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涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的影響*

2017-01-16 05:22:45歐陽娟蔣紹祖
贛南醫學院學報 2016年6期
關鍵詞:模型

歐陽娟,蔣紹祖

(贛南醫學院生理學教研室,江西 贛州 341000)

涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的影響*

歐陽娟,蔣紹祖

(贛南醫學院生理學教研室,江西 贛州 341000)

目的:探討涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的作用。方法:將30只雄性SD大鼠隨機分為對照組、模型組、涌泉組,每組10只。對照組每天給予基礎飼料喂養,其余2組每天給予高脂飼料喂養。喂養2周后涌泉組給予穴位埋針7天,治療結束后,檢測肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性與丙二醛(MDA)含量。結果:與模型組相比,涌泉穴位埋針可顯著升高肝臟SOD、GSH-PX的活性 (P<0.05),而肝臟MDA含量明顯降低(P<0.05)。結論:在高脂血癥情況下,涌泉穴位埋針可調節肝臟SOD、GSH-PX與MDA水平,其機制可能與促進特定臟器的自由基代謝有關。

穴位埋針;高脂血癥;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽過氧化物酶;丙二醛

高脂血癥是脂質代謝紊亂的結果,是血漿脂質中一種或多種成分的濃度超過正常高限的一種病癥。它是一種常見的多發性疾病,與冠心病、高血壓病、腦卒中、糖尿病的發生率有緊密的相關性,其危害日益受到醫學界的注意和重視。祖國醫學研究認為,高脂血癥主要病機是痰瘀內停[1-4],而痰邪的形成與中醫脾、肺、肝、腎等臟器的功能失調有關,尤其與脾相關。目前臨床主要以口服藥物進行治療,但長期口服藥物治療,對肝腎功能影響大,不良反應多,非藥物治療措施的研究引起人們的關注。本課題組前期實驗顯示內關穴位埋針可以調節高脂血癥大鼠SOD、GSH-PX和MDA。不少學者認為肝臟功能失調與高脂血脂有密切關系,有報道針刺高血脂大鼠的涌泉穴位,可明顯降低TC、TG,有調節血脂的作用[5]。因此,本實驗采用“涌泉”穴位埋置皮內針(锨針)的方法,觀察其對肝臟的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性與丙二醛(MDA)含量的影響,探討刺激“涌泉”穴位的降血脂作用,以期進一步揭示涌泉穴位降血脂作用的機制。

1 材料與方法

1.1 材料 健康SD大鼠30只,雄性,體重180~220 g,由贛南醫學院實驗動物室提供,動物合格號(SCXK贛2014-0001)。基礎飼料和高脂飼料均由北京科奧協力有限公司提供,高脂飼料組成:85%基礎飼料、7.5%豬油、2%膽固醇、0.5%去氧膽酸鈉、5%蛋黃粉。皮內針(锨針)、MIKR022型臺式冷凍離心機(Germany)、80-2型離心機(上海手術器械廠)、Moae1550型酶標儀(美國BIO-RAD公司)、電動勻漿機、KD-200AW制冰機(德國FOCUSUN)、九十六孔培養板(costar公司)、蛋白定量試劑盒(北京天根生化科技有限公司)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)與丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 方法 將SD大鼠30只隨機分成對照組、模型組、涌泉組,每組10只。對照組每天基礎飼料喂養及普通飲水,不作任何處理;其余各組均喂食高脂飼料及普通飲水。造模時間2周,造模成功后,涌泉組以涌泉穴位埋針7天。治療7天后取材:所有大鼠在取材前稱重,用10%水合氯醛(0.35 mL·100 g-1)腹腔麻醉,無菌取血與摘取肝臟,稱取濕重。不抗凝血通過高速離心(溫度-4 ℃、轉速3 500 r·min-1、時間10 min),取上層血清;肝臟放入勻漿機中,加入生理鹽水勻漿成10%的組織液,靜置后離心(溫度-4 ℃、轉速3 500 r·min-1、時間10 min)。將離心后的上清液移出,放-70 ℃冰箱待測。SOD、GSH-PX與MDA檢測:按照試劑盒說明書,用分光比色法測定。

1.3 統計方法 用SPSS 13.0統計軟件進行數據處理,所有數據用均數±標準差表示,組間數據比較用單因素方差分析,P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD作用 結果顯示:與對照組比較,模型組大鼠肝臟的SOD活性顯著降低(P<0.05);與模型組比較,涌泉組大鼠肝臟SOD活性明顯升高(P<0.05)(見表1)。

表1 各組大鼠肝臟SOD活性比較±s

與對照組比較,*P<0.05;與模型組比較,△P<0.05。

2.2 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟GSH-PX的作用 結果顯示:與對照組比較,模型組大鼠肝臟的GSH-PX活性顯著降低(P<0.05);與模型組比較,涌泉組大鼠肝臟GSH-PX活性明顯升高(P<0.05)(見表2)。

表2 各組大鼠肝臟GSH-PX活性

與對照組比較,*P<0.05;與模型組比較,△P<0.05。

2.3 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟MDA的作用 結果顯示:與對照組比較,模型組大鼠肝臟的MDA含量顯著升高(P<0.05);與模型組比較,涌泉組大鼠肝臟的MDA含量明顯降低(P<0.05)(見表3)。

