劉 穎,宋丹丹,付 薇,于曉紅,竇博鑫(哈爾濱商業大學食品工程學院,黑龍江 哈爾濱 150076)
響應面試驗優化米糠膳食纖維脂肪替代物的制備工藝
劉 穎,宋丹丹,付 薇,于曉紅,竇博鑫
(哈爾濱商業大學食品工程學院,黑龍江 哈爾濱 150076)
以米糠膳食纖維為原料,采取羧甲基取代的方法制備米糠膳食纖維脂肪替代物。利用響應面分析法優化米糠膳食纖維脂肪替代物的制備工藝。在單因素試驗的基礎上,參考響應面Box-Behnken法選擇初始參數,利用Design-Expert 8.0.6軟件進行二次回歸分析對參數進一步優化。結果顯示,最優參數為堿化溫度25.9 ℃、氯乙酸添加量16.27 g/15 g、醚化時間4.54 h、醚化溫度69 ℃。此條件下,所得的米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度為1.266 8。從紅外光譜圖可以看出,制備出的米糠膳食纖維脂肪替代物發生了羧甲基取代反應。
米糠膳食纖維;脂肪替代物;制備工藝;響應面分析法
脂肪同葡萄糖、蛋白質并稱三大營養物質,它提供給人體所需的營養成分[1],在食品的風味、質構、口感等方面起著重要的作用[2]。但近年來研究發現,高脂肪膳食被認為是肥胖癥、高血脂、糖尿病等的誘因之一[3-5]。因此,脂肪替代物應運而生[6]。
脂肪替代物是一類添加到食品中可模擬同類全脂食品相同或相近的感官效果,但減少能量的物質。理想的脂肪替代物應具有類似脂肪的滑膩口感、低能量、無生理副作用等特點[7]。目前,脂肪替代物在人造黃油、冷凍食品和焙烤類食品中得到廣泛應用[8-10]。米糠是稻谷加工中最重要的一類副產品,含有優質并且豐富的膳食纖維、脂肪、蛋白質和淀粉等營養素[11]。是開發米糠油、米糠保健食品及多種生物活性物質的寶貴資源。
我國以可溶性膳食纖維為原料制成脂肪替代物的研究較多,吉義平等[12]以麥芽糊精、可溶性米糠蛋白、米糠多糖和可溶性米糠膳食纖維為原料,采用酶解法制備脂肪替代物。但以不溶性膳食纖維為原料的很少,荊曉飛[13]以玉米皮不溶性膳食纖維為原料,采用羧甲基取代法制備脂肪替代物。
本研究參考荊曉飛[13]制備脂肪替代物的方法,以不被人體消化吸收的不溶性米糠膳食纖維為原料制備米糠膳食纖維脂肪替代物,研究其最佳制備工藝。本研究為了解決低附加值米糠大量廢置的問題,并滿足人們對低脂、低熱量健康飲食產品的需求,從而創造更大的經濟和社會效益。
1.1 材料與試劑
米糠膳食纖維為實驗室自制:米糠溶于4 倍體積的乙醇在25 ℃條件下浸泡4 h,蒸餾水清洗掉殘留有機溶劑,離心,清洗,60 ℃烘干,粉碎,過40 目篩,即得到脫脂米糠。脫脂后的米糠含有的脂肪含量為0.87%。
無水乙醇 天津市天力化學試劑有限公司;甲醇、異丙醇、冰乙酸 天津市富宇精細化工有限公司;氯乙酸 天津市巴斯夫化工有限公司;蒸餾水 實驗室外供;氫氧化鈉 天津市東麗區天大化學試劑廠;鹽酸哈爾濱市化工試劑廠。
1.2 儀器與設備
電子天平 賽多利斯科學儀器(北京)有限公司;HH-ZK4雙列四孔水浴鍋 鞏凡市予華儀器有限責任公司;低速大容量離心機 上海安亭科學儀器廠;SHBIV雙A循環水式多用真空泵 鄭州長城科工貿有限公司;R-205旋轉蒸發器、W20513數控恒溫水浴鍋 上海申勝生物技術有限公司;HZQ-D恒溫振蕩器 哈爾濱東聯電子技術開發有限公司;Spectrum One-B型傅里葉變換紅外光譜儀 美國鉑金埃爾默公司。
1.3 方法
1.3.1 米糠膳食纖維的制備
