高效液相色譜法測定紅景天膠囊中紅景天苷含量

蘇小軍，楊懷鏡

（云南省大理白族自治州食品藥品檢驗所，云南 大理 671000）

高效液相色譜法測定紅景天膠囊中紅景天苷含量

蘇小軍，楊懷鏡

（云南省大理白族自治州食品藥品檢驗所，云南 大理 671000）

目的 建立測定紅景天膠囊中紅景天苷含量的高效液相色譜（HPLC）法。方法 色譜柱為Waters Symmetry －C18柱（150 mm×4．6 mm，5 m），流動相為甲醇 －水(10∶90)，流速為 1．0 mL／min，檢測波長為 215 nm，柱溫為 30℃。結果 紅景天苷進樣量在 0．266 92～6．673 g范圍內與峰面積呈良好線性關系(r＝0．999 9，n＝5），平均加樣回收率為103．63%，RSD為1．19%（n＝9）。結論 該方法簡便、靈敏、有效，可用于紅景天膠囊中紅景天苷的含量測定及質量控制。

高效液相色譜法；紅景天膠囊；紅景天苷

紅景天具有抗輻射作用，能明顯抑制輻射引起的心臟和肝臟過氧化脂質（LPO）的產生，可保護脂質和細胞膜，還具有抗缺氧、抗疲勞、抗菌、鎮痛、延緩衰老、對內分泌系統的雙向調節等作用[1－2]。目前，2003年版《保健食品檢驗與評價技術規范》收載的該品種為通用檢驗標準，缺乏對該類劑型的針對性，為有效控制該保健食品的質量，本研究中建立了高效液相色譜（HPLC）法測定紅景天膠囊中紅景天苷含量，能簡便、有效控制產品的質量。

1 儀器與試藥

Shimadzu LC20A型高效液相色譜儀，四元低壓梯度泵，LCsolution數據系統，SPD－20A型檢測器；GH－252型電子天平（日本AND）；SK5200HP型超聲波清洗器（上海科導超聲儀器有限公司）。紅景天苷對照品（批號為110818－201005，含量99.9%，中國食品藥品檢定研究院)；紅景天膠囊(均為市場抽驗樣品)；甲醇（HPLC），甲醇（AR），水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結果

2．1 溶液制備

精密稱取紅景天苷對照品16.70mg，分置25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液Ⅰ（每1 mL含紅景天苷0.667 3 mg）；精密量取對照品溶液Ⅰ2 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液Ⅱ（每1 mL含紅景天苷0.133 46 mg）。精密稱取樣品0.3 g，置25 mL容量瓶中，加入甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，濾液用0.45 μm的微孔濾膜濾過作供試品溶液。

2．2 色譜條件及系統適用性試驗

色譜柱：WatersSymmetry?－C18柱（150mm×4.6mm，5 μm）；柱溫：30℃；流動相：甲醇－水(10∶90)；流速：1.0 mL／min；檢測波長；215 nm。各組分的保留時間與系統適用性參數見表1和圖1。

圖1 高效液相色譜圖

表1 系統適用性參數

2．3 方法學考察

線性關系考察：精密吸取10，5，2 μL對照品溶液Ⅰ與5，2 μL對照品溶液Ⅱ，分別注入高效液相色譜儀，測定峰面積，以進樣量（Y，μg）為縱坐標、峰面積（X）為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y＝7.706 8－07 X＋0.014，r＝0.999 9(n＝5)。結果表明，紅景天苷進樣量在0.266 92～6.673 μg范圍內與峰面積呈良好線性關系。

精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液Ⅰ5 μL，連續重復進樣 6次，測定峰面積。結果的 RSD＝0.75% (n＝6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一批供試品溶液，于配制后0，4，8，12，16 h時分別進樣 5 μL，測定峰面積。結果的RSD＝0.45%(n＝5)，表明供試品溶液在16 h內穩定性良好。

加樣回收試驗：精密量取對照品溶液（每1 mL含紅景天苷0.645 35 mg）適量，揮盡溶液，再精密稱取已知含量（每1 g含紅景天苷7.799 mg）的同一批樣品9份，分置25 mL容量瓶中，照擬訂方法制備供試品溶液并按擬訂色譜條件測定，計算回收率。結果見表2。

