包頭地區奶牛子宮內膜炎致病葡萄球菌耐藥性研究

李玉娟

內蒙古包頭輕工職業技術學院乳品與農牧學院

包頭地區奶牛子宮內膜炎致病葡萄球菌耐藥性研究

李玉娟

內蒙古包頭輕工職業技術學院乳品與農牧學院

從包頭市所屬轄區的奶牛養殖場采集到子宮內膜炎患牛的子宮分泌物120份，對其進行了致病葡萄球菌分離及鑒定，分離出50株葡萄球菌，其中金黃色葡萄球菌32株，凝固酶陰性葡萄球菌18株。在凝固酶陰性葡萄球菌中，產色葡萄球菌8株，腐生葡萄球菌5株，表皮葡萄球菌2株，頭葡萄球菌2株，溶血葡萄球菌1株。針對現狀進行葡萄球菌藥敏試驗。

一、藥敏試驗方法

1.藥物濃度的配置

本試驗所選抗生素的配制方法，保存方法、稀釋濃度梯度均依據美國臨床實驗室標準化協會CLSI 2012年版藥敏試驗標準進行。

2.菌液制備

用移液槍精確移取200μL菌液打入事先準備好的、裝有滅菌肉湯的試管內，在36℃±1℃的恒溫搖床振蕩過夜培養。次日，以滅菌的MH肉湯作為稀釋液，對菌液進行稀釋，使菌液達到0.5麥氏比濁管的濁度。將稀釋好的菌液再按1:100的比例稀釋菌液，配置成含菌量約為1×106CFU/毫升的菌液，備用。

3.MIC值的測定

本試驗采用標準微量肉湯稀釋法測定各受試藥物的MIC值，并在96孔板上完成。試驗設三種對照，分別是MH肉湯對照、不同抗菌藥物對照、菌液對照試驗所選的每種藥物均重復三次，并以ATCC 29213作為質控菌株。本試驗以MH肉湯對照和抗菌藥物對照不長菌，菌液對照變渾濁以及ATCC的最小抑菌濃度MIC在質控范圍內為前提下，若在96孔板中不長菌那個空的藥物濃度即為最小抑菌濃度(MIC)。藥物的控制范圍及配置見表1。

表1 試驗藥物控制范圍、判定標準及配置

二、試驗結果

1.葡萄球菌藥敏試驗結果

本試驗分別選取了11種獸醫臨床常用藥和2種聯合用藥對分離的50株葡萄球菌進行藥物敏感性試驗，實驗結果顯示：青霉素、阿莫西林、氨芐西林的耐藥率均較高，耐藥率分別是98.0%，80.0%及92.0%；而頭孢吡肟、克拉霉素、多西環素的耐藥率均較低，耐藥率為28.0%,38.0%,40.0%;其它耐藥率在40.0%～80.0%之間。本試驗選用的兩種聯合用藥對葡萄球菌均表現出較高的敏感性。

2.葡萄球菌多重耐藥情況

葡萄球菌多重耐藥情況結果顯示，包頭地區多重耐藥情況比較嚴重，耐藥范圍在3～11耐之間。研究顯示，有2株菌同時對11種抗生素耐藥，有1株菌同時對10種抗生素耐藥，有4株菌同時對9種抗生素耐藥，有9株菌同時對8種抗生素耐藥，有7株菌同時對7種抗生素耐藥，有6株菌同時對6種抗生素耐藥，有8株菌同時對5種抗生素耐藥，有11株菌同時對4種抗生素耐藥，有2株菌同時對3種抗生素耐藥。

三、討論

試驗還選擇了臨床上常用的兩種聯合用藥進行體外藥物敏感性試驗。試驗結果顯示兩種聯合用藥均表現出較高的敏感性，耐藥率均在10%～20%之間。因此，在臨床用藥時獸醫應多選用聯合用藥，這樣既可以減少耐藥菌株的出現，又可以減少多重耐藥菌株的流行，最終達到更好的治療效果。

四、結論

分離到的葡萄球菌對青霉素耐藥率最高（98.0%），最低的是頭孢吡肟（28.0%），有多重耐藥菌株檢出，范圍在3～11耐之間；本試驗所選用的兩種聯合用藥均表現出較高的敏感性，耐藥率均小于20%。