參考鄭紅艷[14]的方法制備米糠膳食纖維,在此基礎上略有改動。稱取10 g脫脂米糠,按1∶10的料液比添加蒸餾水,煮沸糊化10 min,冷卻。在60 ℃、pH 6.5的條件下加入耐高溫α-淀粉酶酶解50 min,沸水浴滅酶10 min。然后在50 ℃條件下加入1% 0.2 mol/L NaOH溶液,磁力攪拌60 min,以去除蛋白質和脂肪,離心后傾去上清液。蒸餾水洗滌沉淀至溶液呈中性;60 ℃條件下烘干;粉碎后得到膳食纖維提取率為33.23%米糠膳食纖維。
1.3.2 米糠膳食纖維脂肪替代物制備的單因素試驗
1.3.2.1 溶劑媒介對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響
以甲醇、乙醇、異丙醇以及水為介質,15 g米糠膳食纖維溶于150 mL溶劑中,向其加入100 mL 15%的NaOH溶液,25 ℃堿化1.5 h,加入與米糠膳食纖維等量的氯乙酸配制成的15%氯乙酸溶液,70 ℃反應4.5 h,以羧甲基取代度為指標選擇最佳反應媒介。
1.3.2.2 堿化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響
15 g米糠膳食纖維溶于150 mL溶劑中,向其加入100 mL 15%的NaOH溶液,在20、25、30、35、40 ℃的條件下堿化1.5 h,加入與米糠膳食纖維等量的氯乙酸配制成的15%氯乙酸溶液,70 ℃條件下醚化反應4.5 h,測定米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度。
1.3.2.3 氯乙酸添加量對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響
15 g米糠膳食纖維溶于150 mL溶劑中,在25 ℃條件下,向其加入100 mL 15%的NaOH溶液堿化1.5 h,分別取氯乙酸添加量為7.5、10.0、15.0、22.5、30.0 g/15 g,并將其配制成15%氯乙酸溶液,70 ℃醚化4.5 h,測定米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度。
1.3.2.4 醚化時間對米糠脂肪替代物羧甲基取代度的影響
15 g米糠膳食纖維溶于150 mL溶劑中,向其加入100 mL 15%的NaOH溶液,在25 ℃條件下堿化1.5 h,加入與米糠膳食纖維等質量的15%氯乙酸溶液,70 ℃醚化3.0、3.5、4.0、4.5、5.0 h,測定米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度。
1.3.2.5 醚化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響
15 g米糠膳食纖維溶于150 mL溶劑中,向其加入100 mL 15%的NaOH溶液,在25 ℃條件下堿化1.5 h,加入與米糠膳食纖維等質量的15%氯乙酸溶液,分別在50、55、60、65、70、75 ℃醚化反應4.5 h,測定米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度。
1.3.3 米糠膳食纖維脂肪替代物制備的響應面試驗
根據響應面Box-Behnken設計原理[15-16],將單因素試驗中對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度影響明顯的因素進行分析試驗,以堿化溫度、氯乙酸添加量、醚化時間、醚化溫度4 個因素為自變量,米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度為響應值,設計為四因素三水平的響應面分析試驗。試驗因素水平見表1。

