葡萄抗白粉病相關基因γVPE的克隆與表達分析

王晏青， 張小瑩，宋珈凝，王躍進， 張朝紅

(西北農林科技大學 園藝學院，旱區作物逆境生物學國家重點實驗室，農業部西北地區園藝作物生物學與種質創制重點實驗室，陜西楊陵712100)

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葡萄抗白粉病相關基因γVPE的克隆與表達分析

王晏青， 張小瑩，宋珈凝，王躍進， 張朝紅*

(西北農林科技大學 園藝學院，旱區作物逆境生物學國家重點實驗室，農業部西北地區園藝作物生物學與種質創制重點實驗室，陜西楊陵712100)

該研究采用RT-PCR技術，從抗病的中國野生華東葡萄‘白河-35-1’和感病的歐洲葡萄‘佳麗釀’中克隆了液泡加工酶基因(γVPE)，分別命名為VpγVPE和VvCγVPE。克隆的2個γVPE基因cDNA長度均為1 624 bp，ORF為1 482 bp，編碼493個氨基酸。氨基酸多序列對比分析發現，‘白河-35-1’、‘佳麗釀’、‘無核白’和‘黑比諾’葡萄中的γVPE基因底物結合口袋域的3個關鍵氨基酸之一的絲氨酸(Ser395)均變為丙氨酸(Ala)，與其他植物的VPE基因底物口袋結合域有所不同。實時熒光定量PCR表明，在白粉菌誘導后的不同時期內，γVPE基因在感病葡萄和抗病葡萄中的表達模式不同，抗病株系中VpγVPE基因的表達量在誘導后的前期(4 h和48 h)和后期(168 h)均有所增加，而感病株系中VvCγVPE基因在誘導后4 h表達量最高，隨后降低。γVPE基因在白粉菌誘導后不同時期內表達量的變化，表明γVPE基因在一定程度上與葡萄的抗性相關。研究結果為進一步揭示γVPE基因在抗病過程中的分子機理奠定了基礎。

葡萄；γVPE；基因克隆；白粉病；表達分析

植物在長期的進化歷程中形成了嚴密而復雜的防御體系，使植物能夠抵抗病原菌的入侵和其他因子造成的危害，從而更好地適應周圍的生活環境并不斷地繁衍后代[1]。……