淺析葉綠素a測定比色法與儀器法比對試驗

陳華

（張家港市環(huán)境監(jiān)測站江蘇張家港215600）

淺析葉綠素a測定比色法與儀器法比對試驗

陳華

（張家港市環(huán)境監(jiān)測站江蘇張家港215600）

文中就比色法與手持式葉綠素測定儀對浮游植物葉綠素a的測定進行了兩種方法的比對和探討，保證和提高監(jiān)測結(jié)果的有效性和準確性。在環(huán)境監(jiān)測中，通過測定浮游植物葉綠素，可掌握水體的初級生產(chǎn)力情況。

葉綠素a；比對實驗；結(jié)果分析

1　儀器設備

1.1ChloroTech121A型手持式葉綠素測定儀。

1.2TU-1901可見紫外分光光度計、離心機等。

2　比對實驗

2.1比色法測定

2.1.1在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜（孔徑0.45μm），倒入定量體積的水樣進行抽濾。

2.1.2取出帶有浮游植物的濾膜，在冰箱內(nèi)低溫干燥6h～8h。

2.1.3將干燥后的濾膜放入研磨器中，加入少量碳酸鎂粉末及2 mL～3mL90%的丙酮，充分研磨，提取葉綠素a。將上清液轉(zhuǎn)移到10mL具塞離心管。用離心機（3000r/min～4000r/min)離心10min。

2.1.4將離心上清液用90%的丙酮定容到10mL。

2.1.5將定容后的溶液在分光光度計上，用1cm光程的比色皿，分別讀取750nm、663nm、645nm、630nm波長的吸光度，并以90%的丙酮作空白，對樣品吸光度校正。

2.1.6計算

葉綠素a（mg/m3)=

2.2手持式葉綠素儀測定

2.2.1按住“ON/OFF”約2s，出現(xiàn)開機畫面后，松開按鍵，進入開機歡迎界面。

2.2.2按“△”或“▽”鍵選擇程序1，按“ENTER”鍵進入。

2.2.3樣品測量：用吸管移取蒸餾水至方形比色皿中大約2/3處，將比色皿放入測量池中，蓋上蓋子，按“CAL”鍵校準空白，然后按“ENTER”鍵保存空白。

用吸管移取待測水樣至方形比色皿中大約2/3處，將比色皿放入測量池中，蓋上蓋子，當?shù)褂嫊r為“00”時，按“READ”讀取樣品。2s后，測量結(jié)束，顯示樣品結(jié)果。

3　比對數(shù)據(jù)

葉綠素項目沒有標準物質(zhì)可作為控制樣，通過水和廢水監(jiān)測分析方法(第四版)葉綠素a的測定與手持式葉綠素測定儀對對實際采集的5批水樣進行比對分析，計算測定結(jié)果的相對偏差。

表1　實際采集5批水樣進行比對

4　結(jié)語

通過兩種方法的比對顯示所測結(jié)果無顯著性差異。在葉綠素a比色法受諸多因素等限制的前提下，ChloroTech121A型手持式葉綠素測定儀具有操作便捷、快速、穩(wěn)定并可進行現(xiàn)場測定等優(yōu)點，保證和提高了監(jiān)測結(jié)果的有效性和準確性。

[1]國家環(huán)保總局.水和廢水監(jiān)測分析方法:第四版.北京：中國環(huán)境科學出版社,2002.

[2]ChloroTech121A型手持式葉綠素測定儀操作手冊.Environ Lab &Techlnc.中國技術服務中心,2012.