JAK2/STAT3信號通路與子宮內膜異位癥發病機制相關性研究

吳松　鄭桂霞　張艷輝　邢焱玲　任杰　王丹

JAK2/STAT3信號通路與子宮內膜異位癥發病機制相關性研究

吳松鄭桂霞張艷輝邢焱玲任杰王丹

目的 通過實驗分析JAK2/STAT3信號通路中相關蛋白的表達與子宮內膜異位癥發病機制的相關性。方法 收集子宮內膜異位癥患者25例和健康婦女24例作為研究對象，測定兩組婦女STAT3、BCL-XL及LIVIN的表達情況。結果 子宮內膜異位組STAT3、LIVIN和BCL-XL陽性表達率高于健康組。結論 子宮內膜異位癥患者體內的JAK2/STAT3通路處于活躍狀態與子宮內膜異位癥發病機制有一定的聯系，臨床上可以就此入手進一步研究和治療。

STAT3；子宮內膜異位癥；BCL-XL；LIVIN

子宮內膜異位癥（endometriosis，EMs，內異癥）是一種常見的良性婦科疾病，多見于育齡期婦女，其引起的痛經、盆腔疼痛、不孕等問題嚴重影響婦女的生活質量和生育能力[1]。EMs雖然是良性疾病，卻具有無限生長、生成新生血管浸潤并破壞周圍組織、局部或遠處轉移等惡性腫瘤的一些特性[2]，而誘發此類疾病的因素尚且不明確。越來越多的研究表明凋亡是子宮內膜細胞保持周期性結構和功能穩定的關鍵因素，異位內膜之所以在宮腔外種植并繼續存活，與其抗凋亡的抵抗力增強有關。本文探究的JAK2/ STAT3信號通路及其下游的靶基因可以控制細胞的增殖、分化、凋亡，因此通過檢測凋亡相關蛋白進一步探討細胞凋亡與子宮內膜異位癥病因的相關性，本研究通過實驗檢測STAT3、BCL-XL、LIVIN的表達情況，現報道如下。

1　資料與方法

1.1基本資料

收集2012年10月～2014年9月我院病理科存檔的子宮內膜異位癥患者25例和健康婦女24例作為研究對象。同時對所有研究對象的年齡，身高，體重，學歷，其他疾病等進行統計學分析，P＞0.05，差異不具有統計學意義，可對比。

1.2實驗方法

分別選取子宮內膜異位組患者的病理切片標本與健康組患者病理切片標本。所有婦女均使用免疫組織化學鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結（SP）法進行測定。

1.3檢驗標準

以細胞核或細胞質中出現顏色為棕褐色或棕黃色的顆粒判定為陽性細胞。再根據免疫組織化學SP法檢測儀器自帶的操作說明中規定：按著色強度進行結果判定：無著色為0分；淺黃色記1分，黃色記2分，棕黃色細胞或棕褐色細胞記3分。再根據陽性細胞占同類細胞的百分比進行計分：其中陽性細胞不存在的標本記0分，陽性細胞＜10%記1分，陽性細胞在10%～50%記2分，陽性細胞占總標本細胞的50%～75%記3分，陽性細胞＞75% 記4分。以上兩次測評得分之和＞3分為陽性，反之為陰性。

1.4統計學方法

采用SPSS 13.0統計學軟件對本次的研究數據進行處理分析，計數資料用[（n）%]表示，組間比較采用χ2檢驗、Fisher精確檢驗，相關性分析采用Spearman，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2　結果

2.1兩組婦女STAT3、BCL-XL、LIVIN表達情況比較

異位組STAT3，BCL-XL，LIVIN的表達陽性率分別為84%，60%，88%；對照組相應指標分別為20.8%，16.7%，20.8%，P＜0.05，差異具有統計學意義，見表1。

