0.05）higher than that of C group.Blood GSH-Px activities in T2 group were 9.22%higher than that in T1 group（P＞0.05）.Plasma malonaldehyde（MDA）contents in T2 group were 29.40%（P＜0.01）and 18.66%（P＜0.05）lower than that in C group and T1 group.Plasma MDA contents in T1 group were 13.21%（P ＜0.05）lower than that in C group.The results indicated that carboxymethyl-chitosan selenium supplementation could increase blood selenium content and antioxidant capacity in mice，and its effects were better than sodium selenite in mice. While carboxymethyl-chitosan selenium had no effect on growth performance in mice.

［Key words］carboxymethyl-chitosan selenium；mice；growth performance；selenium content；antioxidation capacity

大量研究表明，微量元素硒具有抗氧化、促生長(zhǎng)、提高免疫力等多種生物學(xué)功能。飼料中添加的硒包括有機(jī)硒和無(wú)機(jī)硒兩大類(lèi)，與無(wú)機(jī)硒相比，有機(jī)硒具有毒性低、吸收利用率高、適口性好等特點(diǎn)。羧甲基殼聚糖硒是通過(guò)殼聚糖的羧甲基化修飾和硒化的方法合成的新型有機(jī)硒制劑 （金黎明等，2012），能夠同時(shí)發(fā)揮有機(jī)硒和羧甲基殼聚糖的雙重作用。本試驗(yàn)研究羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能、血液硒含量和抗氧化能力的影響，以期為羧甲基殼聚糖硒作為飼料添加劑的實(shí)際應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑PF6-2非色散原子熒光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；高性能硒空心陰極燈（北京有色金屬研究總院）；微控?cái)?shù)顯電熱板 （北京萊伯泰科儀器股份有限公司）；UV-1100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；JA2003電子天平（上海恒平科學(xué)儀器有限公司）；羧甲基殼聚糖硒（天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室制備）；亞硒酸鈉（天津市化學(xué)試劑研究所）；鹽酸、硝酸、高氯酸，均為分析純，購(gòu)自天津化學(xué)試劑二廠。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)清潔級(jí)KM小鼠120只 （雌雄各半，購(gòu)自中國(guó)軍事科學(xué)研究院），體重18～22 g，經(jīng)3 d的適應(yīng)性飼養(yǎng)后，隨機(jī)分為C組、T1組和T2組，每組40只（雌雄各半），每組有4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只小鼠。C組飼喂基礎(chǔ)日糧作為對(duì)照組，T1組和T2組分別在基礎(chǔ)日糧中添加亞硒酸鈉和羧甲基殼聚糖硒 （其劑量以硒計(jì)，均為0.2 mg/kg日糧）。小鼠自由采食及飲水，每日更換飲水及墊料。試驗(yàn)持續(xù)28 d。

1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1生長(zhǎng)性能指標(biāo)分別于試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)，對(duì)小鼠進(jìn)行稱重，每日記錄飼料消耗量，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)計(jì)算生長(zhǎng)性能相關(guān)指標(biāo)。

1.3.2血液樣品采集在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從每組選取8只小鼠（每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只），氟烷麻醉之后，眼眶后靜脈叢取血，存儲(chǔ)于加入肝素的抗凝采血管中備用；部分分離血漿，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3小鼠血液硒含量測(cè)定樣品的消化處理：在250 mL錐形瓶中加入待測(cè)樣品1 mL，再加入由濃硝酸與高氯酸組成的混酸 （V/V，1∶1）10 mL，密閉常溫消化12 h后，置于電熱板上加熱直至瓶?jī)?nèi)溶液變?yōu)橥该髑辶粒鋮s，然后加入6 mol/L鹽酸5 mL，再次加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o(wú)色，冷卻后定容，待測(cè)。

硒含量的測(cè)定：參照高建忠等（2006）的方法，利用氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測(cè)定全血硒含量。

1.3.4小鼠血液抗氧化功能指標(biāo)測(cè)定全血谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性、血漿總抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量測(cè)定試劑盒由南京建成生物研究所提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上進(jìn)行測(cè)定。

1.4數(shù)據(jù)處理用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用一般線性模型中的單因素方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2　結(jié)果