表1 Box-Behnken試驗因素與水平Table 1 Factors and levels used in Box-Behnken design
1.3.4 羧甲基取代度的測定
通過添加強親水基團羧甲基基團來改進不溶性米糠膳食纖維的親水性質,賦予膳食纖維良好的水溶性并且能夠模擬脂肪的性質,從而使米糠膳食纖維達到脂肪替代物的效果。羧甲基取代度是指每個脫水葡萄糖單元上羥基被取代的平均數目。參考黃紀念[17]、張炯亮[18]等的方法,稱取0.100 g米糠膳食纖維脂肪替代物,加入40 mL 2 mol/L HCl溶液,攪拌3.5 h,過濾,80%的甲醇溶液洗滌米糠膳食纖維脂肪替代物,直到濾液用AgNO3檢查無氯離子為止。用50 mL 0.5 mol/L NaOH標準溶液溶解樣品,加熱使溶液呈透明狀態,立即用0.5 mol/L的標準HCl溶液滴定剩余NaOH,用酚酞作指示劑,滴至紅色剛剛褪去為止。

式(1)、(2)中:DS為米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度;C(NaOH)為加入NaOH濃度,0.5 mol/L;V(NaOH)為加入NaOH體積,50 mL;C(HCl)為滴定時加入HCl濃度,0.5 mol/L;V(HCl)為滴定時所消耗的HCl體積/mL。
1.3.5 米糠膳食纖維脂肪替代物的紅外光譜表征
將米糠膳食纖維脂肪替代物2 mg放入瑪瑙研缽中,加入200 mg干燥的光譜純KBr,混合研磨均勻,使其粒度在2.5 μm以下,裝入壓片模具中,進行壓片,即可得到一透明KBr樣品片,用紅外光譜儀進行測定。
1.4 數據分析
各因素在相同條件下平行測定2 次,應用Microsoft Excel軟件和Design-Expert 8.0.6軟件進行分析。
2.1 單因素試驗結果
2.1.1 溶劑媒介對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響

圖1 溶劑媒介對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響Fig.1 Influence of solvent media on the degree of carboxymethyl substitution of rice bran fat substitute
由圖1可以看出,在相同的試驗條件下,水作為溶劑媒介具有最高的羧甲基取代度為0.416 8,甲醇、異戊醇的羧甲基取代度為0.203 8、0.227 2,乙醇作為有機溶劑媒介的效果最差為0.199 2,這說明乙醇作為本反應的媒介對于試驗條件的要求較高,在同等反應條件下,其副反應嚴重抑制了主要的羧甲基化反應,對醚化劑的利用程度大幅降低,增加了反應的難度,從而增大了反應成本[13]。與此同時,水作為溶劑媒介可以降低成本,有利于后續反應的安全性。綜上所述,選水作為溶劑媒介。
2.1.2 堿化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響

圖2 堿化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響Fig.2 Influence of alkalization temperature on the degree of carboxymethyl substitution of rice bran fat substitute
從圖2可以看出,隨著堿化溫度的逐漸升高,羧甲基取代度開始逐漸升高而后逐漸降低。溫度在20~25 ℃范圍內羧甲基取代度從0.362 6升到0.422 5,這是因為此反應是親電取代反應[19],即羧甲基中碳進攻堿化米糠膳食纖維的活性中心,隨著堿化溫度的不斷升高,羧甲基化反應機率不斷升高,羧甲基取代度不斷增加。溫度在25~40 ℃范圍內羧甲基取代度下降到0.335 3,隨著堿化溫度的不斷升高,導致米糠膳食纖維發生焦化反應,產物顏色較深[20],不利于米糠膳食纖維羥基基團的外露,逐漸減小了可以反應的空間,所以高溫對堿性米糠膳食纖維具有反作用[21]。當溫度為25 ℃時,羧甲基取代度達到最大為0.422 5。相同條件下,較低的溫度有助于堿化反應的充分進行,25 ℃為一般室溫,減小了對設備和環境的特殊要求,從而25 ℃為制備高羧甲基取代度的米糠膳食纖維脂肪替代物的最優堿化溫度。
2.1.3 氯乙酸添加量對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響

圖3 氯乙酸添加量對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響Fig.3 Influence of chloroacetic acid dosage on the degree of carboxymethyl substitution of rice bran fat substitute
從圖3可以看出,隨著氯乙酸添加量的不斷升高,羧甲基取代度先增大隨后減小。氯乙酸添加量在7.5~15 g/15 g范圍內時,羧甲基取代度從0.512 0上升到0.715 7,這是因為當堿的添加量一定時,形成米糠膳食纖維的活性中心一定,在此情況下,隨著氯乙酸用量增加,活性中心與之碰撞發生羧甲基化反應的機率也隨之增加,使得羧甲基化增加[22-24];在氯乙酸添加量為15~30 g/15 g時,羧甲基取代度下降到0.602 3,當氯乙酸添加量過高時,會消耗一部分堿,使副反應增加,從而導致羧甲基化降低[25],在氯乙酸添加量為15 g/15 g時,羧甲基取代度最大為0.715 7。此時的堿與氯乙酸的比例最為合適,既能保證整個反應體系的堿性條件,又可以確保醚化反應的優勢地位,反應效率最高。
2.1.4 醚化時間對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響

