無(wú)糖型半夏瀉心顆粒制備工藝的研究

李丹丹，楊玲玲，奉建芳，3*，唐志書(shū)

（1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西咸陽(yáng)712046；2.南京朗尼醫(yī)藥科技有限公司，江蘇南京210169；3.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西桂林541004）

無(wú)糖型半夏瀉心顆粒制備工藝的研究

李丹丹1，楊玲玲2，奉建芳2，3*，唐志書(shū)1

（1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西咸陽(yáng)712046；2.南京朗尼醫(yī)藥科技有限公司，江蘇南京210169；3.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西桂林541004）

目的優(yōu)選無(wú)糖型半夏瀉心顆粒最佳制備工藝。方法以黃芩苷、小檗堿含量和出膏率為指標(biāo)，應(yīng)用L9（34）正交設(shè)計(jì)和多指標(biāo)綜合評(píng)分法優(yōu)選無(wú)糖型半夏瀉心顆粒最佳水提取工藝；以成型性、制粒情況為指標(biāo)，考察輔料、矯味劑的種類(lèi)和配比。結(jié)果最佳提取工藝為黃連用70%乙醇提取后，藥渣與處方中其他6味藥混合，提取3次，第一次加9倍量水，煎煮1 h，第二次加8倍量水，煎煮1 h，第三次加6倍量水，煎煮0.5 h；最佳的輔料種類(lèi)和比例為浸膏粉∶糊精∶可溶性淀粉∶甜味素=1∶0.6∶0.2∶0.015，85%乙醇為潤(rùn)濕劑。結(jié)論該工藝合理可行，適宜做無(wú)糖型半夏瀉心顆粒的制備工藝。

無(wú)糖型半夏瀉心顆粒；正交實(shí)驗(yàn)；制備工藝

〔Abstract〕Objectve To optimize preparation technology of sugar-free banxia Xiexin granules.M ethods Using the content of Baicalin，berberine，and the extract yield as indexes，L9（34）orthogonal design and multi-index grading method was used to optimize the extraction process with water of sugar-free Banxia Xiexin granules.granules formability and pelletization as indexes，the types and combination ratio of accessories and corrigent were investigated.Results The best optimum extraction technology was as follows：Coptis Chinensis was extracted with 70%ethanol，residue and the other six kinds of herbs in the prescription was extracted for three times：9 times water for 2.5 h at the first time，8 times water for 1 h at the second time，6 times water for 0.5 h at the third time.The optimal ratio of extraction-dextrine-soluble starch-sweeteners was 1∶0.6∶0.2∶0.015，the wetting agent was 85%ethanol.Conclusion The process is reasonable and feasible，and it is suitable for the preparation process of sugar-free Banxia Xiexin granules.

〔Keywords〕sugar-free Banxia Xiexin granules；orthogonal experiment；preparation technology

半夏瀉心湯是《傷寒論》中治療脾胃病的經(jīng)典名方，由半夏、黃芩、黃連、干姜等7味藥組成，其功效為寒熱平調(diào)，消痞散結(jié)，臨床上用于治療急慢性胃炎、消化道潰瘍、急性胃腸炎［1-2］，現(xiàn)代研究表明其對(duì)糖尿病性胃輕癱、胃癌等有明顯的療效［3-4］。但湯劑煎煮耗時(shí)，服用麻煩，不易攜帶。為方便患者服用，本實(shí)驗(yàn)探索將其制成無(wú)糖型顆粒劑，考察提取工藝、成型工藝進(jìn)行，以確定最佳制備工藝，為其進(jìn)一步研究、生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1　材料與儀器

1.1材料

法半夏、黨參、黃芩、黃連、干姜、大棗、甘草（購(gòu)自四川新荷花飲片有限公司，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)狄留慶教授檢驗(yàn)均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2015版一部各藥材項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定）；黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)110715-201318，質(zhì)量分?jǐn)?shù)93.3%），鹽酸小檗堿對(duì)照品（批號(hào)110713-201212，質(zhì)量分?jǐn)?shù)86.7%），均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈非常可樂(lè)飲料有限公司），色譜用試劑為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2儀器

島津LC-2100液相色譜儀（日本島津）；BUCHI B-290小型噴霧干燥機(jī)（瑞士布奇公司）；電子分析天平［賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司，型號(hào)：BSA124S］；電熱真空干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司，型號(hào)：ZK82J）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司，型號(hào)：XMTE-6508）。