2.1羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能的影響由表1可知，T2組小鼠采食量較C組和T1組分別降低了5.24%和4.27%，T2組小鼠料重比較C組和T1組分別降低了8.66%和4.29%；但T2組、T1組和C組間小鼠的采食量、料重比及增重均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表1　羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能的影響

2.2羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠全血硒含量的影響由圖1可知，T2組小鼠全血硒含量分別較C組和T1組提高了78.95%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）；T1組小鼠全血硒含量較 C組提高了52.63%（P＜0.05）。

圖1　羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠全血硒含量的影響

2.3羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠血液抗氧化功能的影響由表2可知，T2組和T1組小鼠全血GSH-Px活性分別較 C組提高了 24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2組小鼠全血GSH-Px活性較T1組提高了9.22%，但未達(dá)差異顯著水平 （P＞0.05）。T2組小鼠血漿T-AOC分別較C組和T1組提高了 17.50%（P＜0.01）和 8.05%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿T-AOC水平較C組提高了8.75%（P＜0.05）。T2組小鼠血漿MDA含量分別較C組和T1組降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1組小鼠血漿MDA含量較C組降低了13.21%（P＜0.05）。

表2　羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠血液抗氧化功能的影響

3　討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，飼喂羧甲基殼聚糖硒的小鼠在增重提高3.43%的情況下，其采食量減少了5.24%，料重比降低了8.66%，但均未達(dá)差異顯著水平（P＞0.05），這說(shuō)明羧甲基殼聚糖硒可能具有提高小鼠生長(zhǎng)性能的趨勢(shì)。這可能與羧甲基殼聚糖硒中羧甲基殼聚糖作用的發(fā)揮有關(guān)，而與有機(jī)硒作用的發(fā)揮關(guān)系不大；但有在某些基礎(chǔ)日糧中硒含量遠(yuǎn)低于正常值的情況下，硒能夠顯著提高綿羊、肉牛等動(dòng)物的生產(chǎn)性能的文獻(xiàn)報(bào)道（Wichtel等，1996），但一般認(rèn)為，在基礎(chǔ)日糧中硒含量到達(dá)正常水平的情況下硒對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能無(wú)影響（Mehdi等，2013），而殼聚糖及其衍生物提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的作用已被大量研究證實(shí)（盧美鸞等，2008；趙燕等，2006）。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，作為有機(jī)硒的羧甲基殼聚糖硒較無(wú)機(jī)硒的亞硒酸鈉能更有效地提高小鼠血液硒含量。王昕等（2015）報(bào)道，羧甲基殼聚糖硒能更有效地提高肉兔血液硒含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉。陳秀蕓（2013）報(bào)道，硒化殼聚糖可顯著提高蛋用種公雞的血液硒含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉。Gunter等（2003）、Mahan和Kim（1996）在豬和牛上的報(bào)道也表明有機(jī)硒較無(wú)機(jī)硒更能提高血硒的含量。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液T-AOC水平、GSH-Px活性，降低血漿MDA含量，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉，這說(shuō)明羧甲基殼聚糖硒較亞硒酸鈉能更有效地提高小鼠血液抗氧化能力。這與王昕等 （2015）、曲韻笙和朱連勤（1998）應(yīng)用羧甲基殼聚糖硒或殼聚糖硒飼喂肉兔和小鼠所獲得的試驗(yàn)結(jié)果相一致。這應(yīng)該是有機(jī)硒和羧甲基殼聚糖共同發(fā)揮作用的結(jié)果：補(bǔ)硒提高動(dòng)物抗氧化能力已為大量文獻(xiàn)報(bào)道所證實(shí)（Mehdi等，2013）；而林友文等（2003）、吳迪等（2013）和王美娜等（2015）均報(bào)道了羧甲基殼聚糖在體內(nèi)或體外都具有提高動(dòng)物抗氧化能力的作用。

4　結(jié)論

羧甲基殼聚糖硒能夠提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果優(yōu)于亞硒酸鈉；羧甲基殼聚糖硒對(duì)小鼠生長(zhǎng)性能無(wú)影響。

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S816.7

A

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天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目（15JCYBJC30600）；天津市大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目（201510061084）