奶牛急性大腸桿菌性乳房炎病例

徐　偉，陳亞妮，何珊珊，關　然，蘇小艷，胡松華

（浙江大學動物科學學院，浙江 杭州 310058）

奶牛急性大腸桿菌性乳房炎病例

徐偉，陳亞妮，何珊珊，關然，蘇小艷，胡松華

（浙江大學動物科學學院，浙江 杭州 310058）

奶牛發生臨床型乳房炎時通常可見乳房局部紅、腫、熱、痛，奶產量下降，但鮮見病牛死亡。筆者遇到卻因大腸桿菌性乳房炎導致奶牛死亡的病例，報告如下。

1　發病及診療經過

浙江某郊區奶牛場有荷斯坦泌乳奶牛1 300余頭。2016年2月15日，該場105牛舍109 097號奶牛突然發病，臨床癥狀表現為乳房紅腫、堅硬，乳汁稀薄，初期呈清水樣，后期變為血樣，日產奶量由發病前的40公斤迅速下降，同時伴有呼吸和心率加快，眼角膜充血，眼圈下凹，體溫升高至41.5℃，精神委靡，食欲廢絕，急劇消瘦。該牛于2009年9月17日出生，發病時已生產5胎，最近一次產犢時間為2015年11月2日。病牛先后用以下方法治療：（1）青霉素1 600萬IU，鏈霉素1 000萬μg，靜脈注射，1日兩次；青霉素320萬IU，鏈霉素200萬μg，乳房灌注，1日兩次。該方法連續治療3 d后未見好轉；（2）四環素6 g，靜脈注射，1日兩次；鹽酸林可霉素20 mL（1.2 g），氨芐西林鈉2 g，乳房灌注，1日兩次。連續治療3 d后病牛體溫開始下降，但其他癥狀未見好轉；（3）紅霉素3 g，靜脈注射，1日兩次；鹽酸林可霉素20 mL（1.2 g），氨芐西林鈉2 g，乳房灌注，1日兩次。病牛連續治療3 d未見好轉，反而出現起臥困難，呻吟，乳房皮膚顏色變深等癥狀。2016年2月24日上午，病牛因醫治無效而死亡。尸體剖檢發現乳房有大量血水和化膿病灶。無菌采集乳房組織病料和病奶進行細菌學檢驗。

2　細菌的分離鑒定

按照下列方法進行細菌學檢查：（1）將病奶或乳腺組織病料接種于血瓊脂，置37℃溫箱培養24～48 h；（2）觀察菌落形態特征，挑取典型單個菌落接種于普通肉湯進行增菌培養，37℃振蕩培養24 h，革蘭染色、鏡檢，判定細菌為革蘭陽性或革蘭陰性，球菌或桿菌；（3）將肉湯培養物劃線接種于營養瓊脂，37℃培養過夜，進行生化鑒定。首先對革蘭陽性球菌進行觸酶試驗確定該菌為葡萄球菌或鏈球菌。結合鏡檢結果且觸酶陽性的判定為葡萄球菌，觸酶陰性的判定為鏈球菌。利用血漿凝固酶試驗將葡萄球菌進一步鑒定區分為金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）。利用CAMP、七葉苷水解、馬尿酸鈉水解、美藍牛乳還原等試驗將鏈球菌進一步鑒定區分為無乳鏈球菌、停乳鏈球菌或乳房鏈球菌。對革蘭陰性桿菌，接種于營養瓊脂、麥康凱瓊脂及伊紅美藍瓊脂，37℃培養過夜，觀察細菌生長狀態，并按常規方法進行相關生化鑒定。

3　細菌藥敏試驗

用Kirby-Bauer瓊脂擴散法對分離菌進行藥敏試驗，包括以下15種藥物：氨芐西林、丁胺卡那霉素、林可霉素、多西環素、阿莫西林、恩諾沙星、氟苯尼考、慶大霉素、妥布霉素、頭孢曲松、阿奇霉素、青霉素、四環素、紅霉素、多黏菌素B。37℃培養24 h后用游標卡尺測量瓊脂表面抑菌圈直徑，并根據不同抗菌藥物藥敏紙片的判定標準判定為高敏、中敏或耐藥。

4　結果與分析

細菌培養結果表明，血瓊脂上呈圓形菌落、光滑、濕潤、無明顯溶血；革蘭測陰性桿菌；麥康凱瓊脂上菌落呈粉紅色；伊紅美藍瓊脂上菌落呈黑色、有金屬光澤。生化鑒定結果如表1。因此，判定為大腸桿菌（E.coli），病奶和組織病料中均檢出同樣細菌。

表1　生化試驗結果

藥敏試驗結果見表2。本研究分離菌對氨芐西林、林可霉素、多西環素、阿莫西林、氟苯尼考、青霉素、四環素、紅霉素等表現為不敏感；對丁胺卡那霉素、恩諾沙星、慶大霉素、妥布霉素、頭孢曲松、阿奇霉素等表現為敏感。

表2　藥敏試驗結果

根據發病奶牛的臨床癥狀以及細菌學分離鑒定結果，該病例診斷為大腸桿菌引起的急性乳房炎。大腸桿菌是一種環境性致病菌，該病原侵入乳腺后可在短時間內大量繁殖，釋放出內毒素（endotoxin），進入血液引起毒血癥（toxemia）。由于毒素作用，病牛在臨床上出現體溫升高，食欲不振，呼吸和心率加快等全身癥狀。該病多發于產后高產奶牛，病情嚴重可導致病牛死亡。奶牛發病后，使用了青霉素、四環素、林可霉素、氨芐西林鈉和紅霉素等藥物治療。從表2可知，病牛分離菌對這些藥物均不敏感。由于治療無效，奶牛發病后第9天死亡。根據大腸桿菌性乳房炎的發病機理，在治療上除了使用敏感抗菌藥物消滅病原外，還應針對內毒素產生的毒血癥盡早進行大劑量靜脈輸液，必要時使用皮質激素和抗前列腺素藥物緩解全身癥狀。

胡松華，E-mail：songhua@zju.edu.cn