聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細胞因子及抗體水平的影響

郝潔，田小軍，宋新文，申保生，段樹鵬

(新鄉醫學院第一附屬醫院，河南衛輝453100)

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聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細胞因子及抗體水平的影響

郝潔，田小軍，宋新文，申保生，段樹鵬

(新鄉醫學院第一附屬醫院，河南衛輝453100)

目的 探討聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細胞因子及抗體水平的影響。方法 選擇慢性丙肝患者120例，隨機分為觀察組、對照組各60例。兩組均給予改善肝功能等基礎治療，同時口服利巴韋林250 mg、3次/d；在此基礎上對照組皮下注射普通干擾素3×106IU/d，連用4周后改為3次/周；觀察組皮下注射聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg，1次/周；兩組均連續治療6個月。比較兩組治療后病毒學反應，觀察兩組治療前后血清γ干擾素、γ干擾素誘導蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α、CRP水平，肝功能及抗體水平變化。結果 觀察組快速應答52例、完全應答35例、持續應答35例，對照組分別為43、22、24例，兩組快速應答、緩慢應答及持續應答率比較P均<0.05。兩組治療后血清IL-6、TNF-α、CRP、IP-10、ALT、AST、TBil、抗HCV及HCV-RNA均低于治療前，γ干擾素水平均高于治療前，且觀察組效果更明顯(P均<0.05)。結論 聚乙二醇干擾素用于慢性丙肝能更好地調節患者機體免疫功能，改善患者預后。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干擾素；炎癥細胞因子；抗體表達

流行病學調查發現，丙肝病程大于10年者有10%～20%發生肝硬化，其中1%～7%進展為肝癌；對肝功能異常、肝組織病理學有明顯壞死或纖維化的慢性丙肝患者需要積極給予抗病毒治療[1]。普通干擾素是治療慢性丙肝的常用藥物，對HCV復制具有抑制作用，但部分患者對普通干擾素的病毒學應答不佳甚至無反應。聚乙二醇干擾素可促進干擾素抑制細胞內病毒復制及細胞增殖，同時增加淋巴細胞的特異性細胞毒性等一系列免疫調控活動，對慢性丙肝效果更佳。但目前其對炎癥細胞因子及抗體水平影響的研究尚少。2012年1月～2015年2月，我們觀察了聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細胞因子及抗體水平的影響。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期新鄉醫學院第一附屬醫院收治的慢性丙肝患者120例，男66例、女54例，年齡25～60(36.12±4.17)歲。均符合2015年中華醫學會《丙型肝炎防治指南》[2]中制定的診斷標準。納入標準：血清抗-HCV及HCV-RNA陽性；ALT或AST反復或持續升高1.5倍以上至少6個月；肝組織病理學檢查明確炎癥壞死或中度以上纖維化。排除標準：明確合并其他病毒性肝炎者，近6個月行抗病毒或免疫抑制治療者，失代償期肝硬化者，罹患結締組織病、惡性腫瘤者，血小板<5×1012/L者，血紅蛋白<80 g/L者。隨機將患者分為觀察組、對照組各60例。兩組臨床資料具有可比性。

1.2 治療方法 兩組均給予免疫調節、抗炎保肝、抗纖維化及對癥支持治療，同時口服利巴韋林250 mg，3次/d。對照組在此基礎上皮下注射普通干擾素(重組人干擾素α-2b注射液)3×106IU/d，連用4周后改為3次/周；觀察組皮下注射聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg，1次/周。兩組均連續治療6個月。

1.3 相關指標觀察

1.3.1 病毒學反應 治療第4、12、24周時清晨抽取空腹靜脈血，檢測血清病毒學反應。治療4周時HCV-RNA轉陰(<50 IU/mL)為快速應答，其余為緩慢應答。完全應答指治療4周時HCV-RNA陽性，但治療12周時轉陰(<50 IU/mL)；部分應答指治療12周時HCV-RNA陽性，但比治療前下降≥2 log10IU/mL；無應答指治療12周時HCV-RNA下降<2log10IU/mL。持續應答指停藥24周HCV-RNA仍保持陰性。

1.3.2 血清炎癥細胞因子 治療前及治療6個月清晨抽取空腹靜脈血2 mL，3 000 r/min離心5 min，取血清，-80 ℃冰箱保存待檢。采用ELISA法檢測γ干擾素、γ干擾素誘導蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α及CRP水平，試劑盒購自北京EIAab生物科技有限公司，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書。