圖4 醚化時間對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響Fig.4 Influence of etherification time on the degree of carboxymethyl substitution of rice bran fat substitute
從圖4可以看出,隨著醚化時間的延長,羧甲基取代度先增大再降低,醚化時間3.0~4.5 h時,羧甲基取代度從0.414 4增加到0.530 8,這是因為隨著反應時間的延長,反應進行得越充分[20]。醚化時間4.5~5.0 h時,羧甲基取代度從0.530 8下降到0.472 4,由于體系長時間在強堿環境中,時間過長可能導致游離的堿將原本連接上的羧甲基裂解下來,羧甲基化產品發生輕微的水解,而導致羧甲基取代度下降,所以反應時間不宜過長。在醚化時間為4.5 h時,羧甲基取代度最大為0.530 8,同時反應進行的也最為充分,因此選擇4.5 h作為制備米糠膳食纖維脂肪替代物的最佳醚化時間。

圖5 醚化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響Fig.5 Iinfluence of etherification temperature on the degree of carboxymethyl substitution of rice bran fat substitute
2.1.5 醚化溫度對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響
從圖5可以看出,羧甲基取代度隨著醚化溫度的升高體現先增大后減小的趨勢,醚化溫度在50~70 ℃時,羧甲基取代度由0.471 7逐漸升高到0.591 2,醚化溫度升高增加了體系的熱能,有助于基團與活性位點間的相互作用,既提高了相互接觸的頻率又提高了醚化反應強度[13]。若溫度過低則大大降低醚化反應速率,副反應的強度增強,對最終產品的質量產生負面影響。隨著溫度的升高,羧甲基取代度在醚化溫度75 ℃時下降到0.562 2,過高的溫度會使堿性纖維發生焦化反應,產物顏色加深且結塊,造成反應困難,已經連接上的羧甲基基團聯結牢固程度下降,導致最終的羧甲基取代度下降[19]。當醚化溫度70 ℃時有最大羧甲基取代度0.591 2,此時溫度保證了主反應的效率,副反應速率降低,醚化劑得到充分利用。因此,制備米糠膳食纖維脂肪替代物的最適醚化溫度為70 ℃。
2.2 響應面試驗結果
2.2.1 響應面試驗設計與結果

表2 響應面試驗設計方案及結果Table 2 Experimental matrix with results for response surface methodology
以堿化溫度、氯乙酸添加量、醚化時間、醚化溫度作為自變量,以取代度為響應值,試驗設計與結果見表2。其中1~24為析因試驗,25~29為中心試驗。29 個試驗點分為析因點和零點,其中析因點為自變量取值在A、B、C、D所構成的三維頂點,零點為區域的中心點,零點試驗重復5 次,用以估計試驗誤差[13]。利用ANOVA分析效應面的回歸參數。采用Design-Expert 8.0.6軟件對表2數據進行多元線性回歸擬合,得到以羧甲基取代度為響應值的二次多項回歸模型方程:Y=-111.667 57+0.625 35A+9.359 2B+10.260 06C+2.190 12D+0.128 84AB+0.067 31AC-3.6×10-3AD-0.376 4BC+0.038 82BD+2.77×10-3CD-0.016 415A2-5.284 81B2-1.289 45C2-0.015 659D2。
2.2.2 回歸方程的顯著性檢驗及方差分析

