CD44v6、基質金屬蛋白酶及人類絨毛膜促性腺激素聯合檢測對葡萄胎惡變的診斷價值

劉麗君 王艷軍 宋 濤 趙 鵬

CD44v6、基質金屬蛋白酶及人類絨毛膜促性腺激素聯合檢測對葡萄胎惡變的診斷價值

劉麗君①王艷軍①宋 濤①趙 鵬①

目的：探討細胞粘附分子變異體6(CD44v6)、基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)以及人類絨毛膜促性腺激素(HCG)聯合檢測對葡萄胎惡變的診斷價值。方法：選取30例葡萄胎惡變患者納入觀察組，另選取30名正常妊娠行人工流產者納入對照組，兩組孕周均在12周之內；檢測兩組的HCG、CD44v6、MMP-2及MMP-9水平，并對檢測結果進行比較。結果：觀察組與對照組相比，葡萄胎惡變患者的HCG、CD44v6、MMP-2及MMP-9水平較高，差異有統計學意義(t=2.757，t=3.384，t=3.386，t=2.451；P＜0.05)。結論：葡萄胎惡變患者的血清HCG、CD44v6、MMP-2以及MMP-9水平與正常妊娠行人工流產者相比較高，聯合檢測對臨床葡萄胎惡變的診斷具有指導意義。

葡萄胎惡變；人類絨毛膜促性腺激素；細胞粘附分子變異體6；基質金屬蛋白酶-2；基質金屬蛋白酶-9

[First-author’s address]Department of Gynaecology, Weifang Maternal and Child Health Hospital, Weifang 261000, China.

滋養細胞是人體中一類極為奇特的細胞，與腫瘤細胞類似，同樣具有增殖、分化以及侵襲的特點。妊娠滋養細胞疾病包括葡萄胎、絨毛膜上皮癌、胎盤部位滋養細胞腫瘤以及侵蝕性葡萄胎4大類[1-2]。葡萄胎來源于胎盤絨毛滋養細胞的良性病變，是胚胎外層的滋養細胞發生水腫變性導致絨毛水腫而形成的水泡狀胎塊，多數的葡萄胎病例可以經清宮治愈，但其具有較高的惡變率且生長活躍，容易惡變為侵蝕性葡萄胎和絨毛膜癌，且大部分滋養細胞腫瘤均繼發于葡萄胎[3-4]。目前，雖然對葡萄胎惡變的治愈率較高，但該惡性腫瘤破壞能力強，可通過血行轉移至全身，對于高危的晚期、耐藥及復發患者其病死率仍然較高[5]。對葡萄胎惡變患者的診斷主要依靠監測患者的人類絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，HCG)水平，為此，本研究通過觀察葡萄胎惡變患者的細胞粘附分子變異體6(cell adhesion molecule variant 6，CD44v6)、基質金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2，MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9，MMP-9)以及HCG，探討其在葡萄胎惡變診斷中的應用價值。

表1 兩組血清HCG、CD44v6、MMP-2和MMP-9水平檢測結果(±s)

表1 兩組血清HCG、CD44v6、MMP-2和MMP-9水平檢測結果(±s)

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1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年9月至2015年9月在濰坊市婦幼保健院就診或住院治療的30例葡萄胎惡變患者，將其納入觀察組，平均年齡(28.12±1.32)歲；所有患者均符合宋鴻釗等[6]提出的有關侵蝕性葡萄胎診斷標準，并經病理檢查確診。另選取30名正常妊娠行人工流產者納入對照組，平均年齡(27.84±1.43)歲。兩組孕周均在12周之內，且一般資料相比無差異，具有可比性。所有入組者均同意檢測措施，并簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①患者均符合葡萄胎惡變的臨床診斷標準，并經病理檢查確診；②年齡在18～49歲，無其他婦科器質性疾病；③無心臟器質性疾病、嚴重的心律失常以及其他臟器的重大疾病；④無感染性疾病以及血液系統疾病，無惡性腫瘤。

