顱腦外傷患者腦脊液及血液中白細胞介素-6的表達分析

劉愛平

顱腦外傷患者腦脊液及血液中白細胞介素-6的表達分析

劉愛平

目的 探討顱腦外傷患者腦脊液和血液中白細胞介素-6（IL-6）的表達情況。方法 選取2015年1—12月遼寧省大連市旅順口區中醫院收治的36例顱腦損傷患者作為研究對象，根據格拉斯哥昏迷評分法（GCS）分為A組（中輕型顱腦損傷）GCS≤8分16例，B組（重型顱腦損傷）GCS＞8分20例。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測所有患者腦脊液和血液中IL-6水平。結果 兩組患者腦脊液中IL-6水平均明顯高于血清組，且B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；在損傷發生第1天內，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達最高濃度，1周左右開始下降，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。結論 在臨床上，可以通過動態監測腦脊液中IL-6水平，來了解顱腦損傷的嚴重程度，以此作為參考來對病情進行判斷，以便更加科學、合理的實施治療，改善患者預后。

顱腦損傷；腦脊液；血清；白細胞介素-6

顱腦外傷是一種常見的神經外科疾病，可對患者生命安全造成嚴重威脅，致殘率和致死率均較高，這主要是因為在顱腦外傷出現后，易出現繼發性腦損傷，其病理過程非常復雜，已成為目前臨床研究的難題。曾有研究［1］指出，急性顱腦損傷發病后，將會導致腦出血、腦缺血，在損傷的影響下，一些炎性介質會被釋放，細胞因子會參與至炎性反應中，最后導致繼發性損傷出現。目前，有不少針對顱腦外傷的研究［2-3］均將重點集中于白細胞介素-6（IL-6）的表達，認為顱腦外傷的生理和病理發展均與IL-6存在直接關系，通過檢測IL-6水平可以為顱腦外傷的診斷和治療提供一定指導，其對提高治療效果、改善患者預后具有重要意義。顱腦損傷后中樞神經會產生大量細胞因子，IL-6作為一種細胞因子，具有較為廣泛的免疫調節能力，可明顯影響人的集體防御能力，在感染、炎癥、損傷等方面起到積極作用。在顱腦外傷中，其有助于損傷修復，能夠促進神經元生存、分化，刺激神經營養因子生成，促進星形膠質細胞增生。本研究就顱腦外傷患者腦脊液和血液中IL-6的表達情況進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1—12月我院收治的36例顱腦損傷患者作為研究對象，其中男28例，女8例，平均年齡（39.3±2.6）歲，根據格拉斯哥昏迷評分法（GCS）分為A組（中輕型顱腦損傷）GCS≤8分16例，B組（重型顱腦損傷）GCS＞8分20例。所有患者均符合本院醫學倫理委員會相關要求，均簽署了知情同意書。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1儀器 低速離心機LD5-1OB（北京醫用離心機廠）；微量移液器SOCOREX（常州東譜科學儀器有限公司）；洗板機TECAN COLUMBUS PLUS（天津開元生物工程儀器有限公司）；電熱恒溫水溫箱HW1（深圳杰特電子有限公司）；酶標儀TECAN SUNRISE（瑞士TECAN集團公司）。

1.2.2標本采集 采集所有患者入院后8 h、24 h、48 h、72 h、1周腦脊液約2 ml，同時采集靜脈血2 ml，置試管混勻，4 ℃下以每分鐘3000 r，離心10 min，離心半徑為10 cm，分離血清，-40 ℃保存待測。

1.2.3檢測方法 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測患者IL-6水平，ELISA試劑盒（美國Biosource公司），具體過程：設標準孔8孔，每孔中加入樣品稀釋液100 μl，第1孔加標準品100 μl，混勻后加樣器吸出100 μl移至第2孔。如此反復對倍稀釋至第7孔，最后，從第7孔中吸出100 μl棄取，使之體積為100 μl。第8孔為空白對照。待測品孔每孔各加入待測樣品100 μl；將反應板充分混勻后置于37 ℃水浴中120 min；用洗滌液將反應板充分洗滌4～6次，向濾紙上印干；每孔加第1抗體工作液50 μl；將反應板充分混勻后置37 ℃水浴中60 min；洗板方法同前；每孔加酶標抗體工作液100 μl；將反應板置于37 ℃水浴中60 min；洗板方法同前；每孔加入底物工作液100 μl，置37 ℃暗處反應5～10 min；每孔加入1滴終止液混勻；在492 nm處測吸光值。

1.3統計學分析 采用SPSS 11.5統計軟件進行數據分析，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1腦脊液及血清IL-6水平比較 兩組患者腦脊液中IL-6水平均明顯高于血清組，且B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；兩組患者血清中IL-6水平差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1　兩組患者腦脊液及血清IL-6水平比較（pg/ml±s）