2　方法與結(jié)果

2.1鹽酸小檗堿含量的測(cè)定［5］875

2.1.1色譜條件Kromasil C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈：0.05%的磷酸二氫鉀溶液=50∶50，每100 mL中加0.4 g十二烷基硫酸鈉，以磷酸調(diào)節(jié)pH至4，檢測(cè)波長(zhǎng)345 nm，柱溫為25℃，流速為1 mL/min。

2.1.2鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取鹽酸小檗堿對(duì)照品9.8 mg，加甲醇溶解定容至25 mL，搖勻，即得。

2.1.3供試品溶液的制備精密稱(chēng)取樣品約2 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-鹽酸（100∶1）的混合溶液50 mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲30 min，放冷，再稱(chēng)定重量，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過(guò)濾，取濾液2 mL置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，即得。

2.1.4樣品含量測(cè)定精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液分別5μL和20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算小檗堿的含量。色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2黃芩苷含量的測(cè)定［5］301

2.2.1色譜條件Kromasil C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為甲醇∶水∶磷酸=47∶53∶0.2，檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm，柱溫為25℃，流速為1 mL/min。

2.2.2黃芩苷對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取黃芩苷對(duì)照品9.1 mg，加甲醇溶解并定容至25 mL，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

圖1　小檗堿對(duì)照品（A）和供試品（B）的HPLC色譜圖

2.2.3供試品溶液的制備精密稱(chēng)取樣品約2 g，加入70%乙醇40 mL，加熱回流3 h，過(guò)濾至100 mL棕色容量瓶中，用70%乙醇洗滌容器，洗滌液過(guò)濾至容量瓶中，并定容至100 mL。取1 mL于10 mL棕色容量瓶中，加流動(dòng)相定容至10 mL，即得。

2.2.4樣品含量測(cè)定精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液分別5μL和20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算黃芩苷的含量。色譜圖如圖2所示。

圖2　黃芩苷對(duì)照品（A）和供試品（B）的HPLC色譜圖

2.3提取工藝的優(yōu)化

在預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，黃連用水提取，小檗堿含量較低，用70%乙醇提取黃連，能得到較高含量的小檗堿。根據(jù)文獻(xiàn)［6-8］，小檗堿是抗炎活性的主要成分，所以設(shè)計(jì)按處方比例稱(chēng)取各藥味，用10倍量70%乙醇提取黃連，藥渣與剩余6味藥混合，以粉碎度、加水量、煎煮時(shí)間和提取次數(shù)為變量，設(shè)計(jì)四因素三水平實(shí)驗(yàn)。見(jiàn)表1。

表1　正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

測(cè)定多指標(biāo)成分，運(yùn)用綜合加權(quán)評(píng)分法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，設(shè)定總分100分，浸膏率（浸膏重/相應(yīng)比例原藥材重）40分，小檗堿、黃芩苷各為30分，利用綜合評(píng)分值（Pj）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析：以Mij表示第i次實(shí)驗(yàn)中第j個(gè)指標(biāo)成分的測(cè)定值，以各指標(biāo)的最大值作為參照對(duì)同一指標(biāo)各數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，Dij表示第j個(gè)指標(biāo)成分下的第i個(gè)測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)。即Pi=40×Dij1+30×Dij2+30×Dij3（i= 1，2，3…9），結(jié)果見(jiàn)表2-3。

由表2極差值可知，影響因素C＞B＞A＞D，即提取次數(shù)＞加水量＞粉碎度＞煎煮時(shí)間。方差分析表明因素B和C具有顯著性影響，因此最佳提取工藝為A3B3C3D2，即直接用飲片提取3次，加23倍水，煎煮2.5 h，第一次加9倍量水，煎煮1 h，第二次加8倍量水，煎煮1 h，第三次加6倍量水，煎煮0.5 h。

表2　正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3　方差分析

2.4提取工藝驗(yàn)證

按正交實(shí)驗(yàn)得到的最佳提取工藝重復(fù)試驗(yàn)3次，濾液濃縮至相對(duì)密度1.05時(shí)，取樣進(jìn)行浸膏率及指標(biāo)成分的含量測(cè)定。由表4結(jié)果分析，正交實(shí)驗(yàn)得到的工藝穩(wěn)定，合理可行。

2.5成型工藝研究

表4　工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)（n=3）

2.5.1成型輔料考察稱(chēng)取浸膏粉、可溶性淀粉、糊精、甘露醇，按表5混合均勻，以85%乙醇為潤(rùn)濕劑制成軟材，60℃真空干燥至顆粒含水分≤6%，將能過(guò)10目篩且不能過(guò)80目篩的顆粒稱(chēng)定質(zhì)量，計(jì)算成品率，成品率＝顆粒質(zhì)量/總干粉質(zhì)量。