1.3.3 肝功能及抗體水平 取1.3.2中保存的血清，檢測肝功能指標[ALT、AST、總膽紅素(TBil)]。采用熒光定量PCR儀及rt-6000酶標儀檢測HCV-RNA，采用人抗-HCV ELISA定量試劑盒檢測抗-HCV，以OD值表示。

2 結果

2.1 兩組病毒學反應比較 觀察組快速應答52例，緩慢應答8例，對照組分別為43、17例；兩組比較P均<0.05。觀察組完全應答35例、部分應答17例、未應答 8例，對照組分別為22、22、16例，兩組完全應答率比較P<0.05。觀察組中持續應答35例，對照組為24例，兩組比較P<0.05。

2.2 兩組血清炎癥細胞因子水平比較 見表1。

2.3 兩組肝功能及抗體水平比較 見表2。

表1 兩組血清炎癥細胞因子水平比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，#P<0.05。

表2 兩組肝功能及抗體水平比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，#P<0.05。

3 討論

慢性丙肝可導致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發展為肝硬化甚至肝癌。有研究發現，患者感染HCV后不能自行清除，病情最終可發展為終末期肝病[3]。臨床上血清HCV-RNA陽性的丙肝患者無論ALT水平升高還是正常，均需行抗病毒治療。有研究發現，80%以上ALT水平正常的丙肝患者有不同程度的肝損傷，19%的患者可出現中度以上的纖維化，且有10%的患者出現橋接纖維化或肝硬化[4]。抗病毒治療的目的是清除或長期抑制體內的HCV，以改善或減輕肝損害、阻止進展為肝硬化，提高患者的生活質量[5]。干擾素是治療慢性丙肝的常用藥物，但普通干擾素療效持續時間短，且不良反應較多。聚乙二醇干擾素是將支鏈結構的聚乙二醇附著在干擾素分子上，不影響與細胞膜上的干擾素受體結合，還能改變干擾素的藥代動力學，延長半衰期。目前主要用于慢性乙肝及丙肝的治療。

聚乙二醇干擾素可延緩干擾素的體內吸收及消除過程，促進干擾素抑制細胞內病毒復制，同時可增強巨噬細胞吞噬活動、增加淋巴細胞的特異性細胞毒性等一系列免疫調控活動。因此，聚乙二醇干擾素有利于增強機體的病毒學反應[6]。本研究觀察組快速病毒學應答、完全應答及持續病毒學應答均高于對照組，進一步證實了上述觀點。

HCV感染可激活巨噬細胞分泌多種細胞因子，其中IL-6是由單核巨噬細胞、Th2細胞等分泌的多肽類物質，不僅參與炎癥細胞因子的活化，刺激肝細胞合成急性期蛋白，參與炎癥反應，在炎癥反應中起核心調節作用[7]。TNF-α通過增強中性粒細胞趨化作用損傷肝細胞，并促進肝臟成纖維細胞增殖，導致肝纖維化的發生[8]；此外，TNF-α還能通過參與細胞間信號傳遞起免疫調節作用[9]。CRP是典型的細胞炎癥因子，可活化巨噬細胞、T細胞，通過參與免疫應答損傷肝細胞[10]。γ干擾素具有免疫調節作用，可參與病毒性肝炎感染免疫活化、病理學改變的發生、發展過程[11]。IP-10與其受體CXC3結合后可引導CTL遷移至感染的肝組織，進而引起肝細胞的大量損傷[12]。聚乙二醇干擾素通過增加體內γ干擾素水平，促進T細胞增殖，抑制IP-10的趨化作用[13]；還可降低IP-10水平，進而降低其對肝臟的損傷[14]。本研究兩組治療后血清IL-6、TNF-α、CRP及IP-10水平均降低，γ干擾素水平升高，且觀察組效果更明顯。表明聚乙二醇干擾素能更好地抑制炎癥反應的發生。

肝功能是丙肝病情的主要觀察指標。抗-HCV對人體無保護作用，亦是目前丙肝的主要觀察指標之一。HCV-RNA是HCV的遺傳物質，是反映體內感染HCV的直接指標。本研究兩組治療后ALT、AST、TBil、抗-HCV及HCV-RNA均明顯降低，且觀察組降低更明顯。說明聚乙二醇干擾素可更好地抑制體內的HCV，改善或減輕肝損傷。

綜上所述，聚乙二醇干擾素用于慢性丙肝能更好地調節機體免疫功能，改善患者預后。

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