不同產地白術藥材中白術內酯I和II的含量測定

吳梓春　何兆錦（廣東省佛山市第一人民醫院（中山大學附屬佛山醫院）藥學部　佛山　528000）

不同產地白術藥材中白術內酯I和II的含量測定

吳梓春何兆錦（廣東省佛山市第一人民醫院（中山大學附屬佛山醫院）藥學部佛山528000）

目的：探討不同產地白術藥材中白術內酯I和白術內酯II的高效液相測定方法。方法：選擇浙江、安徽、甘肅、江西四個產地的白術藥材，色譜柱采用Hypersil 0DS（4.6mm×250mm，2.5μm），流動相為乙腈∶水=55∶45，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃，檢測波長223nm。結果：白術內酯I的線性關系方程為：Y=3.546×104+0.524×104（r=0.9998），在0.5～500μg范圍內線性關系良好；白術內酯II的線性關系方程為：Y=4.746×104+0.949×104（r=0.9997），在0.5～500μg范圍內線性關系良好。白術內酯I的平均加樣回收率為99.74%，RSD1.32%，白術內酯II平均加樣回收率為99.68%，RSD為2.01%。浙江產白術藥材中兩種有效成分含量最高，江西產白術藥材的兩種有效成分含量較低。結論：高效液相色譜法測定不同產地白術中的有效成分，方法簡單易操作，靈敏度高，準確性好，重復性強，可以作為白術質量控制的定量指標。

白術內酯I白術內酯II高效液相色譜 不同產地

中藥白術為菊科（Composetae）蒼術屬（Atractylodes）植物白術（Atractylodes macrocephala Koidz）的干燥根莖［1］，多數分布于我國的浙江、安徽、甘肅、湖南以及江西等產地［2］。白術味苦、甘，性溫，主要歸脾胃經，功能健脾益氣，燥濕利水，為補益類的補氣中藥材［3］。由于我國白術的產地較多，藥材的質量也有一定的差異，我國各個地域的生態環境、氣候等不同，導致了不同產地白術藥材有效成分的含量存在差異。為了加強白術藥材的質量控制，本研究以白術中白術內酯I、白術內酯II的含量作為觀察指標，采用高效液相色譜法觀察不同產地白術中上述兩種有效成分的含量。

1　儀器與試藥

1.1實驗儀器：日本島津LC-10AT型單泵高效液相色譜儀，SPD-10AVP型紫外檢測器，島津CBM色譜工作站。手提式高速萬能粉碎機DFD-100、4號篩，電熱恒溫鼓風干燥箱，KQ-500E型超聲波清洗儀，美國梅特勒電子分析天平（精密度為0.0001g），PL-80離心沉淀機。

1.2實驗試藥：白術藥材采自浙江、安徽、甘肅、江西四個產地，藥材均經專家鑒定分別為菊科（Compositae）植物白術（Atractylodes macrocephala koidz）的干燥根莖和菊科植物Atractylades macrocephalacv.Yuzhu的干燥根莖。乙腈為色譜純，水為三蒸水，其他試劑均為分析純。

2　方法與結果

2.1色譜條件的選擇：色譜柱采用Hypersil 0DS（4.6mm×250mm，2.5μm），流動相為乙腈∶水=55∶45，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃，檢測波長223nm，進樣量為20μL。以白術內酯I作為參考，色譜柱的理論塔板數＞5000。

2.2對照品溶液的制備：精密稱定白術內酯I對照品0.4mg，置于5ml容量瓶中，甲醇溶液定溶至刻度后搖勻，靜置；取白術內酯II對照品0.45mg精密稱定后置于5ml容量瓶中，甲醇溶液定溶至刻度后搖勻，靜置。兩種對照品溶液置于-20℃冰箱中保存，備用。

2.3供試品溶液的制備：取白術藥材2.0g置于粉碎機中粉碎后過4號篩，精密稱定后置于加塞錐形瓶中，加入甲醇溶液50ml后稱定重量，超聲處理40min。放冷后再次稱定重量，甲醇溶液將減少的重量補足后以塞蓋住錐形瓶，搖勻，過0.45μm微孔濾膜后，置于3000轉/min的離心機中離心10min，取上清液即得供試品溶液。

