不同檢測儀器對SD大鼠血液生理指標測定的影響

謝金東楊燕燕林瑋俞春英周建華劉德強王訓立（福建中醫藥大學實驗動物中心福州350122）

不同檢測儀器對SD大鼠血液生理指標測定的影響

謝金東楊燕燕林瑋俞春英周建華劉德強王訓立*
（福建中醫藥大學實驗動物中心福州350122）

目的：比較實驗動物專用血細胞分析儀與醫用血細胞分析儀對SD大鼠血液生理指標測定值的差異，分析檢測儀器對大鼠血液生理指標測定的影響。方法：36只SD大鼠，體重約200 g，雌雄各半，屏障環境飼養，試驗前禁食12 h，麻醉后采血，分別用實驗動物專用血細胞分析儀與醫用血細胞分析儀測定20項血液生理指標。結果：兩種儀器分別檢測的SD大鼠的平均血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白含量、白細胞數量、淋巴細胞數量、單核細胞數量、嗜堿性粒細胞數量、嗜中性白細胞百分比、單核細胞百分比、嗜酸性粒細胞百分比、嗜堿性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、血小板數量、血小板分布寬度差異極顯著（P＜0.01）；血紅蛋白濃度、嗜中性白細胞數量、紅細胞分布寬度差異顯著（P＜0.05）；紅細胞數量、紅細胞壓積、平均紅細胞體積、嗜酸性粒細胞數量差異不顯著（P＞0.05）。結論：不同檢測儀器對SD大鼠血液學指標的檢測有影響。

檢測儀器SD大鼠血液生理指標

在生命科學研究中，實驗動物是科學研究的四大要素之一，被比喻為活的試劑，而大鼠被廣泛應用于生理學、藥物學和代謝性疾病等研究，大鼠血液生理生化指標是非常重要的檢測指標。綜觀各種文獻資料表明，目前大鼠血液生理生化指標正常參考值較多［1-6］，但由于動物品種品系［7］、微生物控制等級［8-9］、年齡［10］、性別［11］、飼養環境、營養狀況、樣本采集時間［12］、麻醉因素［13］、檢測方法、樣本大小等條件不同，所得正常值指標也有很大差異，影響大鼠血液生理生化指標的因素較多。近年來，這些因素為多數科研工作者所重視并加以考慮，但是，檢測儀器對實驗動物的血液生理生化數據方面產生的誤差，往往被大多數人所忽視，因而，造成試驗數據的不準確和不可靠。本研究用實驗動物專用血細胞分析儀檢測大鼠血液生理指標，并與醫用血細胞分析儀檢測所得數據進行比較，探討檢測儀器對測定指標的影響，為大鼠在生命科學研究中的廣泛應用提供參考依據。

1　材料與方法

1.1實驗動物SD大鼠36只，體重（200±20 g），由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，許可證號SCXK（滬）2012-0002。動物飼養于福建中醫藥大學實驗動物中心，許可證號SYXK（閩）2014-0001。分籠飼養，每籠5只，雌雄動物分開，以避免因交配導致妊娠。飼養條件可控，飼養室溫度20～26℃，日溫差不超過3℃，濕度50%～70%，光照12 h明，12 h暗，飼料為全價營養飼料，飲用無菌潔凈水。

1.2儀器三洋MLS-3750高壓滅菌器；Sysmex XT-2000iV全自動五分類動物血液分析儀；雅培CD-Ruby全自動血細胞分析儀。

1.3耗材試劑3%水合氯醛，眼科剪，止血鉗，刀片，滅菌棉簽，75%酒精，一次性采血管，EDTA抗凝管。動物血液分析儀檢測試劑，含稀釋液（CELLPACK），20 L/盒；血紅蛋白溶血素（SULFILOYSER），5 L/盒；嗜堿性粒細胞溶血素（STROMATOLYSERFB），5 L/盒；白細胞分類溶血素（STROMATOLYSER-4DL），2 L/盒；白細胞分類染色液（STROMATOLYSER-4DS），42 mL×3/盒；網織紅細胞稀釋染色液（RET-SEARCHⅡ），1 L（Lyse）+12 mL（Dye）/盒；清潔劑（CELLCLEAN），50 mL；XT-2000iV專用耗材、質控物。