表3 各組大鼠肝臟 MDA含量

與對照組比較,*P<0.05;與模型組比較,△P<0.05。

3 討 論

藥物治療與非藥物治療是高脂血癥目前的防治措施,前者主要調脂藥物有貝特類、他汀類以及中成藥,但是長期服用藥物對肝、腎功能影響大;非藥物治療有針刺治療,它有操作簡單、不良反應少等優點。超氧化物歧化酶(SOD)是體內特異清除氧自由基的抗氧化酶,對機體的氧化與抗氧化平衡起著重要作用,并能把超氧陰離子自由基歧化生成過氧化氫,過氧化氫則由體內的過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)進一步轉化為水[6],丙二醛(MDA)是脂質過氧化物的降解產物,反映出機體脂質過氧化的程度。SOD、GSH-PX活性和MDA含量反映機體脂質過氧化程度,同時也可以間接反映機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度,及清除自由基的能力。

我們發現,涌泉穴位埋針7天后,肝臟的SOD、GSH-PX活性和MDA含量呈現了一種有意義的變化,即涌泉穴位埋針使肝臟SOD與GSH-PX的活性顯著升高,MDA含量明顯降低,與模型組比較差異有顯著性意義。肝臟是脂類代謝的主要器官,本實驗模型為高脂血癥模型,自由基的代謝必然旺盛。涌泉穴位埋針后肝臟SOD、GSH-PX活性相應多,MDA降解增加。中醫認為高脂血癥主要病機是痰瘀內停,在治療中采用健脾利濕、化痰祛瘀法為指導,滋補肝腎以絕痰生成之。傳統中醫理論認為肝主情志,所以如果情志失調、肝失疏泄,可導致氣機郁滯、血行不暢、津留為痰,不少學者提出肝臟功能失調與高脂血癥的形成也有密切關系[7]。涌泉穴為足少陰經之井穴,具有滋腎水、引火下行的作用。我們的實驗結果提示,涌泉穴位埋針對肝臟SOD、GSH-PX活性與MDA含量是促進其自由基代謝的結果,作用的靶點可能主要在肝臟。

[1] 吳元潔,王正,王玉風,等.“痰濁”與高脂血癥相關性初探[J].中醫藥臨床雜志,2004,16(3):201-202.

[2] 尹方,陳學忠,楊俐.從腎虛血淤辯治高脂血癥[J].四川中醫,2006,24(1):25-26.

[3] 王加鋒,郭煒,展照雙,等.茯苓澤瀉加大黃山楂湯對高脂血癥大鼠血脂的影響[J].吉林中醫藥,2012,32(4):395-397.

[4] 謝建華.高脂血癥洽痰六法驗案舉隅[J].江蘇中醫藥,2010,42(2)234-235.

[5] 陳蓉,王智彪.針刺高血脂大鼠涌泉穴對血脂水平的影響[J].時珍國藥國藥,2011,22(4):984-986.

[6] 解桔萍,李蔚,農艷,等.豐隆穴對高脂血癥大鼠不同臟器SOD、MDA 的影響[J].中國針灸,2008,4(28):293-296.

[7] 王劍波,吳克明,陳志霞,等.耳穴辨證配合涌泉穴位磁貼治療輕中度高血壓療效評價[J].中國中醫藥信息雜志,2014,21(12):25-26.

Effects of Needle-embedding Therapy of Yong quan on SOD, GSH-PX and MDA in Liver of the Hyperlipemia Rats

OUYANG-Juan,JIANGShao-zu

(Dept.ofPhysiology,GannanMedicalUniversity,GanZhou,Jiangxi341000)

Objective: To probe effects of needle-embedding therapy of Yongquan on SOD, GSH-PX and MDA in liver of the hyperlipemia rats. Methods: Thirty SD rats were randomly divided into 3 groups, a control group, a model group and a Yongquan group; 10 rats in each group. The hyperlipemia rat model was prepared by feeding high fat forage. The control group was fed by basic forage each day, and other 2 groups were fed with high fat forage each day.After the rats were fed for 2 weeks, needle was given at"Yongquan" in the rats of the Yongquan group for 7 days. At the end of the treatment, the SOD and GSH-PX activities and MDA contents in liver were tsted. Results: Compared to the control group, pointing needle at Yongquan significantly increased SOD and GSH-PX activities in liver and significantly decreased MDA content in liver.Conclusion: Pointing needle at Yongquan regulates SOD and GSH-PX activity and MDA content in liver of the hyperlipemia rats. It is related with promoting metabolism of free radiations in special organs.

point needle; hyperlipidemias; Superoxid Dismutase; Glutathione peroxidase; Malondialdehyde

國家自然科學基金(NO.31060144);江西省教育廳科學技術研究項目(GJJ09326)

蔣紹祖,男,副教授。E-mail:jsz1846_cn@sina.com

R245.3

A

1001-5779(2016)06-0858-03

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.06.006

2016-04-07)(責任編輯:敖慧斌)

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