2.4標準曲線的繪制：將分別溶解于甲醇溶液中的白術內酯I、白術內酯II對照品溶液稀釋成0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0、80.0、100.0μg/ml的白術內酯I、II標準溶液，按照“2.1”項下的色譜條件，分別進樣20μL，以白術內酯I、II色譜峰面積作為縱坐標，白術內酯I、II對照品質量濃度為橫坐標繪制標準曲線，得到回歸方程以及相關系數。白術內酯I的線性關系方程為：Y= 3.546×104+0.524×104（r=0.9998），在0.5～500μg范圍內線性關系良好；白術內酯II的線性關系方程為：Y=4.746×104+0.949×104（r=0.9997），在0.5～500μg范圍內線性關系良好。

2.5穩定性考察：取同一批次的樣品藥材，按照“2.3”項下供試品溶液的制備方法進行操作，制備供試品溶液后精密吸取同一供試品溶液，按照“2.1”項下的色譜條件進樣，分別在配制溶液后0、1、4、6、8、12、24h吸取20μL進樣分析，按照線性關系方程計算白術內酯I、白術內酯II在供試品溶液中的穩定性，結果表明白術內酯I的RSD值為2.14%，白術內酯II的RSD值為2.01%，表明溶液在24h內較為穩定。

2.6精密度考察：將：2.5：項下配制的同一批次供試品溶液，吸取20μL，按照“2.1”項下的色譜條件重復進樣5次，計算峰面積值，結果表明其RSD值為1.36%，表明該儀器的精密度良好。

2.7重現性考察：取同一白術樣品粉末，精密稱取5份，每份為1.245g，按照“2.3”項下的供試品溶液的制備方式進行配制，按照“2.1”項下的色譜條件進樣后得到白術內酯I、白術內酯II的RSD分別為1.84%、1.76%，表明該色譜條件下測定結果的重現性良好。

2.8加樣回收率試驗：精密稱取已知白術內酯I、白術內酯II含量的白術粉末，精密稱定5份，精密加入白術內酯I、II對照品適量，按照“2.3”項下供試品溶液的制備方式進行供試品溶液的配制，按照“2.1”項下的色譜條件進行色譜圖的分析，計算平均加樣回收率，結果見表1、表2。

表1　白術內酯I加樣回收率測定結果（n=5）

表2　白術內酯II 加樣回收率測定結果（n=5）

2.9不同產地白術含量測定結果：取浙江、安徽、甘肅、江西白術樣品約1.0g，精密稱定后按照“2.3”項下的供試品溶液制備溶液并進行處理測定，按照“2.1”項下的色譜條件進樣，計算不同產地白術藥材中白術內酯I、II的含量并進行比較，結果見表3。

表3　不同產地白術藥材中白術內酯I、II含量測定結果

3　討論

3.1流動相的選擇：本研究中采用了乙腈：水，甲醇：水等按照不同比例流動相系統，結果顯示在乙腈∶水=55∶45時色譜系統可以獲得較好的峰形，同時色譜峰分離較好。因此實驗中選擇乙腈：水作為流動相。

3.2檢測波長的選擇：采用Agilent 1100DAD三維圖譜進行分析得到白術內酯類化合物在223nm處有最大的吸收峰，為了在同一條件下進行檢測，選擇同時檢測兩個波長的信號［4］。

不同產地的白術內酯含量具有一定的差異［5］，在相同的測定條件下，分離得到的白術內酯I、II含量，浙江產地的白術藥材中最多，江西產地的藥材則偏少，因此如果要獲得較多含量的白術內酯可以選擇浙江產的白術中藥材。

［1］趙桂芝，洪學智.白術內酯的藥理學研究進展［J］.中國藥房，2012，20（3）：230-231.

［2］曾志，周育妹.3個不同產地白術的揮發性化學成分比較［J］.華南師范大學學報，2012，47（5）：78-83.

［3］趙紅紅.三產地白術揮發油氧化分解后化學成分的變化［J］.山西大學學報，2015，38（3）：516-521.

［4］田穎.不同產地白術藥材中白術內酯II和III的含量測定［J］.海峽藥學，2012，24（8）：65-67.

［5］姜東京，徐志偉.浙江道地藥材於術與白術的質量對比研究［J］.中華中醫藥學刊，2014，32（12）：2864-2866.

R284.1

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1672-8351（2016）09-0010-02