1.4試驗方法SD大鼠空腹12 h后腹腔注射麻醉劑，注射量為0.5 mL/100g。SD大鼠麻醉后采用仰臥位，以翻正反射消失且無疼痛反應作為SD大鼠麻醉完畢適合采血的標準，每只大鼠用采血針從腹主動脈采集血液3 mL至EDTA抗凝管，輕輕搖動至與抗凝劑完全混合。并在2 h內用Sysmex XT-2000iV全自動動物血液分析儀和雅培CD-Ruby全自動血細胞分析儀分別測定同一份血樣的紅細胞數量（RBC）、白細胞數量（WBC）、嗜中性白細胞數量（NEUT）、淋巴細胞數量（LYMP）、單核細胞數量（MONO）、嗜酸性粒細胞數量（EOS）、嗜堿性粒細胞數量（BASO）、嗜中性粒細胞百分比（NEUT%）、淋巴細胞百分比（LYMP%）、單核細胞百分比（MONO%）、嗜酸性粒細胞百分比（EOS%）、嗜堿性粒細胞百分比（BASO%）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細胞壓積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞分布寬度（RDW）、血小板數量（PLT）和血小板分布寬度（PDW）。

1.5統計方法數據統計使用SPSS19.0統計分析軟件。試驗所得數據以均數±標準差（±s）表示，用t檢驗對結果進行分析比較。P＜0.05為差異顯著；P＜0.01為差異極顯著。

2　結果

將凝血或溶血的血液標本棄去不用后得到16只雄性和14只雌性SD大鼠血液標本，檢測結果見表1。SD大鼠的平均血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白含量、白細胞數量、單核細胞數量、單核細胞百分比、嗜堿性粒細胞數量、嗜堿性粒細胞百分比、嗜中性白細胞百分比、嗜酸性粒細胞百分比、淋巴細胞數量、淋巴細胞百分比、血小板數量、血小板分布寬度等指標，兩種儀器檢測的結果差異極顯著（P＜0.01）；血紅蛋白濃度、嗜中性白細胞數量、紅細胞分布寬度等指標差異顯著（P＜0.05）；紅細胞數量、紅細胞壓積、平均紅細胞體積、嗜酸性粒細胞數量等指標差異不顯著（P＞0.05）。結果表明，SD大鼠20項血液生理指標大部分有差異，除嗜酸性粒細胞外，白細胞和血小板指標差異顯著或極顯著，紅細胞指標差異不顯著（P＞0.05），但平均血紅蛋白含量和濃度差異極顯著（P＜0.01）。

3　討論

進行生物醫學研究的四大基本要素是實驗動物、儀器設備、信息資料和化學試劑（即Animal，E-quipment，Information and Reagent）。儀器設備作為生命科學研究四個要素之一，其檢測的數據準確與否直接影響試驗的結果。動物的血細胞形態、大小、數量和分類與人有明顯差異，不同種類動物之間的血液學特性也不相同。韓芬如［14］研究認為，隨著脊椎動物由低等向高等進化，紅細胞的數量由少增多；細胞的形態由長橢圓形、橢圓盤形、雙凹橢圓形到雙凹圓盤形；細胞體積由大變小，由有核到無核，細胞分化程度越高；白細胞的種類和血小板的數量增多。因此，不同種類動物的血液指標檢測對儀器的要求也不一樣。而采用實驗動物專用的全自動多物種動物血液分析儀、生化分析儀和配套試劑進行測定，取得的血液生理生化指標，無疑更加科學、準確和可靠。