表2 紅景天苷加樣回收試驗結果（n＝9）

2．4 樣品含量測定

精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算。3批成品的測定結果見表3。

3 討論

超聲提取時間確定：分別以超聲處理5，10，15 min提取同一樣品，計算峰面積與取樣量的比值。結果表明，超聲處理10 min與15 min，提取效果無差異，而與超聲處理5 min提取效果差異顯著，故選擇以超聲處理10 min為本試驗的提取時間。

表3 樣品測定結果

方法耐用性考察：按2010年版《中國藥典（一部）》收載的方法（流動相為甲醇 ∶水＝15∶85；檢測波長為275 nm）測定樣品中紅景天苷，結果紅景天苷峰不能與其他物質峰有效分離[3]。考察了Shimadzu LC20A型高效液相色譜儀與Agilent 1100型液相色譜儀分別搭配Synersi Fusion－RP 80柱（150 mm×4.6 mm，4 μm）與Waters Symmetry?－C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）[4－5]，在本試驗條件下分別測定同一樣品的情況，色譜柱不同樣品保留時間有差異，但測定結果一致。

色譜條件選擇：分別考察了以甲醇－水(10∶90)為流動相，以甲醇－0.02 mol／L乙酸鈉溶液(9∶91)為流動相，檢測波長分別為215，275 nm時的樣品分析情況[6－7]。結果顯示，以甲醇－水(10∶90)為流動相時紅景天苷峰與相鄰峰的分離度（2.2）優于以甲醇－0.02 mol／L乙酸鈉溶液(9∶91)為流動相（1.9）；以215 nm為檢測時紅景天苷峰的峰面積和峰高均大于以275 nm為檢測波長時，故本試驗選擇以甲醇－水(10∶90)為流動相，以215 nm為檢測波長[5－8]。

[1]金 萍．紅景天的研究現狀[J]．光明中醫，2011，26（7）：1 508－1 511．

[2]季宇彬，耿 欣，汲晨鋒，等．紅景天研究進展[J]．天津中醫藥，2007，24（1）：81－85．

[3]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（一部）[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010：144．

[4]陶貴榮，趙銀萍，齊建江，等．不同地區紅景天植物紅景天苷含量比較研究[J]．西北植物學報，2010，30（9）：1 902－1 905．

[5]李 青，宋志前，王 超，等．青海產紅景天中紅景天苷及酪醇含量分析[J]．中國實驗方劑學雜志，2011(15)：110－112．

[6]李慧俠．RP－HPLC法測定大花紅景天和長鞭紅景天中紅景天苷的含量[J]．中國藥房雜志，2011，22（43）：4 098－4 099．

[7]方麗波，李成網，張 潔．HPLC法測定復方紅景天膠囊中紅景天苷的含量[J]．安徽醫藥，2011，15（3）：310－311．

Determination of Salidroside in Rhodiola Capsules by HPLC

Su Xiaojun，Yang Huaijing
（Dali Institute for Food and Drug Control，Dali，Yunnan，China 671000）

Objective To establish an HPLC method for the determination of salidroside in Rhodiola Capsules.Methods The Waters Symmetry?－C18column(150 mm×4.6 mm，5 μm)was used with methanol－water（10∶90）as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL／min，the detection wavelength was 215 nm，the column temperature was 30℃.Result The injection volume of salidroside showed good linear relationship with the peak area in the range of 0.266 92－6.673 μg(r＝0.999 9，n＝5）.The recovery rate was 103.63%，RSD was 1.19%（n＝9）.Conclusion The method is simple，sensitive and effective，it can be used for the content determination and quality control of Rhodiola capsule.

HPLC；Rhodiola Capsules；salidroside

R284．1；R286．0

A

1006－4931(2016)02－0066－02

蘇小軍（1981－），男，白族，大學本科，主管中藥師，研究方向為藥品檢驗及質量標準，（電話）0872－2165884（電子信箱）276595451＠qq．com。

2015－05－13)