相轉移催化水解—超分子溶劑萃取法測定食用油中鄰苯二甲酸酯總量

韓楊瑩 劉拉平 孫婧茹 ??王瑾 馮靜 劉書慧

摘要建立了食用油中鄰苯二甲酸酯總量的快速測定方法。在四丁基氯化銨的催化作用下，油樣中的鄰苯二甲酸酯水解為鄰苯二甲酸，進一步利用辛醇、四氫呋喃和水形成的超分子溶劑萃取，采用高效液相色譜串聯質譜法（HPLCMS/MS）定量分析。本方法的水解時間為10 min，目標物的線性范圍為50～2000 μg/L（r>0.999），檢出限（LOD）為5.1 μg/kg，定量限（LOQ）為18 μg/kg， 3個水平加標回收率為84.6%～104.5%， 日內及日間精密度分別為2.6%和3.7%。選擇12種實際油樣進行測定，鄰苯二甲酸酯總含量范圍為0.30～1.09 mg/kg。

關鍵詞 鄰苯二甲酸酯總量； 四丁基氯化銨； 超分子溶劑萃取； 食用油

1引言

鄰苯二甲酸酯（Phthalate esters，PAEs），俗稱酞酸酯，廣泛用于塑料制品中。PAEs與塑料分子間以非化學鍵結合，容易遷移到周圍環境中。動物實驗表明PAEs有一定的致癌性、致畸性和致突變性。GB 96852008《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛生標準》對塑料容器（僅針對接觸非脂肪性食品的材料）中鄰苯二甲酸二甲酯（Dimethyl phthalate， DMP）、鄰苯二甲酸二丁酯（Dinbutyl phthalate， DBP）、鄰苯二甲酸二（2乙基）己酯（Di2ethylhexyl phthalate， DEHP）、鄰苯二甲酸丁芐酯（Butyl benzyl phthalate， BBP）等PAEs的最大使用量及特定遷移量或最大殘留量做出規定： 兩種常見的增塑劑DBP和DEHP的特定遷移量分別為0.3和1.5 mg/kg[1]。食用油通常盛放在塑料容器中，由于PAEs脂溶性較強，因而塑料制品中的PAEs更容易遷移到食用油中[2～4]。

GB/T 219112008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》規定了用GCMS檢測食品中16種PAEs的方法，該方法用乙酸乙酯和環己烷混合萃取食品中的PAEs，后用凝膠滲透色譜凈化樣品[5]，SN/T 31472012《出口食品中鄰苯二甲酸酯的測定》用QuChERS （Quick， Easy， Cheap， Effective， Rugged and Safe） 結合SPE法處理樣品，再用GCMS或LCMS/MS測定食品中23種PAEs[6]。鑒于PAEs種類的多樣性，這些方法測定結果具有一定的局限性。另外，在樣品前處理方面，目前常用固相萃取法（SPE）[7～9]、固相微萃取法（SPME）[10，11]、加速溶劑萃取法（ASE）[12]和凝膠滲透色譜法（GPC）[13]萃取和凈化復雜基質中的PAEs。這些方法操作繁瑣、費用昂貴，且容易造成過程污染。采用將樣品中的PAEs快速水解為鄰苯二甲酸（Phthalic acid，PA）然后萃取測定PA含量的方法可避免上述問題，相對全面地反映產品中PAEs總量和污染狀況。

Ostrovsky等[14]建立了測定脂肪食品中PAEs總量的分析方法，樣品中PAEs在經過液液萃取、水解及衍生反應轉化成DMP后，采用GC測定。張明明等[15]將食用油中PAEs水解成PA，通過乙酸乙酯液液萃取結合HPLC檢測PA，得到食用油中PAEs的總量。上述研究中水解時間分別為20和2.5 h。油相中的PAEs與水相中的堿不能很好接觸可能是導致PAEs水解時間過長的原因。由于合成反應中常用相轉移催化劑加快非均相有機反應的反應速率，所以本研究嘗試采用相轉移催化劑（四丁基氯化銨）縮短水解時間。

超分子溶劑萃取（Supramolecular solvent microextraction，SUSME）是2008年由Rubio等[16～19]提出的一種新型萃取技術，多用長鏈烷基（C7～C14）醇或酸與四氫呋喃（Tetrahydrofuran， THF）及水混合，形成不溶于水的反向膠束，該膠束聚集成的凝聚體即為超分子溶劑（Supramolecular solvent，SUPRAS）。SUPRAS可萃取極性范圍不同的分析物， 制備過程簡單易行，可通過改變THF的比例調節反向膠束中心孔徑的大小，阻礙大分子物質進入萃取相，達到萃取凈化兼顧的效果[18]。

本研究基于相轉移催化劑催化堿水解PAEs，用SUSME法萃取PA，采用HPLCMS/MS分析檢測，建立一種快速、簡單、高靈敏度的食用油中PAEs總量的測定方法。

4結 論

本研究采用相轉移催化劑顯著提高樣品的水解速率，縮短水解時間； 采用超分子溶劑體系實現目標物質PA的高效萃取，并具有較好的樣品凈化作用，最終實現食用油中PAEs總量的快速檢測。本方法前處理過程簡單，具有較高的靈敏度、準確度和精密度，同時減少了有機溶劑的使用，降低了實驗成本。本方法可推廣應用于其它高脂樣品中PAEs總量的測定，超分子溶劑萃取方法也適用于其它分析物的提取。

圖6鄰苯二甲酸標準品（超分子溶劑配制）、樣品中鄰苯二甲酸酯總量及加標測定 （HPLCMS/MS） 色譜圖

Fig.6HPLCMS/MS chromatograms of PA standard in supramolecular solvent and PAEs sum in blank and spiked samples

A. 0.5 mg/L PA標準品，B. 橄欖油，C. 空白油樣加標0.18 mg/kg PA。

A.0.5 mg/L PA standard solution， B. Blend oil， C. Blank sample was spiked at 0.18 mg/kg PA.

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