表1　不同儀器檢測SD大鼠血液生理指標的比較（±s）

檢測結果顯示，同一血液樣品用兩種不同血細胞分析儀檢測血液常規20項指標，其中13項指標有極顯著差異，3項指標顯著差異，4項指標無差異，說明不同儀器對大鼠血液指標檢測有影響。這與汪嘉等［15］的研究結論一致，其認為在動物血細胞分類計數試驗研究時，選用具備相應動物模式的血細胞分析儀更嚴謹。血細胞分析儀是根據其檢測對象的生物學特征采用相應的設計原理、應用軟件以及配套試劑等設計制造而成的［16］。人用血細胞分析儀是針對人類的血液學特性而設計制造的，而動物血液分析儀則根據不同動物種類，設計不同動物檢測模式，在細胞分類、大小、參考值范圍等方面更符合不同種類動物血液學特征。

［1］方喜業.醫學實驗動物學［M］.l版.北京：人民衛生出版社，1995：236-237.

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［3］李厚達.實驗動物學［M］.北京：農業出版社，1992：413-420.

［4］苗明三.實驗動物和動物實驗技術［M］.1版.北京：中國中醫藥出版社，1997：336-354.

［5］鐘品紅.哺乳類實驗動物［M］.北京：人民衛生出版社，1987：403-408.

［6］Mitruka B M.Biochemical and Hematotogical Reference Values In Normal Experimental Animals［M］.Masson Publishing USA，Inc，1977.

［7］胡建武，盧勝明，車路平，等.10種常見SPF級實驗大、小鼠血液學及生化指標正常參考值的探討［J］.實驗動物科學，2007，24（2）：5-10.

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10］仉慧敏，孫淑華，胡曉燕，等.無菌大鼠血液學及血液生化指標正常參考值的測定［J］.中國比較醫學雜志，2011，21（5）：26-31.

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［12］陳穎，盧祺炯，宣堯仙.實驗動物血液學指標不同測定時間測定結果的研究［J］.中國藥理學通報，2003，19（9）：1079-1080.

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［14］韓芬如.四種實驗動物血液有形成分比較研究［J］.甘肅高師學報，2002，7（5）：51-53.

［15］汪嘉，李智，左玫，等.不同血細胞分析儀及其模式在大鼠白細胞分類計數中的比較研究［J］.檢驗醫學，2005，20（3）：201-203.

［16］顧呈華，陸羅定，趙榮.血細胞分析儀的應用及相關問題探討［J］.江蘇預防醫學，2011，22（3）：68-69.

Effects on blood physiological indexes of SD rats from different detecting instruments

Xie Jindong Yang Yanyan Lin Wei Yu Chunying Zhou Jianhua Liu Deqiang Wang Xunli*
（Laboratory Animal Center，Fujian University of Traditional Chinese Medicine，Fuzhou 350122）

Objective The purpose of the study was to investigate the level of blood physiological values for SD rats between special experimental animal blood cell analyzer and medical blood cell analyzer.Methods 200 g weight SD rats（18 male and 18 female）were chosen and fed in SPF environment，which fasted before experiment and blooded after anesthesia.The blood samples were collected and tested for physiological values using special experimental animal blood cell analyzer and medical blood cell analyzer，and the results of two groups were compared.Results There were extremely significant differences in HGB，MCH，WBC，LYMP，MONO，BASO，NEUT%，MONO%，EOS%，BASO%，LYMP%，PLT and PDW of SD rats between special experimental animal blood cell analyzer and medical blood cell analyzer（P＜0.01）.There were significant differences in MCHC，NEUT and RDW of SD rats between special experimental animal blood cell analyzer and medical blood cell analyzer（P＜0.01）.However，there were not significant differences in RBC，HCT，MCV and EOS（P＞0.05）.Conclusions Thus，the results suggested that different detecting instruments could influence some blood physiological values of SD rats.

Detecting instrument SD rats Blood physiological indexes

A

1003-4331（2016）05-0003-03

2014年福建中醫藥大學校管課題（X2014025）資助。

謝金東（1975-），男，實驗師，主要從事實驗動物飼養繁殖和動物實驗研究工作。E-mail：584233760@qq.com。

王訓立（1964-），男，研究員，主要從事實驗動物學和生殖生物學研究工作。E-mail：wangxunli@139.com。