海帶多糖及其純化組分的膽酸鹽吸附能力及抗氧化活性

王智榮，崔 春*，林宗毅，黃俊偉

海帶多糖及其純化組分的膽酸鹽吸附能力及抗氧化活性

王智榮，崔 春*，林宗毅，黃俊偉

（華南理工大學輕工與食品學院，廣東 廣州 510640）

采用pH 2的檸檬酸溶液提取海帶中的多糖，將海帶多糖（polysaccharide from Laminaria japonica，LPA-P）通過Sevag法除蛋白、透析除鹽處理、離子交換柱處理，分離純化得到3 種多糖組分LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3，探討了海帶多糖的分子質量、硫酸基含量、單糖組成與其抗氧化能力和膽酸鹽吸附能力的內在聯系。結果表明：LPA-P及其純化組分均含有硫酸基，且LPA-P3最多為5.36%，LPA-P1最少為1.22%；海帶多糖及其純化組分的單糖組成均以巖藻糖、半乳糖和甘露糖為主，其中LPA-P和LPA-P3主要的單糖為半乳糖，而LPA-P1和LPA-P2主要的單糖為甘露糖，海帶多糖LPA-P3中巖藻糖含量最高；海帶多糖LPA-P、LPA-P1、LPA-P2和LPA-P3的平均分子質量為20.13、17.55、28.71、17.14 kD。海帶多糖的氧自由基吸收能力和2,2’-聯氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽自由基（2,2’-azinobis (3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid) ammonium salt radical，ABTS+·）清除能力從大到小依次為LPA-P3＞LPA-P＞LPA-P2＞LPA-P1；LPA-P3具有最強的膽酸鹽吸附能力，LPA-P和LPA-P2次之且無顯著性差異，LPA-P1基本不具有膽酸鹽吸附能力。結合LPA-P及其純化組分的結構特性，推測高硫酸基含量、主要單糖組成為巖藻糖和半乳糖的海帶多糖具有更強的膽酸鹽吸附能力及抗氧化活性。

海帶；多糖；膽酸鹽吸附能力；抗氧化活性

海帶屬于褐藻門海帶目海帶科海帶屬的一種大型海藻，是一種重要的經濟海藻[1-2]。我國在很早之前就有食用海帶的歷史，并將海帶作為中藥入藥。隨著藥理學、營養學的發展，海帶越來越多的生物活性被發現，如：降血糖、抗動脈硬化、抗凝血、抗腫瘤調節免疫等[3-6]，研究發現，海帶多糖（polysaccharide from Laminaria japonica，LPA-P）是海帶具有多種多樣的生理活性的物質基礎。

LPA-P是存在于海帶細胞間和細胞內的一類生物大分子，其生物活性與結構特征密切相關[7]。膽酸鹽是一類具有甾核結構的兩性大分子，對人體脂肪和膽固醇的消化吸收和脂溶性維生素的代謝起重要作用，它由肝臟的膽固醇形成，并會重吸收進入肝臟形成膽固醇，從而形成膽固醇的膽肝循環。因此，減少腸道內的膽酸鹽對降血脂有著重要作用[8-10]。活性物質的活性評價方法多為其對膽酸鹽吸附作用的測定，其中膽酸鹽多采用膽酸鈉、脫氧膽酸鈉和牛磺膽酸鈉，其中牛磺膽酸鈉最為難以被吸附，膽酸鹽濃度的測定，一般采用紫外吸收法以及糠醛硫酸法[11]。本課題組盧茳虹等[12-13]前期研究了響應面法優化檸檬酸法從海帶渣中提取LPA-P的方法，并研究了其抗氧化活性。Zhao Xue等[14]利用酸水解和快速降解的方法制備LPA-P，并研究了分子質量對抗氧化活性的影響，發現分子質量更小的LPA-P，在清除超氧陰離子自由基（O2－·）的抗氧化能力上有著更好的表現。Saha等[15]發現LPA-P的硫酸基含量越高的組分具有更強的抗病毒活性和抗氧化能力。在此基礎上，本實驗采用檸檬酸提取海帶中的多糖，通過除蛋白、透析除鹽、離子交換柱等分離方法得到成分較為均一的LPA-P組分，研究了LPA-P分子質量、硫酸基含量、單糖組成等，并結合其抗氧化能力和膽酸鹽吸附能力探究LPA-P生物活性與結構特征的聯系，以期為海帶的綜合利用和深加工提供理論指導。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