表3 回歸方程的顯著性檢驗及方差分析Table 3 Significance test and analysis of variance (ANOVA) of regression equation
對模型方程進行顯著性檢驗,由表3方差分析結果可見,模型差異性極顯著(P<0.000 1),說明方程與實際情況擬合較好,能夠反映羧甲基取代度與各因素之間的關系。失擬項差異不顯著(P>0.05),說明其他因素對試驗影響很小。適用于米糠膳食纖維脂肪替代物制備的工藝優化。由表3中F值的大小可以判斷各因素對羧甲基取代度影響的強弱。各個因素對羧甲基取代度影響的程度大小的次序醚化溫度>氯乙酸添加量>堿化溫度>醚化時間,數學模型的結果表明一次項A、B、D與二次項A2、B2、C2、D2以及交互項AB、AC差異性達到極顯著水平(P<0.01),交互項AD達到顯著水平(P<0.05),結果表明各考察因素對羧甲基取代度的影響具有交互作用,而不是簡單的線性關系。可用該回歸方程代替實驗真實點對試驗結果進行分析和預測。其相關系數R2=0.918 3,說明試驗所選擇的4 個變量對響應值的影響已達91.83%,表示該模型條件能夠很好地反映實際值。其他影響因素對提取率的影響可忽略不計。
2.2.3 各因素交互作用的響應面分析
響應面圖中曲面的陡峭程度可以表明變量對羧甲基取代度的影響程度,曲面較陡表明影響較大,反之則較小;而等高線圖反映了因素間交互作用的強弱大小,橢圓形表示交互作用顯著,圓形表示交互作用不顯著[26]。結合本研究中的二次回歸方程及表3可知,二次項AB、AC、AD均具有顯著的交互作用(P<0.05),其中二次項AB、AC具有極顯著的交互作用(P<0.01),即堿化溫度與氯乙酸添加量、堿化溫度與醚化時間、堿化溫度與醚化溫度每兩個因素間均具有顯著交互作用。


圖6 各因素交互作用對羧甲基取代度影響的響應面圖Fig.6 Response surface graphs showing the effects of various factors on the degree of carboxymethyl substitution
由圖6可看出,堿化溫度和氯乙酸添加量、堿化溫度和醚化時間、堿化溫度和醚化溫度對羧甲基取代度的影響較大,交互作用較強。AB、AC、AD每兩個因素的交互作用對米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度的影響結果升高后降低,響應值呈拋物線形趨勢,因此回歸方程有極大值。
2.2.4 驗證實驗結果
通過軟件分析確定最佳米糠膳食纖維脂肪替代物的制備工藝為堿化溫度25.86 ℃、氯乙酸添加量16.27 g/15 g、醚化時間4.54 h、醚化溫度68.96 ℃,此條件下由公式算出羧甲基取代度的理論值為1.268 3。為方便實際操作并考慮水浴鍋的溫度控制,將最優參數調整為堿化溫度25.9℃、氯乙酸添加量16.27 g/15 g、醚化時間4.54 h、醚化溫度69 ℃。此條件下對米糠膳食纖維脂肪替代物進行3 次平行制備實驗,米糠膳食纖維脂肪替代物的平均羧甲基取代度為1.266 8。與預測提取率誤差為0.118%,測定結果穩定,偏差不大,實驗結果可靠,具有一定的實際預測性。
2.3 米糠膳食纖維脂肪替代物的紅外光譜表征
如圖7所示,米糠膳食纖維在3 444.02 cm-1處為—OH振動吸收峰,2 925.94 cm-1處為C—H鍵振動吸收峰。制備的羧甲基取代度為0.366 3的米糠膳食纖維脂肪替代物在1 606.97 cm-1處為C=O雙鍵振動吸收峰,1 412.36 cm-1處為亞甲基—CH2—的振動吸收峰。1 023.66 cm-1處為醚鍵結構C—O—C的特征振動吸收峰。羧甲基的對稱伸縮振動峰在1 600~1 640 cm-1范圍內,非對稱伸縮振動吸收峰在1 400~1 450 cm-1范圍內,所以1 606.97 cm-1和1 412.36 cm-1處的特征吸收峰表明氯乙酸與堿性米糠膳食纖維發生了醚化反應,羧甲基成功連接到膳食纖維上[27]。

