鹿特異性復合麻醉劑對大鼠大腦皮層Na+—K+—ATP酶活性的影響

馮雪 付連軍 林博 等

摘要：通過測定鹿特異性復合麻醉劑麻醉下大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的變化，探討了其麻醉與大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的關系。將32只純種SD大鼠隨機分成對照組、誘導組、麻醉組和催醒組，對照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑，于各時間點冰上采集各組大鼠大腦皮層，采用比色法測定其Na+-K+-ATP酶活性。結果顯示，藥物作用后大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性顯著低于對照組（P<0.05或P<0.01）。該結果提示大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性變化與鹿特異性復合麻醉劑的麻醉作用具有相關性。

關鍵詞：鹿特異性復合麻醉劑；大鼠；大腦皮層；Na+-K+-ATP酶

中圖分類號：S859.79+1 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）04-0964-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.04.037

Effects of Specificity Anesthetic for Deer on Na+-K+-ATPase Activity

in Cerebral Cortex of Rats

FENG Xue， FU Lian-jun， LIN Bo， CHANG Nai-yuan， LI Jing-cheng， LI Wen-xuan， YIN Bai-shuang

（Department of Animal Medicine， Jilin Agricultural Science and Technology， Jilin 132101，Jilin，China）

Abstract： This experiment was aimed to determine the activity of Na+-K+-ATPase in rats' cerebral cortex region and investigate the relationship between specificity anesthetic for deer and Na+-K+-ATPase in cerebral cortex. 32 SD rats were randomly divided into control group， induction group， anesthesia group and the wake group. Rats of the control were injected with saline（30 mL/kg），rats of the other group were injected with drug （30 mg/kg）. The samples of cerebral cortex in different period were separated and the activities of Na+-K+-ATPase were determined by using colorimetry methods. The results showed that the activities of Na+-K+-ATPase in cerebral cortex after administration were decreased obviously compared with that in the control group（P<0.05 or P<0.01）. It indicated that the changes of the activity of Na+-K+-ATPase in the cerebral cortex were correlated with the specificity anesthetic for deer.

Key words： specificity anesthetic for deer； rats； cerebral cortex； Na+-K+-ATPase

在哺乳動物腦組織中Na+-K+-ATP酶含量豐富，該酶在維持神經細胞的興奮性、傳導性及調節神經遞質代謝等方面發揮著重要作用[1]。動物在麻醉過程中腦組織神經細胞處于抑制狀態，神經細胞的轉導作用受阻。過去的研究表明，多種麻醉藥物均可引起跨膜信號轉導系統中Na+-K+-ATP酶活性降低，從而調節細胞內Ca2+濃度，控制神經遞質的釋放，抑制神經細胞之間及神經細胞與肌肉或腺體細胞之間的興奮傳遞，產生麻醉現象[2]。鹿特異性復合麻醉劑是吉林農業科技學院動物外科學教研室自行研制成功的以賽拉嗪、替來他明及強痛寧為主要成分的鹿專屬復合麻醉劑，臨床應用麻醉效果顯著，對鹿的生理指標影響輕微，無副作用。本試驗通過研究鹿特異性復合麻醉劑對大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響，以初步探討其全麻作用的跨膜信號轉導機制。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

32只純種SD大鼠，雌雄兼備，體重（180±20） g，購于吉林大學實驗動物中心，實驗室環境下飼養2周后進行試驗。

1.2 試驗藥品及試劑

鹿特異性復合麻醉劑（噻啦嗪∶替來他明∶強痛寧=0.90∶0.82∶0.26，吉林農業科技學院動物外科學教研室自行研制）；Na+-K+-ATP酶測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20130821），考馬斯亮藍蛋白質含量測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20130816）。