海帶，采購于山東省煙臺，采收于九月，清洗后曬干，粉碎過40 目篩，置于干燥器中貯存備用。

無水乙醇、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鹽酸羥胺、K2S2O8、糠醛、氫氧化鈉、氫氧化鉀 廣州市金華大化學試劑有限公司；鹽酸、濃硫酸、二甲基亞砜 江蘇強盛功能化學股份有限公司；吡啶、氯仿、碘甲烷、正丁醇、二氯甲烷 天津市大茂化學試劑廠；Trolox、2,2’-聯氮雙（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)，ABTS）、熒光素鈉鹽（fluorescein sodium，FL） 美國Sigma公司；二乙氨乙基（diethylaminoethyl，DEAE）美國GE公司；色譜級甲醇 北京迪馬科技有限公司；其他試劑均為國產分析純。

1.2 儀器與設備

酶標儀 美國Thermo公司；7890A氣相色譜儀 美國Agilent公司；高效凝膠滲透色譜儀 美國Waters公司；ALPHA1-4冷凍干燥機 德國Christ公司；GL-21M高速冷凍離心機 長沙湘儀離心機儀器有限公司；RE-52AA旋轉蒸發儀 上海亞榮生化儀器廠；Unico UV-2000型紫外-可見分光光度計 尤尼柯（上海）儀器有限公司；數顯恒溫水浴鍋 江陰市保利科研器械有限公司。

1.3 方法

1.3.1 粗多糖提取流程

海帶干粉→檸檬酸提取（pH 2的檸檬酸溶液（1∶30，m/V），溫度120 ℃，時間3 h）→取上清液，用氫氧化鉀調pH值至中性→濃縮→醇沉（乙醇最終體積分數為80%）→4 ℃條件下靜置8 h→取沉淀物→復溶沉淀物→海帶粗多糖

1.3.2 Sevag法除蛋白

參考Navarini等[16]的方法。以5∶1（V/V）配制氯仿-正丁醇溶液（Sevag試劑），保存以備用。取海帶粗多糖溶液，加入多糖溶液1/5體積的Sevag試劑，室溫條件下振蕩反應30 min。充分反應后離心取上清液，重復上述步驟5～6 次直到不再出現沉淀或極少沉淀。除蛋白后的多糖溶液使用乙醇醇沉，使乙醇最終體積分數為80%，在0～4 ℃條件下靜置8～12 h，離心取沉淀，并溶于蒸餾水，得除蛋白多糖的溶液。

1.3.3 透析法除鹽

選取截留量為800～1 400 D的透析袋，將除蛋白多糖溶液置于透析袋中，用去離子水透析72 h，每隔約4 h換水一次。透析完成后樣品溶液用旋轉蒸發儀濃縮至適合體積，冷凍干燥得多糖固體。

1.3.4 LPA-P的柱層析分離

采用規格為2.6 cm×20 cm的玻璃柱，用DEAE填料裝柱，用0.2 mol/L的NaOH溶液沖洗40 min，1 mol/L的NaCl溶液沖洗60 min，最后用去離子水沖洗填料至中性。分別配制0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mol/L濃度的NaCl溶液保存以備用，取0.8 g LPA-P固體溶于去離子水，并將樣品上柱，每個濃度洗脫3～10 個柱體積，洗脫流速為5 mL/min，每試管收集5 mL的洗脫液。根據每管洗脫液的多糖含量，以洗脫管數為橫坐標，多糖測定的吸光度為縱坐標，繪制洗脫曲線。收集不同組分樣品，把不同濃度NaCl溶液洗脫下來的洗脫液分別收集，濃縮，通過透析除去NaCl，冷凍干燥，獲得LPA-P1、LPA-P2和LPA-P3。