溶化性按照2015版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)要求測(cè)定，最適宜的輔料種類(lèi)和用量為浸膏粉：糊精：可溶性淀粉=1∶0.6∶0.2，結(jié)果如表5。

2.5.2矯味劑的考察將浸膏、糊精、淀粉以1∶0.6∶0.2的比例混合后，加入不同比例的羅漢果甜苷，木糖醇和甜味素，以85%乙醇為潤(rùn)濕劑制粒，過(guò)40目篩，得濕顆粒，60℃真空干燥，用60目篩和80目篩整粒，溶化，品嘗味道，結(jié)果以1.5%的甜味素為矯味劑時(shí)矯味效果最好，故選擇1.5%的甜味素為矯味劑。

表5　不同配比輔料的考察結(jié)果

2.5.3休止角的測(cè)定采用固定漏斗法［9］，計(jì)算休止角α（tgα＝H/R，H為藥粉圓錐體高度，R為藥粉圓錐體高度直徑），制三組裝置，每組裝置測(cè)定三次，結(jié)果休止角α均＜30°，表明流動(dòng)性良好，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6　休止角的測(cè)定結(jié)果（n=3）

2.5.4測(cè)定吸濕率［10］精密稱(chēng)取6份干燥至恒重的顆粒2 g，平鋪于干燥至恒重的稱(chēng)量瓶中，精密稱(chēng)定，打開(kāi)瓶蓋，分別置于底部盛有54%硫酸、48%硫酸、44%硫酸、飽和溴化鈉溶液、飽和氯化鈉溶液、飽和氯化鉀溶液的干燥器中，25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫7 d后，稱(chēng)量，計(jì)算吸濕百分率（%）。以相對(duì)濕度為橫坐標(biāo)、吸濕百分率為縱坐標(biāo)繪制曲線，做曲線兩端切線，兩切線交點(diǎn)對(duì)應(yīng)橫坐標(biāo)的值即為該顆粒的臨界相對(duì)濕度，結(jié)果見(jiàn)圖3，在25℃時(shí)，顆粒的相對(duì)濕度為54%，所以，本制劑生產(chǎn)、包裝、貯藏時(shí)，環(huán)境溫度應(yīng)控制在54%以下，以減少水分對(duì)藥物性質(zhì)及穩(wěn)定性的影響。

圖3　半夏瀉心顆粒的臨界相對(duì)濕度

3　討論

本實(shí)驗(yàn)在探究提取工藝時(shí)，根據(jù)中藥多成分、多靶點(diǎn)發(fā)揮藥效的特點(diǎn)，選取多個(gè)成分含量作為指標(biāo)，且把影響制劑的浸膏率也作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。且在分析正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，根據(jù)中藥復(fù)方君臣佐使來(lái)設(shè)定加權(quán)評(píng)分的比重，從而使得到的提取工藝更合理可行。

實(shí)驗(yàn)選擇幾種輔料以不同的配比來(lái)考察制粒情況，浸膏粉∶糊精∶可溶性淀粉=1∶0.6∶0.2時(shí)，制得的顆粒符合2015版《中華人民共和國(guó)藥典》附錄中顆粒劑的有關(guān)要求。且按照原處方量稱(chēng)取藥材，經(jīng)提取、濃縮、干燥，浸膏率為24.3%，浸膏粉∶糊精∶淀粉∶甜菊素=1∶0.6∶0.2∶0.015的比例制成顆粒，每次服用顆粒量10 g，服用量適中，可以滿足患者的順應(yīng)性。

本方中含黃連，苦味較重，本實(shí)驗(yàn)考察了不同比例的羅漢果甜苷、木糖醇、甜菊素，當(dāng)加入0.02倍的羅漢果甜苷時(shí)，雖然可以掩蓋其苦味，但是后味比較重，故選擇0.015倍的甜味素為矯味劑。

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（本文編輯蘇維）

Study on Preparation Technology of Sugar-Free Banxia Xiexin Granules

LI Dandan1，YANG Lingling2，F(xiàn)ENG Jianfang2，3*，TANG Zhishu1
（1.Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang，Shanxi 712046，China；2.Nanjing Lang-ni Pharmaceutical Co Ltd，Nanjing，Jiangsu 210023，China；3.Gulin Medical University，Guilin，Guangxi 541004，China）

R283.6；R284

A

doi：10.3969/j.issn.1674－070X.2016.06.014

2016-02-24

李丹丹，女，在讀碩士研究生，研究方向：中藥藥劑。

*奉建芳，男，博士，研究員，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：jf-feng66@yahoo.com。