硫酸慶大霉素中RNA和DNA的檢查

楊帆夏云空劉曉薇席德慧

（1.四川大學生命科學學院 四川成都 610042； 2.成都蓉生藥業有限責任公司 四川成都 61000）

硫酸慶大霉素中RNA和DNA的檢查

楊帆1，2夏云空2劉曉薇2席德慧1

（1.四川大學生命科學學院 四川成都 610042； 2.成都蓉生藥業有限責任公司 四川成都 61000）

目的 為檢查硫酸慶大霉素中的RNA與DNA，方法 先用凝膠柱色譜法分離出RNA與DNA，再采用改良苔黑酚法檢查RNA，采用二苯胺法檢查DNA。結果 RNA在1～20μg范圍內，吸光度與濃度線性回歸的相關系數r=0.9993，檢測限和定量限分別為0.28μg和0.85μg，平均回收率為96.1%；DNA在5～200μg范圍內，吸光度與濃度線性回歸的相關系數r=0.9995，檢測限和定量限分別為2.8μg和6.3μg，平均回收率為93.3%。結論 所建立的方法專屬、靈敏、準確，可用于硫酸慶大霉素中RNA 和DNA的檢查。

硫酸慶大霉素 RNA DNA 凝膠柱色譜法 改良苔黑酚法 二苯胺法

1 實驗部分

1.1 儀器與試藥

UV-1800PC 紫外-可見分光光度計（上海MAPADA）；

RNA對照品（酵母核糖核酸，中國科學院上海生物化學研究所，含磷量大于7.0%）；

DNA對照品（小牛胸腺DNA，XIASI BIO公司生產）；

葡聚糖凝膠（Sephadex G-50）；

其他試劑均為分析純。

1.2 方法與結果

1.2.1 RNA的檢查

采用改良苔黑酚法檢查本品中的RNA。改良苔黑酚法是利用RNA與鹽酸共熱，發生降解并生成糖醛，在銅離子的催化下，糖醛可與苔黑酚（3，5-二羥基甲苯）反應，生成綠色產物，在670nm有最大吸收，采用比色法測定［2］。由于硫酸慶大霉素對檢查有干擾，采用凝膠柱色譜法分離出RNA后，再進行檢查。

1.2.1.1 測定方法

苔黑酚銅離子試液的配制：

試液A：稱取苔黑酚5.0g，，溶解于10ml 95%的乙醇中，搖勻；

試液B：稱取氯化銅0.15g，溶解于100ml濃鹽酸中，搖勻；……