1.3.5 LPA-P硫酸基含量的測定

采用硫酸鋇比濁法[17]測定。

1.3.6 LPA-P單糖組成的測定

參照文獻[18]中的方法測定LPA-P中的單糖組成。

1.3.7 氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity，ORAC）值測定

參照Huang Wuyang等[19]的方法并加以改進。熒光素鈉鹽（fluorescein sodium，FL）、自由基產生劑2,2’-偶氮二（2-甲基丙基咪）二鹽酸鹽）（2,2’-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride，AAPH）、標準抗氧化物質VE水溶性類似物（Trolox）以及待測樣品均用75 mmol/L pH 7.4的磷酸鹽緩沖液溶解稀釋。在96 孔板各個微孔中依次加入緩沖溶液、樣品、70 nmol/L FL各20 μL后，在37 ℃條件下放置15 min，之后迅速在各孔中加入12.8 mmol/L AAPH 140 μL后運行程序，在37 ℃條件下以激發波長485 nm、發射波長538 nm進行連續測定，每2 min測定一次各孔熒光強度，測定120 min，熒光強度分別記為f0、f1、f2f60。將各個微孔不同時間記錄下的絕對熒光強度數據fi與初始的熒光強度f0作比，折算成相對熒光強度，并按照下式計算曲線下面積（area under the curve，AUC）值：

再根據公式（2），分別計算不同濃度下（0～100 μmol/L）Trolox和LPA-P的Net AUC值：

式中：AUC空白為沒有抗氧化劑存在時自由基作用對照的AUC值。

以Net AUC值為縱坐標，Trolox濃度為橫坐標建立直線回歸方程，根據回歸方程計算LPA-P的ORAC值。

1.3.8 ABTS+·清除能力的測定[20]

將等量混合的14 mmol/L ABTS水溶液和4.9 mmol/L K2S2O8水溶液，在室溫避光條件下靜置12～16 h以制備ABTS+·儲備液。測定時，用50%乙醇溶液稀釋ABTS，使其在734 nm波長處的吸光度在0.70±0.02范圍內，形成ABTS+·測定液。將0.1 mL樣品用ABTS+·測定液稀釋至3 mL，振蕩30 s，在30 ℃條件下反應20 min后在734 nm波長處測定吸光度Ai。對照組A0是以0.1 mL水作同樣處理。

1.3.9 多糖膽酸鹽吸附率的測定

參照周小理等[21]的方法，并做一定修改。配制質量濃度為0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mg/mL的膽酸鹽標準溶液，移取樣液（或各不同質量濃度的膽酸鹽標準溶液）1 mL于具塞試管中，加入6 mL體積分數為45%的硫酸，混勻，加入1 mL體積分數為0.3%的糠醛，混勻，置65 ℃恒溫水浴中反應30 min，冷卻至室溫后，于620 nm波長處測定吸光度，繪制標準曲線。

配制4 mg/mL牛磺膽酸鈉溶液，加入2 mg/mL的多糖樣品，以蒸餾水作為空白對照，于37 ℃恒溫下反應1 h后，5 000 r/min離心分離10 min。準確移取1 mL上清液，于620 nm波長處測定吸光度，由標準曲線確定其膽酸鹽的質量濃度。再根據添加多糖樣品及空白溶液中膽酸鹽的濃度差計算多糖對膽酸鹽的吸附量。

2 結果與分析

2.1 LPA-P的DEAE柱分離

圖1 海帶多糖洗脫曲線Fig.1 DEAE-Sepharose fast flow chromatogram of LPA-P

如圖1所示，LPA-P經過DEAE柱吸附后，在0.1、0.2、0.3 mol/L NaCl的洗脫濃度下得到3 個明顯的峰形，在0、0.4、0.5 mol/L NaCl的洗脫濃度下峰面積較小。分別對0.1、0.2、0.3 mol/L NaCl的洗脫濃度進行收集，經過透析脫鹽，冷凍干燥后得到海帶多糖LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3這3 個組分。

2.2 LPA-P各組分硫酸基含量

表1 LPA-P及其純化組分硫酸基含量Table 1 Contents of sulfated group in LPA-P and its fractions

由表1可知，隨著洗脫液鹽濃度的增大，LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3這3 個組分的硫酸基含量依次增高，這可能是因為DEAE作為一種陰離子交換填料，可以分離帶電荷的多糖[22]，因此，隨著洗脫液鹽濃度的增大，多糖酸性強度也不斷增大，所以表現出更高的硫酸基含量。

