煙草氧化脅迫相關基因NtOSA1的克隆表達及亞細胞定位分析

劉繼愷，高永峰，吳嬋娟，張 林，陳彩霞

(1 西南科技大學 生命科學與工程學院，四川綿陽 621010；2 西南科技大學 核廢物與環境安全國防重點實驗室，四川綿陽 621010)

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煙草氧化脅迫相關基因NtOSA1的克隆表達及亞細胞定位分析

劉繼愷1, 2，高永峰1，吳嬋娟1, 2，張 林1，陳彩霞1

(1 西南科技大學 生命科學與工程學院，四川綿陽 621010；2 西南科技大學 核廢物與環境安全國防重點實驗室，四川綿陽 621010)

植物類蛋白激酶Abc1家族(activity of bc1 complex)在植物生長發育及響應非生物脅迫中起著重要的作用。該研究通過將擬南芥AtOSA1蛋白氨基酸序列與煙草轉錄組數據進行比對，利用巢式PCR技術克隆得到1個煙草氧化脅迫相關Abc1家族基因NtOSA1，NtOSA1與擬南芥AtOSA1基因具有72.89%的一致性。NtOSA1基因開放閱讀框長度為2 283 bp，編碼760個氨基酸，含有典型的ABC1結構域、一個激酶結構域、葉綠體定位信號肽和兩個跨膜結構域。采用實時熒光定量PCR技術，對NtOSA1基因在煙草不同組織以及氧化脅迫、鹽脅迫等處理下的表達分析表明：NtOSA1基因的表達具有組織特異性，主要在葉片中表達；NtOSA1基因在H2O2和NaCl處理后表達量上升，均在處理后6 h達到最大值，分別為處理前的1.95和2.69倍。亞細胞定位結果表明，NtOSA1蛋白定位在細胞葉綠體上，與預測結果一致。研究表明，NtOSA1基因參與了煙草抗氧化脅迫和鹽脅迫的響應。

煙草；氧化脅迫相關Abc1基因；基因克隆；表達特性；亞細胞定位

植物在生長發育過程中不可避免會遭遇到各種逆境脅迫，如高溫、低溫、干旱、重金屬和鹽堿等。這些逆境脅迫會使植物氧化還原代謝失衡，導致體內積累大量的活性氧，從而產生氧化脅迫。……