(2)排除標準：①不符合診斷標準以及不符合納入標準的患者；②年齡＜18歲及＞50歲的患者；③妊娠及哺乳期女性，多次清宮術后的葡萄胎患者；④葡萄胎惡變已發生轉移患者，以及有其他惡性腫瘤或患有明確的感染性疾病的患者；⑤肝腎功能不全的患者；⑥近期有創傷或手術史的患者；⑦不愿接受檢測措施的患者以及精神病患者。

1.3 儀器設備

使用I7600-020生化分析儀(日本日立)；Allegra X-15R臺式冷凍離心機(美國美克曼公司)。

1.4 檢測方法

采集兩組清晨空腹外周靜脈血2 ml，離心取上清；采用放射免疫法應用I7600-020生化分析儀，嚴格按照說明書的操作步驟，檢測血清HCG水平；采用酶聯免疫吸附法檢測血清CD44v6水平；采用雙抗體夾心法檢測血清MMP-2水平和血清MMP-9水平。

1.5 統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析。計量數據以均數±標準差(x-±s)表示，采用t檢驗，計數資料采用%表示。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

(1)血清HCG水平比較。觀察組患者HCG水平為(41.87±12.68)ng/ml，對照組HCG水平為(19.73±5.72)ng/ml，觀察組葡萄胎惡變患者的血清HCG水平較高，兩組比較差異有統計學意義(t=2.757，P＜0.05)。

(2)血清CD44v6水平比較。觀察組患者的血清CD44v6水平為(35.27±11.52)ng/ml，對照組血清CD44v6水平為(15.73±5.13)ng/ml，觀察組葡萄胎惡變患者的血清CD44v6水平較高，兩組比較差異有統計學意義(t=3.384，P＜0.05)；

(3)血清MMP-2水平比較。觀察組血清MMP-2水平為(26.74±10.37)ng/ml，對照組為(10.28±3.39) ng/ml，觀察組葡萄胎惡變患者MMP-2水平較高，兩組比較差異有統計學意義(t=3.386，P＜0.05)。

(4)血清MMP-9水平比較。觀察組血清MMP-9水平為(89.26±21.64)μg/L，對照組為(12.28±19.79) μg/L，觀察組葡萄胎惡變患者血清MMP-9水平較高，兩組比較差異有統計學意義(t=2.451，P＜0.05)。

兩組血清HCG、CD44v6、MMP-2和MMP-9水平檢測結果見表1。

3 討論

我國的葡萄胎惡變發病率為15%左右，存在惡變高危因素時，葡萄胎的惡變率還將增加[7]。HCG是孕卵著床后合胞體滋養葉細胞分泌的一種糖蛋白激素，臨床上根據HCG的水平來進行葡萄胎惡變等腫瘤的診斷[8-9]。本研究結果表明，觀察組患者的血清HCG水平與對照組相比較高，這與之前的報道結果一致。

惡性腫瘤細胞的生物學特征之一是細胞與細胞之間、細胞與細胞外基質之間粘附性發生異常，導致腫瘤細胞從原發部位脫落并向周圍組織轉移[10]。細胞粘附分子CD44是由單一基因所編碼的具有高度異質性的單鏈膜表面糖蛋白家族，其作用是介導細胞與細胞、細胞與細胞外基質之間的粘附[11]。CD44v6分子是一種跨膜糖蛋白，是CD44分子發揮生物學功能的重要結構，膜外區具有與透明質酸結合的功能。近年來研究表明，CD44v6是目前公認的轉移相關因子，同樣也參與了腫瘤細胞的增殖、分化及轉移[12-13]。有研究發現，多數腫瘤的CD44尤其是CD44v6表達水平增高，并被證實其在不同程度上與腫瘤的侵襲和轉移相關[14-15]。CD44v6高表達的癌細胞可能會逃避人體免疫系統的識別進入淋巴結而形成轉移，這可能是CD44v6在葡萄胎的形成及惡變中的作用。本研究結果表明，CD44v6表達明顯高于未發展成侵蝕性葡萄胎和絨癌者，但低于已惡變為惡性妊娠滋養細胞疾病患者。本研究還顯示，葡萄胎惡變患者的血清CD44v6水平與對照組相比較高。在葡萄胎惡變的過程中，存在著CD44v6水平的升高，其內在原因和機制推測為葡萄胎向惡性發展的過程中，CD44v6表達水平逐漸變升高[16]。高表達的CD44v6對腫瘤細胞在轉移中的識別、遷移和定居方向起指令作用，發生遠處轉移，因此，CD44v6陽性的腫瘤細胞具有更強的侵襲和轉移能力[17]。