Wang Jing[23]和Saha[15]等的研究表明，硫酸基含量與多糖抗氧化活性成正比，且與抗病毒等生物活性密切相關，因此可推測LPA-P3組分具有更強抗氧化性和生物活性。3 個分離純化組分中，存在1 個組分LPA-P1的硫酸基含量低于海帶粗多糖，而Saha等[15]從海帶粗多糖中分離純化出的3 個組分，其硫酸基含量均高于海帶粗多糖，這可能是因為所采用的提取方法不同。

2.3 LPA-P各組分的單糖組成

LPA-P及其純化組分各個單糖成分在氣相色譜柱中分離效果良好，通過峰面積和內標峰面積的比和標準品實驗繪制的標準曲線即可計算出LPA-P及其純化組分的單糖組成。

表2 LPA-P及其純化組分單糖組成Table 2 Monosaccharide composition of LPA-P and its fractions

由表2可知，4 個組分均含有較為常見的6 種單糖，分別為鼠李糖、木糖、巖藻糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖，但鼠李糖、葡萄糖和木糖的含量非常少，而含有大量的半乳糖、甘露糖和巖藻糖，其中LPA-P和LPA-P3的半乳糖含量占最大部分，LPA-P1和LPA-P2則是甘露糖含量最高。

半乳糖和巖藻糖是褐藻多糖中較為常見的單糖，也是巖藻多糖的主要單糖組成，而巖藻糖多糖已被報道具有較強的生物活性，其中包括抗血凝、抗氧化和抗病毒等[24]。Wang Jing等[23]的研究中也發現半乳糖含量更高組分的殺菌及抗氧化能力更強。LPA-P3組分的巖藻糖及半乳糖含量在4 個組分中最高，可推測LPA-P3具有更強的抗氧化性和生物活性。Saha等[15]研究發現狹葉海帶粗多糖及其分離純化出的3 個組分中單糖組成均以巖藻糖為主，且其含量遠遠高于其他單糖，單糖組成上的差異可能是因為海帶的品種不同。

2.4 LPA-P各組分分子質量分布

多糖的分子質量具有相對性，通常所測定的分子質量只是一種統計平均值，代表相似鏈長的平均值。采用凝膠滲透色譜法對經過分離純化后的LPA-P、LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3的分子質量進行測定，結果如圖2所示。可看出LPA-P也是單峰，但峰形較寬且不太對稱，LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3形成了峰形對稱均勻的單峰，說明分離純化取得了較好的效果。

圖2 LPA-P（a）、LPA-P1（b）、LPA-P2（c）、LPA-P3（d）的分子質量分布Fig.2 Molecular weights of LPA-P (a), LPA-P1 (b), LPA-P2 (c), and LPA-P3 (d)

由圖2a可知，LPA-P的平均分子質量為20.13 kD，與傳統水提法得到的多糖平均分子質量有了顯著的下降，且各純化組分與粗多糖的分子質量相差不大，說明檸檬酸法提取海帶多糖能有效地把多糖大分子水解成分子質量更小的多糖，其中LPA-P3平均分子質量最小，為17.14 kD。Zhao Xue等[14]利用酸水解和快速降解的方法制備海帶多糖，并研究了分子質量對抗氧化活性的影響，其結果表明分子質量更小的LPA-P，在清除超氧陰離子自由基的抗氧化能力上有著更好的表現。一般認為分子質量更小的多糖成分中的有效部分更容易與發生反應的配體相接觸，從而使其活性更強；其次分子質量更小的多糖成分更容易透過組織細胞到達產生活性的部位，從而使其活性加強。那么可推測LPA-P3組分會具有更好的抗氧化能力及生物活性。

2.5 LPA-P各組分抗氧化活性研究

2.5.1 LPA-P氧自由基吸收能力

圖3 LPA-P及其純化組分的氧自由基吸收能力Fig.3 Oxygen radical absorbance capacity of LPA-P and its fractions