表1　兩組患者腦脊液及血清IL-6水平比較（pg/ml±s）

注：與血清水平比較，*P＜0.05；與A組比較，#P＜0.05

組別 例數 腦脊液IL-6 血清IL-6 A組 16 386±125*90±64 B組 20 694±195*#94±74

2.2腦脊液及血清中IL-6動態變化比較 在損傷發生第1天內，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達最高濃度，1周左右開始下降，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2　兩組患者腦脊液及血清中IL-6動態變化比較（pg/ml±s）

表2　兩組患者腦脊液及血清中IL-6動態變化比較（pg/ml±s）

注：與A組比較，*P＜0.05

組別 例數 8 h 24 h 48 h 72 h 1周腦脊液IL-6 A組 16 386±125 406±117 583±136 670±110510±115 B組 20 694±195*724±183*826±148*964±105*818±117*組別 例數 8 h 24 h 48 h 72 h 1周血清IL-6 A組 16 90±64 121±51 156±62 187±7391±51 B組 20 94±74 123±62 170±72 183±5092±63

3 討論

隨著社會生活環境的改變，顱腦外傷已經成為了一種高發疾病，不論是車禍、跌倒、鈍物打擊等，均有可能造成顱腦外傷。而顱腦外傷與IL-6密切相關，通過對IL-6的檢測可以為顱腦外傷的診斷、治療提供一定指導。

IL-6與人體中各種細胞均存在關系，其與免疫炎性反應具有直接聯系。在人體急性炎性反應早期，IL-6細胞因子水平便會顯著升高，可以作為一種炎性反應觀察指標，它比C反應蛋白的靈敏性更高［4］。正常情況下腦組織IL-6的表達量較低，血清中通常不能檢測到IL-6［5］，但腦組織創傷后，IL-6的表達量會明顯增加［6］。本研究結果顯示，腦脊液和血清中IL-6水平均有所升高，可能與受損后局部腦組織產生更多IL-6有關，但也有可能與全身應激反應相關，因為人體全身應激反應也會導致IL-6產生［7］。此外，顱腦損傷患者腦脊液中IL-6增高水平明顯高于血清中IL-6的增高水平。說明血清與腦脊液在損傷后的表達水平不平行［8］，與神經損傷以及局部腦組織繼發炎性反應有直接關系［9］。

本研究中，B組患者腦脊液中IL-6水平明顯高于A組。提示IL-6與顱腦損傷程度呈正相關，即IL-6越高，損傷情況越嚴重。另外，在損傷發生第1天內，兩組患者腦脊液和血液中的IL-6水平便開始升高，在72 h達最高濃度，1周左右開始下降，與張永和等［10］的研究結論相似。

綜上所述，在顱腦外傷的病理和生理變化過程中，IL-6始終參與其中，所以在臨床上，可以通過對腦脊液IL-6水平的動態監測，來了解顱腦損傷的程度和炎性反應程度，以此作為參考來對病情進行判斷，以便更加科學、合理的實施治療，改善患者預后。

［1］ T Hirano，S Akira，T Taga，et al.Biological and clinical aspects of IL-6［J］.Immunology Today，1991，11（12）:443-449.

［2］ 金鈞，楊學照，鮑耀東.顱腦損傷后腦脊液與血清中IL-6含量變化研究［J］.蘇州醫學院學報（醫學版），1999，19（8）:868-869.

［3］ 戴茹娟，李紹英，王嗣欣，等.多發性硬化患者血清和腦脊液中白細胞介素-6的變化及其意義［J］.中國神經免疫學和神經病學雜志，1997，4（1）:36-39.

［4］ 肖嵐.白介素-6與腦缺血損傷［J］.國外醫學（神經病學·神經外科學分冊），2000，27（5）:258-261.

［5］ KossmannT，HansVH，Imhof HG，et al.Intrathecal and serum interleukin-6 and the acute-phase response in patients with severe traumatic brain injuries［J］.Shock，1995，4（5）:311-317.

［6］ 劉美萍，劉志輝.腦梗死患者腦脊液中白細胞介素-6檢測的臨床價值［J］.卒中與神經疾病，2002，9（6）:345-346.

［7］ 李介華，徐輝，馮建容，等.中樞神經系統疾病腦脊液中IL-6的表達與意義［J］.中國誤診學雜志，2002，2（1）:23-25.

［8］ Mathiestn T，Aindersson B，lofterins A，et al.Increased interleukin-6 levels in cerebrospinal fluid following subarachnoid hemorrhage［J］. Journal of Neurosurgery，1993，78（4）:562-567.

［9］ 季衛陽，魯曉杰，黃長銘，等.顱腦損傷后早期腦脊液和血清IL-6水平的變化及意義［J］.南通醫學院學報，2001，21（1）:41，43.

［10］ 張永和，裘輝，趙寧.顱腦損傷后急性期腦脊液中IL-6和TNF-α的測定及其臨床意義［J］.中國急救醫學，2001，21（6）:328-329.

R651.1+5

A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.10.053

遼寧省大連市旅順口區中醫院，遼寧大連 116041