圖7 米糠膳食纖維脂肪替代物的紅外光譜圖Fig.7 FTIR spectra of rice bran dietary fiber and fat substitute prepared from it with a degree of substitution of 0.366 3
從圖7還可看出,曲線a在3 444.02 cm-1處—OH振動以及2 925.94 cm-1處C—H鍵吸收強度比曲線b的吸收強度的弱,也是由于羧甲基取代了米糠膳食纖維中的羥基所產生的效果。在醚化反應階段,如果反應條件不合適,醚化反應產生大量的副產物HOCH2COONa,阻礙了羧甲基化反應的正常進行,會顯著增加在1 400~1 450 cm-1范圍內的紅外吸收強度而對1 023.66 cm-1醚鍵特征峰的影響較小,從而導致1 412.36 cm-1處亞甲基—CH2—的紅外吸收強度高于1 023.66 cm-1處醚鍵的紅外吸收強度[28]。因此,當1 412.36 cm-1處亞甲基—CH2—的紅外吸收強度低于1 023.66 cm-1處醚鍵的紅外吸收強度,表示制備的羧甲基米糠膳食纖維脂肪替代物純度較高,且此處選擇最優工藝條件下高取代度的樣品更為合適。
采用Box-Behnken響應面法,考察堿化溫度、氯乙酸添加量、醚化時間、醚化溫度4 個因素對米糠膳食纖維脂肪替代物羧甲基取代度的影響。在響應面試驗中,方差分析結果可見,4 個因素的一次項A、B、D和二次項均具有顯著性,4 個因素之間的乘積項AB、AC、AD均具有顯著性,表明AB、AC、AD各因素之間的具有相互作用。二次多項式回歸模型可以達到極顯著水平,且失擬項不顯著,表明回歸方程對試驗擬合較好。在驗證實驗中,最終確定最佳提取工藝參數堿化溫度25.9 ℃、氯乙酸添加量16.27 g/15 g、醚化時間4.54 h、醚化溫度69 ℃。此條件下,所得的米糠膳食纖維脂肪替代物的羧甲基取代度為1.266 8。從紅外光譜圖可以看出,制備出的米糠膳食纖維脂肪替代物發生了羧甲基取代反應。本實驗為充分研究米糠膳食纖維脂肪替代物提供理論依據,也為響應面法在米糠膳食纖維脂肪替代物制備工藝的應用提供示范性研究。
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Optimization of Preparation Process for Fat Substitute from Rice Bran Dietary Fiber by Response Surface Methodology
LIU Ying, SONG Dandan, FU Wei, YU Xiaohong, DOU Boxin
(College of Food Engineering, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China)
In this study, response surface methodology was used to optimize the preparation of fat substitute by carboxymethyl substitution of rice bran dietary fiber. A Box-Behnken design involving the independent variables chosen based on single factor experiments was used to define an experimental design matrix of reaction conditions for rice bran dietary fiber. For the optimization of the independent variables, quadratic regression analysis was performed using Design-Expert 8.0.6 software. The optimal parameters for the preparation of fat substitute were achieved as alkalization of rice bran dietary fiber at 25.9 ℃ followed by 4.54 h etherification at 69 ℃ after addition of 16.27 g of chloroacetic acid per 15 g of dietary fiber. Under these conditions, the degree of carboxymethyl substitution of rice bran dietary fiber was 1.266 8. IR spectra confirmed the occurrence of carboxymethyl substitution in the fat substitute prepared rice bran dietary fiber.
rice bran dietary; fat substitute; preparation process; response surface methodology
10.7506/spkx1002-6630-201604007
TS210.9
A
1002-6630(2016)04-0037-07
劉穎, 宋丹丹, 付薇, 等. 響應面試驗優化米糠膳食纖維脂肪替代物的制備工藝[J]. 食品科學, 2016, 37(4): 37-43. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201604007. http://www.spkx.net.cn
LIU Ying, SONG Dandan, FU Wei, et al. Optimization of preparation process for fat substitute from rice bran dietary fiber by response surface methodology[J]. Food Science, 2016, 37(4): 37-43. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201604007. http://www.spkx.net.cn
2015-06-12
黑龍江省應用技術研究與開發計劃項目(GC13C112)
劉穎(1968 —),女,教授,博士,研究方向為食品生物技術。E-mail:liuysh@hrbcu.edu.cn