1.3 樣品采集與處理

對照組大鼠按30 mL/kg體重腹腔注射生理鹽水，其余各組按30 mg/kg體重腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑，分別于誘導期、麻醉期和催醒期斷頭取腦，分離大腦皮層，稱重后置于10倍體積的生理鹽水介質中勻漿，1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，沉淀用預冷的生理鹽水混懸后再次1 000 r/min 離心10 min，收集上清液，合并兩次上清液，然后以17 000 r/min 離心55 min，棄去上清液。

1.4 檢測方法

利用比色法測定Na+-K+-ATP酶活性。按考馬斯亮藍法測定蛋白質含量。

酶活力測定：酶活力以每小時每毫克組織蛋白分解ATP產生1 μmol無機磷的量為1個ATP酶活力單位。即微摩爾分子磷/毫克蛋白·小時[μmol

Pi/mg（prot）·h]。

1.5 試驗數據的分析與統計

應用SPSS 16.0軟件對試驗數據進行分析，Microsoft Excel 2003 對試驗數據制圖。

2 結果與分析

試驗結果見圖1。由圖1可見，大鼠腹腔注射鹿特異性復合麻醉劑后誘導期大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力顯著低于對照組（P<0.05）；麻醉期和催醒期大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP 酶活力與對照組比較差異極顯著（P<0.01）。

3 討論

全麻狀態下動物的意識消失主要由大腦皮層抑制所致，各種感覺及來自大腦、小腦、脊髓及顱神經的沖動首先在網狀結構匯集并進行信號處理，然后通過上行通路與丘腦及下丘腦（與醒覺及痛覺有關）中的各神經核群發生聯系，最終對大腦皮層的活動產生影響[3，4]。張宇等[5]研究指出Na+-K+-ATP酶活性的降低影響了突觸的電化學傳遞，氯胺酮、靜松靈以及復合麻醉劑對小型豬不同腦區中Na+-K+-ATP酶活性的抑制是其產生麻醉作用的主要原因之一[6]；范宏剛等[7]研究發現小型豬復合麻醉劑的全麻作用與抑制大腦皮層、小腦等腦區突觸體Na+-K+-ATP酶活性相關；高利等[2]研究提出噻拉嗪對山羊麻醉的作用機制可能與抑制跨膜信號轉導系統中Na+-K+-ATP酶活性有關。

本研究發現，鹿特異性復合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶的活性，使動作電位在峰電流期間產生的膜外高K+和膜內高Na+的狀態不能及時消除，導致動作電位后時相電位時程延長，細胞的相對不應期延長，興奮性閾值增高，引起受抑制區域所支配的各項生理功能暫時性喪失或減退，產生麻醉效應。

4 結論

本研究結果表明，鹿特異性復合麻醉劑抑制大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性可能是其產生麻醉作用的機理之一。

參考文獻：

[1] TAMURA M，HORI S， NAKAGAWA H. Lactobacillus rhamnosus JCM 2771： Impact on metabolism of isoflavonoids in the fecal flora from a male equol producer[J]. Curr Microbiol，2011， 62（5）：1632-1637.

[2] 高 利，張 宇，魏成威，等.噻拉嗪對山羊不同腦區ATP酶活性的影響[J].中國獸醫雜志，2014，50（11）：90-92.

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[4] SAITO S，FUJITA T. Effects of inhalational anesthetics on biochemical events in growing neuronal tips[J]. Anesthesiology， 1993，79（6）：1338-1347.

[5] 張 宇，魏成威，劉本君，等.2，6二甲苯胺噻嗪麻醉對大鼠大腦皮層、丘腦和海馬ATP酶活性的影響[J].黑龍江畜牧獸醫，2013（11）：135-137.

[6] 張 宇.氯胺酮復合麻醉劑對小型豬中樞神經NO-cGMP等信號通路的影響[D].哈爾濱：東北農業大學，2013.

[7] 范宏剛，冀 偉，郭鳳銘，等.小型豬復合麻醉劑對大鼠不同腦區突觸體Na+，K+-ATP酶活性的影響[J].畜牧與獸醫，2013，45（9）：31-34.