有研究表明，血清MMP在腫瘤的惡變及轉移中具有重要作用[18]。MMP是一類Zn2+依賴的蛋白水解酶，可以降解細胞外基質的除多糖以外的所有成分，調節其動態平衡。大量研究表明，在許多高轉移的腫瘤中存在著MMP水平的表達異常[19]。血清MMP的表達增強有助于滋養細胞對局部子宮內膜的浸潤，在滋養細胞疾病變化中起著重要的作用，MMP-9是腫瘤侵入過程中的限速酶，在MMP中分泌最多，能夠降解基底膜的主要成分膠原而促進腫瘤的侵襲及轉移[20]。純化的多克隆抗MMP-9抗體可以阻斷滋養層細胞對基質的浸潤，表明MMP-9在滋養層細胞植入中起重要作用。MMP-2在妊娠第6周表達水平較高，可能參與早期滋養細胞的侵入，惡性腫瘤細胞能大量分泌MMP-2和MMP-9，選擇性水解基底膜。本研究檢測結果表明，葡萄胎惡變患者血清MMP-2和MMP-9水平均高于對照組。

本研究通過探討血清CD44v6、MMP-2、MMP-9及HCG聯合檢測對葡萄胎惡變的診斷價值，證實了葡萄胎惡變患者的血清HCG、CD44v6、MMP-2及MMP-9水平與正常人相比較高，對臨床葡萄胎惡變的診斷具有指導意義。在后續的研究中將對本研究得出的結論進行更加深入的探討，為其聯合檢測的結果做出進一步論證。

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The diagnostic value of combined detection of CD44v6, matrix metalloproteinase, human chorionic gonadotropin in malignant transformation of hydatidiform mole by biochemical analyzer/

LIU Li-jun, WANG Yan-jun, SONG Tao, et al// China Medical Equipment,2016,13(12):118-121.

Objective: To investigate the diagnostic value of combined detection of cell adhesion molecule variant 6(CD44v6), matrix metalloproteinases-2 (MMP-2), matrix metalloproteinases-9 (MMP-9) and human chorionic promoting gonad hormone in malignant transformation of hydatidiform mole. Methods: 30 patients of malignant transformation of hydatidiform mole from our hospital were selected into the observation group, and 30 normal pregnancy artificial abortion were selected into the control group. All the selected object gestational weeks were within 12 weeks. The HCG, CD44v6, MMP-2 and MMP-9 levels were detected and compared between two groups. Results: Compared with the control group, HCG(t=2.757, P=0.004), CD44v6 (t=3.384, P=0.001), MMP-2(t=3.386, P=0.001) and MMP-9(t=2.451, P=0.013) levels in the observation group were higher. Conclusion: HCG, CD44v6 MMP-2 and MMP-9 in the serum of malignant change of hydatidiform mole are relatively higher than the patients with normal pregnancy artificial abortion and it has guiding significance to the combined detection of malignant transformation of hydatidiform mole in clinical.

Malignant transformation of hydatidiform mole; Human chorionic gonadotropin; CD44v6; Matrix metalloproteinases-2; Matrix metalloproteinases-9

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.12.034

1672-8270(2016)12-0118-04

R737.33

A

2016-06-06

①濰坊市婦幼保健院婦科 山東 淮坊 261000

劉麗君，女，(1977- )，碩士，主治醫師。濰坊市婦幼保健院婦科，研究方向：婦科腫瘤。