表1　兩組婦女STAT3、BCL-XL、LIVIN表達情況比較

2.2STAT3蛋白表達與BCL-XL蛋白表達關系

STAT3蛋白表達與BCL-XL蛋白表達呈正相關（r=0.346，P=0.011）；STAT3與LIVIN蛋白表達無相關性（P＞0.05）。

3　討論

1976年Hopwood等第一次報道正常人類子宮內膜中存在凋亡的現象，隨后不斷有研究證實凋亡在調節月經周期中確實起作用。凋亡現象存在于子宮內膜為認識EMs展開了新視野。已有研究表明JAK2/STAT3信號通路與細胞分化、增殖、侵襲和凋亡密切相關。正常生理情況下，STAT3的激活僅能維持很短的時間，而在多種腫瘤細胞中STAT3均呈持續激活狀態[3]。STAT3廣泛表達于各種組織和細胞，磷酸化活化后形成二聚體從細胞質進入細胞核，調控靶基因如血管內皮生長因子（VEGF）、BCL-XL和bcl-2等的表達，促進細胞生長、抵抗凋亡、血管生成及侵襲[4]。凋亡抑制因子Bcl-xl是STAT3下游的靶基因，是與STAT3密切相關的癌基因產物[5]。本研究結果顯示異位內膜中STAT3、BCL-XL的水平高于對照內膜，提示異位子宮內膜存在STAT3、BCL-XL的過度表達和持續活化，有報道STAT3可能通過上調凋亡相關蛋白BCLXL來發揮其抑制細胞凋亡和促進細胞增殖的作用，本實驗我們推測，子宮內膜異位癥的患者體內控制JAK2/STAT3通路處于活躍狀態與其發病機制有一定聯系。LIVIN是凋亡抑制蛋白家族（IAPs）的新成員，2000年被發現[6]，可通過多種途徑來發揮抗細胞凋亡的作用[7]。LIVIN在正常成人組織中不表達或低表達，在多數腫瘤中高表達。LIVIN的抗凋亡作用主要是通過抑制胱天酶（caspase）級聯激活來實現的。楊霞等[8]研究認為EMs異位內膜腺體LIVIN的表達均明顯強于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），本研究與文獻報道一致，提示內膜異位癥患者的異位內膜本身不同于正常內膜，對凋亡易感性低。 本研究發現STAT3蛋白表達與BCL-XL蛋白表達呈正相關，因此推測STAT3的過度表達和持續活化，激活了BCL-XL，使異位的內膜細胞過度增殖，同時凋亡能力下降，進而導致子宮內膜在異位粘附、侵襲、浸潤、血管形成等惡性行為的進展，凋亡相關蛋白表達的異常，導致了異位內膜抗凋亡功能增強，這可能是EMs發生的機制之一。同時本研究結果顯示STAT3與LIVIN蛋白表達無相關性，因此推測兩者可能是通過不同的信號途徑達到抑制凋亡的作用，但是否通過作用相同的靶基因來發揮作用，還有待于增加樣本量進一步研究。本研究的結果顯示內異癥患者體內JAK2/STAT3通路處于活躍狀態與子宮內膜異位癥發病機制有一定的聯系，下一步筆者希望通過藥物或其他細胞因子誘導異位內膜細胞凋亡使其消退，同時又不損傷正常組織細胞，從而達到治愈EMs的目的?？沟蛲鲆蜃覵tat3 與Livin使靶向基因治療成為可能，并且由于它們在正常組織中不表達或低表達，又使其靶向治療具有較好的特異性。希望可以從此方面入手為內異癥的治療及新藥研發提供一種新的策略。

[1]蘇曉華，宋殿榮，張英，等. 子宮內膜異位癥中子宮內膜間質細胞血管生成能力的研究[J]. 國際婦產科學雜志，2015，42（1）：49-53，后插1.

[2]高波，郝敏. Livin、survivin、caspase-3在子宮內膜異位癥中的表達及其意義[J]. 武警醫學，2011，22（7）：602-605，609.

[3]Król M，Paw?owski KM，Dolka I，et al. Density of Gr1-positive myeloid precursor cells，p-STAT3 expression and gene ex-pression pattern in canine mammary cancer metastasis[J]. Vet Res Commun，2011，35（7）：409-423.

[4]孫紹娟. STAT3及Bcl-xL與肺癌分化程度的研究[J]. 臨床合理用藥，2012，5（8A）：117-118.

[5]孫瑩，于浩，張靈，等. STAT3-si RNA對胃癌細胞株SGC-7901增殖與凋亡的影響[J]. 中國病理生理雜志，2010，26（2）：393-395.

[6]Ding ZY，Liu GH，Olsson B，et al. Upregulation of the antiapoptotic factor Livin contributes ticisplatin resistance incolon cancer cells[J]. Tumour Biol.，2013，34（2）：683-693.

[7]Chung CY，Park YL，Kim N，et al. Expression and prognostic significance of Livin in gastric cancer[J]. Oncol Rep.，2013，30（5）：2520-2528.

[8]楊霞，錢靜. Survivin與Livin在子宮內膜異位癥中的表達與意義[J]. 中國婦幼保健，2011，26（16）：2516-2518.

To Study the Relationship Between JAK2/STAT3 Signaling Pathway and the Pathogenesis of Endometriosis

WU Song ZHENG Guixia ZHANG Yanhui XING Yanling REN Jie WANG Dan Department of Gynaecology, Nan'gang Branch of Heilongjiang Hospital, Harbin Heilongjiang 150001, China

Objective To analyze the correlation between the expression of related proteins in the JAK2/STAT3 signaling pathway and the pathogenesis of endometriosis. Methods 25 cases of endometriosis and 24 healthy women were selected as the research object. The expression of STAT3, BCL-XL and LIVIN were measured in two groups of women. Results The positive expression rate of STAT3, LIVIN and BCL-XL in the endometriosis group was higher than that in the healthy group. Conclusion The JAK2/STAT3 pathway in the patients with endometriosis is in active state and has a certain relationship with the pathogenesis of endometriosis.

STAT3, Endometriosis, BCL-XL, LIVIN

R711

A

1674-9308（2016）30-0051-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.30.031

黑龍江省衛生和計劃生育委員會科研基金（項目編號：2012-382）

黑龍江省醫院南崗分院婦科，黑龍江 哈爾濱 150001

鄭桂霞，E-mail：wusong.207@163.com