由圖3可知，LPA-P與其分離純化后組分的氧自由基吸收能力有了顯著性差異。其中LPA-P3的ORAC值最高，達到650.93 μmol Trolox/g，比LPA-P組分的341.87 μmol Trolox/g提高了將近1 倍，是LPA-P2的近3 倍。而LPA-P1的氧自由基吸收能力則非常差，只有37.22 μmol Trolox/g。

2.5.2 LPA-P的ABTS+·清除能力

圖4 LPA-P及其純化組分的ABBTTSS＋·清除能力Fig.4 ABTS radical scavenging activity of LPA-P and its fractions

由圖4可知，LPA-P各組分的ABTS+·清除能力由大到小依次為LPA-P3＞LPA-P＞LPA-P2＞LPA-P1，且均呈量效關系，隨多糖質量濃度的上升而增強。在各個質量濃度下，LPA-P3均表現出比LPA-P及其他2個組分更強的ABTS+·清除能力，并且隨著質量濃度的上升，LPA-P3的清除能力增大得最快，而LPA-P1最慢。其中LPA-P3的IC50值為1.57 mg/mL，在2 mg/mL時清除率達到60.06%。結合氧自由基吸收能力，兩種抗氧化指標能得出比較一致的結論：LPA-P1的ABTS+·及氧自由基吸收能力最弱，LPA-P3最強，LPA-P和LPA-P2次之，但兩者間差距較小。

結合硫酸基含量來看，LPA-P3具有最高的硫酸基含量，為5.36%，而LPA-P和LPA-P2的硫酸基含量相差不大，分別為2.23%和2.29%，LPA-P1最少，為1.22%，與各組分的抗氧化指標實驗結論十分相似。這與Saha等[15]在研究海帶多糖的抗病毒活性時得到的結論相一致：硫酸基含量高的組分具有更強的抗病毒活性和抗氧化能力。

從單糖組成上來看，LPA-P3具有最多的巖藻糖，而LPA-P和LPA-P2的巖藻糖含量相差不大，而LPA-P1的巖藻糖含量最少，并且LPA-P3的半乳糖含量最高，LPA-P也含有大量的半乳糖，而LPA-P2和LPA-P1則主要含有大量的甘露糖，可以看出巖藻糖和半乳糖所占比重越大，多糖的抗氧化能力越好。Wang Jing等[23]的研究中也發現半乳糖含量更高組分的殺菌及抗氧化能力更強。Xue Changhu等[25]在分離海帶多糖中也同樣得到一個半乳糖含量很高的多糖組分具有最強的抗氧化能力。

從各組分的分子質量來看，LPA-P3和LPA-P1的分子質量最小，為17.13 kD和17.55 kD，但LPA-P3的ABTS+·及氧自由基吸收能力遠遠高于LPA-P1，而LPA-P和LPA-P2的分子質量也高于LPA-P1，這與Zhao Xue等[14]得出的結論不一致，并沒有表現出分子質量越小的組分抗氧化能力越強的特征。

2.6 LPA-P各組分的膽酸鹽吸附率

圖5 LPA-P及其純化組分的膽酸鹽吸附率Fig.5 Cholate adsorption rate of LPA-P and its fractions

由圖5可知，LPA-P及其純化組分的膽酸鹽吸附能力與ABTS+·及氧自由基吸收能力相似。LPA-P3的膽酸鹽吸附能力最強，為23.85%；而LPA-P和LPA-P2無顯著性差異，分別為13.90%和13.75%。LPA-P1的膽酸鹽吸附率幾乎為0%，可認為LPA-P1組分不具有膽酸鹽吸附能力。

對比抗氧化指標實驗結果，可看出多糖的膽酸鹽吸附能力與其抗氧化能力有著很高的相關性，具有更強ABTS+·及氧自由基吸收能力的多糖其膽酸鹽吸附能力會更高。這可能是由于影響ABTS+·及氧自由基吸收能力的分子基團和結構同樣會影響多糖與膽酸鹽絡合的能力。ABTS+·及氧自由基吸收能力強的多糖，其分子基團和結構更有利于與膽酸鹽絡合，使膽酸鹽排出體外，打斷膽肝循環，從而產生降血脂的功效。

