淺析葉綠素a測(cè)定比色法與儀器法比對(duì)試驗(yàn)

陳華

（張家港市環(huán)境監(jiān)測(cè)站江蘇張家港215600）

淺析葉綠素a測(cè)定比色法與儀器法比對(duì)試驗(yàn)

陳華

（張家港市環(huán)境監(jiān)測(cè)站江蘇張家港215600）

文中就比色法與手持式葉綠素測(cè)定儀對(duì)浮游植物葉綠素a的測(cè)定進(jìn)行了兩種方法的比對(duì)和探討，保證和提高監(jiān)測(cè)結(jié)果的有效性和準(zhǔn)確性。在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，通過測(cè)定浮游植物葉綠素，可掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力情況。

葉綠素a；比對(duì)實(shí)驗(yàn)；結(jié)果分析

1　儀器設(shè)備

1.1ChloroTech121A型手持式葉綠素測(cè)定儀。

1.2TU-1901可見紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)等。

2　比對(duì)實(shí)驗(yàn)

2.1比色法測(cè)定

2.1.1在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜（孔徑0.45μm），倒入定量體積的水樣進(jìn)行抽濾。

2.1.2取出帶有浮游植物的濾膜，在冰箱內(nèi)低溫干燥6h～8h。

2.1.3將干燥后的濾膜放入研磨器中，加入少量碳酸鎂粉末及2 mL～3mL90%的丙酮，充分研磨，提取葉綠素a。將上清液轉(zhuǎn)移到10mL具塞離心管。用離心機(jī)（3000r/min～4000r/min)離心10min。

2.1.4將離心上清液用90%的丙酮定容到10mL。

2.1.5將定容后的溶液在分光光度計(jì)上，用1cm光程的比色皿，分別讀取750nm、663nm、645nm、630nm波長(zhǎng)的吸光度，并以90%的丙酮作空白，對(duì)樣品吸光度校正。

2.1.6計(jì)算

葉綠素a（mg/m3)=

2.2手持式葉綠素儀測(cè)定

2.2.1按住“ON/OFF”約2s，出現(xiàn)開機(jī)畫面后，松開按鍵，進(jìn)入開機(jī)歡迎界面。

2.2.2按“△”或“▽”鍵選擇程序1，按“ENTER”鍵進(jìn)入。

2.2.3樣品測(cè)量：用吸管移取蒸餾水至方形比色皿中大約2/3處，將比色皿放入測(cè)量池中，蓋上蓋子，按“CAL”鍵校準(zhǔn)空白，然后按“ENTER”鍵保存空白。

用吸管移取待測(cè)水樣至方形比色皿中大約2/3處，將比色皿放入測(cè)量池中，蓋上蓋子，當(dāng)?shù)褂?jì)時(shí)為“00”時(shí)，按“READ”讀取樣品。2s后，測(cè)量結(jié)束，顯示樣品結(jié)果。

3　比對(duì)數(shù)據(jù)

葉綠素項(xiàng)目沒有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可作為控制樣，通過水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法(第四版)葉綠素a的測(cè)定與手持式葉綠素測(cè)定儀對(duì)對(duì)實(shí)際采集的5批水樣進(jìn)行比對(duì)分析，計(jì)算測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差。

表1　實(shí)際采集5批水樣進(jìn)行比對(duì)

4　結(jié)語

通過兩種方法的比對(duì)顯示所測(cè)結(jié)果無顯著性差異。在葉綠素a比色法受諸多因素等限制的前提下，ChloroTech121A型手持式葉綠素測(cè)定儀具有操作便捷、快速、穩(wěn)定并可進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)，保證和提高了監(jiān)測(cè)結(jié)果的有效性和準(zhǔn)確性。

[1]國(guó)家環(huán)保總局.水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法:第四版.北京：中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社,2002.

[2]ChloroTech121A型手持式葉綠素測(cè)定儀操作手冊(cè).Environ Lab &Techlnc.中國(guó)技術(shù)服務(wù)中心,2012.