凝膠滲透色譜/氣相色譜法測(cè)定大豆油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚

魏超 姚祖江 馮輝

摘要 應(yīng)用凝膠滲透色譜（GPC）和氣相色譜（GC）技術(shù)，建立了大豆油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）的分析方法。樣品經(jīng)GPC全自動(dòng)凝膠凈化定量濃縮聯(lián)用儀凈化，HP-5（30 m×0.32 mm，0.25 μm）色譜柱進(jìn)行分離測(cè)定。 本方法的檢出限為4 mg/kg。TBHQ在檢測(cè)范圍內(nèi)具有良好的線性，在濃度1～1 000 mg/L范圍內(nèi)與峰面積呈線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.999 6。加標(biāo)油樣的回收率在88.3%～95.4%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于4%。

關(guān)鍵詞 大豆油；特丁基對(duì)苯二酚；凝膠滲透色譜；氣相色譜儀

中圖分類號(hào) TS221 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2016）08-0273-02

Abetract Using gel penetration chromatography （GPC） and gas chromatography （GC） technique to establish analysis method of soybean oil antioxid-ant tertiary butyl hydroquinone （TBHQ）. Sample by GPC automatic gel purification quantitative concentration spectrometer purification， HP-5 （30 m× 0.32 mm，0.25 μm） for the separation and deter mination of chromatographic column.The detection limit was 4 mg/kg.TBHQ had a good linearity in the detection range，the concentration in the range of 1～1 000 mg/L and the peak area was linear correlation，the correlation coefficient was 0.999 6.Recovery rate of oil sample was between 88.3% and 95.4%.The relative standard deviation （RSD） was less than 4%.

Key words soybean oil；TBHQ；gel permeation chromatography；gas chromatography

氧化是導(dǎo)致食品品質(zhì)變劣的重要因素之一，特別是在食用油或者含油量較高的食品中更是如此。大豆油是日常生活中主要的一種食用油，為了防止大豆油氧化酸敗，延長(zhǎng)貨架期，市售大豆油往往需要在其中添加適宜的抗氧化劑[1-3]。特丁基對(duì)苯二酚作為油溶性抗氧化劑的新型產(chǎn)品，它的抗氧化能力大于2，6-二叔丁基對(duì)甲苯（BHT），被廣泛用于延遲或阻止食品油脂的氧化變質(zhì)中。

食用油脂中TBHQ常用的分析方法有比色法、氣相色譜法、液相色譜法，但這些前處理方法比較繁瑣，同時(shí)樣品油脂得不到充分的凈化[2-4]。該文采用凝膠滲透色譜/氣相色譜法測(cè)定大豆油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚，具有步驟簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)儀器與試劑

1.1.1 供試儀器。7683 Series自動(dòng)進(jìn)樣器；GPC全自動(dòng)凝膠凈化-定量濃縮聯(lián)用儀：Free StyleTM ；氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：HEIDOLPH；漩渦混合器： IKA GENIUS 3；電子天平：梅特勒-托利多ML204；6890N氣相色譜儀：Aglient。

1.1.2 供試試劑。TBHQ標(biāo)準(zhǔn)品（純度99%）：農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所；環(huán)己烷、乙酸乙酯均為色譜純；市售一級(jí)大豆油。

1.2 氣相色譜分析條件

HP-5非極性毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm i.d）， 膜厚0.25 μm （Aglient，USA） ；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；FID檢測(cè)器溫度：250 ℃；程序升溫：初始溫度80 ℃，保留1 min，以10 ℃/min速度升至220 ℃，保持穩(wěn)定1 min；載氣流速1.2 mL/min，高純氮?dú)狻?/p>

1.3 GPC條件

GPC柱填料為BioBeads S- X3 200～400目，規(guī)格（200 mm×22 mm i.d.），流動(dòng)相乙酸乙酯/環(huán)己烷（1∶1，v/v）， 進(jìn)樣量 5 mL， 流速為5.0 mL/min， 樣品收集時(shí)間9～16 min。

1.4 樣品處理

準(zhǔn)確量取大豆油樣0.5 g（精確值0.1 mg）， 用乙酸乙酯/環(huán)己烷（1∶1，v/v）準(zhǔn)確定容至10.0 mL，過(guò)Ф25 0.45 μm有機(jī)膜，漩渦混合2 min，按1.3條件對(duì)樣品進(jìn)行處理，將收集液在30 ℃下真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，再用乙酸乙酯/環(huán)己烷（1∶1，v/v）準(zhǔn)確定容至2 mL。進(jìn)樣量1.0 μL。按照1.2條件進(jìn)行氣相色譜分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 GPC凈化條件優(yōu)化

取TBHQ標(biāo)準(zhǔn)樣品10 mL，按照1.3條件進(jìn)行處理，收集9～16 min的流出液，然后在30 ℃下真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，準(zhǔn)確定容至2 mL，按照1.2條件使用氣相色譜進(jìn)行檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)品、空白樣品加標(biāo)氣相色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2 GPC收集時(shí)間的確定

以收集時(shí)間為橫坐標(biāo)，以色譜圖峰面積為縱坐標(biāo)繪制TBHQ隨時(shí)間流出曲線圖，具體見(jiàn)圖2。可以看出，TBHQ集中在9～16 min流出，因此初步確定流出時(shí)間為9～16 min。

2.3 未知樣品中TBHQ的含量測(cè)定

利用本方法對(duì)市售的8種樣品進(jìn)行檢測(cè)，由分析結(jié)果可知，TBHQ均未檢出。

2.4 方法的線性關(guān)系與檢出限

按照3倍信噪比進(jìn)行計(jì)算，方法的檢出限約為4 mg/kg。對(duì)系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按照上述色譜條件進(jìn)樣分析，以峰面積定量，從而得到標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與峰面積之間的線性回歸方程：Y=2 472X+1.330，保留時(shí)間為12.035 min，相關(guān)系數(shù)R2=0.9 996。

2.5 方法的回收率

在空白大豆油樣品中分別添加0.1、0.4、1.0 mg/mL的TBHQ標(biāo)準(zhǔn)溶液， 3次重復(fù)，按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定TBHQ的加標(biāo)回收率分別為88.3%、92.6%、95.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于4%，精密度良好，滿足分析要求。

3 結(jié)論

應(yīng)用凝膠滲透色譜（GPC）和氣相色譜（GC）技術(shù)，建立了大豆油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）的分析方法。樣品經(jīng)GPC全自動(dòng)凝膠凈化定量濃縮聯(lián)用儀凈化，HP-5（30 m×0.32 mm，0.25 μm）色譜柱進(jìn)行分離測(cè)定。 本方法的檢出限為4 mg/kg。TBHQ在檢測(cè)范圍內(nèi)具有良好的線性，在濃度1～1 000 mg/L范圍內(nèi)與峰面積呈線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 6。加標(biāo)油樣的回收率在88.3%～95.4%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于4%。該方法具有步驟簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，適用于大豆油中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚（TBHQ）的檢測(cè)[7-8]。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 許華，穆同娜，李偉.凝膠滲透色譜/氣相色譜法測(cè)定食用油脂中抗氧化劑特丁基對(duì)苯二酚[J].食品科技，2007，35（6）：217.

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