結合LPA-P及其純化組分的結構特性，可推測含有高硫酸基含量、巖藻糖和半乳糖含量的多糖，具有更強的膽酸鹽吸附能力及抗氧化活性。

3 結 論

對檸檬酸提取海帶多糖進行脫蛋白和透析除鹽后得到一種多糖LPA-P，用DEAE離子交換柱分離純化得到3 種多糖組分LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3。LPA-P、LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3的平均分子質量分別為20.13、17.55、28.71、17.14 kD，都含有硫酸基，且LPA-P3最多，LPA-P1最少。海帶多糖及其純化組分的單糖組成均以巖藻糖、半乳糖和甘露糖為主，LPA-P和LPA-P3主要的單糖為半乳糖，而LPA-P1和LPA-P2主要的單糖為甘露糖，LPA-P3的巖藻糖含量最高。海帶多糖的ABTS+·清除能力從大到小依次為LPA-P3＞LPA-P＞LPA-P2＞LPA-P1，LPA-P3具有最強的膽酸鹽吸附能力，LPA-P和LPA-P2次之且無顯著性差異，而LPA-P1基本不具有膽酸鹽吸附能力。

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Bile Salt Adsorption Capacity and Antioxidant Activity of Polysaccharide Extract from Laminaria japonica and Its Fractions

WANG Zhirong, CUI Chun*, LIN Zongyi, HUANG Junwei
(School of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)

Polysaccharide from Laminaria japonica (LPA-P) was isolated by using aqueous citric acid solution. After the removal of protein and salt, LPA-P was purified by DEAE Sepharose fast flow chromatography to obtain LPA-P1, LPA-P2, and LPA-P3. The respective relationships of bile salt adsorption capacity and antioxidant activity with molecular weight, sulfated group content and monosaccharide composition for LPA-P and its fractions were investigated. The results indicated that all LPA-P and its purified fractions contained sulfated group. LPA-P3 had the highest sulfated group content of 5.36%, while LPA-P1 had the lowest of only 1.22%. The major monosaccharide composition consisted of fucose, galactose and mannose. Galactose was the major monosaccharide in both LPA-P and LPA-P3, whereas mannose dominated the monosaccharide composition of both LPA-P1 and LPA-P2. LPA-P3 was the highest in fucose. The average molecular weights of LPA-P, LPA-P1, LPA-P2 and LPA-P3 were estimated to be 20.13, 17.55, 28.71, and 17.14 kD, respectively. LPA-P3 exhibited the strongest antioxidant capacity but LPA-P1 the weakest; the antioxidant capacity of LPA-P was a little stronger than that of LPA-P2. LPA-P3 had the strongest bile salt adsorption capacity, followed by LPA-P and LPA-P2. LPA-P1 had substantially no bile salt adsorption capacity. According to the structure-activity relationship of polysacchrides from Laminaria japonica, it is speculated that the higher the contents of sulfated group as well as fucose and galactose, the stronger bile salt adsorption capacity and antioxidant activity of the polysaccharides.

Laminaria japonica; polysaccharides; bile salt adsorption capacity; antioxidant activity

10.7506/spkx1002-6630-201601005

TS201.1

A

1002-6630（2016）01-0022-06

王智榮, 崔春, 林宗毅, 等. 海帶多糖及其純化組分的膽酸鹽吸附能力及抗氧化活性[J]. 食品科學, 2016, 37(1): 22-27.

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201601005. http://www.spkx.net.cn

WANG Zhirong, CUI Chun, LIN Zongyi, et al. Bile salt adsorption capacity and antioxidant activity of polysaccharide extract from Laminaria japonica and its fractions[J]. Food Science, 2016, 37(1): 22-27. (in Chinese with English abstract)

DOI:10.7506/spkx1002-6630-201601005. http://www.spkx.net.cn

2015-03-11

國家高技術研究發展計劃（863計劃）項目（2014AA093602）；中央高校基本科研業務費專項資金項目（2014ZZ0053）

王智榮（1990—），男，碩士研究生，研究方向為食品生物技術。E-mail：W-Zhirong520@163.com

*通信作者：崔春（1978—），男，教授，博士，研究方向為食品生物技術。E-mail：cuichun@scut.edu.cn