超聲介導下對正常犬行肝臟活組織檢查

蘇 喆 ， 葉曉敏 ， 謝富強

(1.中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193； 2.河南牧業經濟學院，河南鄭州450046)

超聲介導下對正常犬行肝臟活組織檢查

蘇 喆1， 葉曉敏2， 謝富強1

(1.中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193； 2.河南牧業經濟學院，河南鄭州450046)

超聲介導活組織檢查分為細針抽吸活組織檢查(FNA)及組織芯活組織檢查(TCB)。國外獸醫已經將其作為臨床常規診斷方法。近年來，國內獸醫應用超聲介導FNA越發普及[1]，但TCB應用較少，且國內關于兩種活組織檢查方法安全性、術后恢復情況評估的研究依然不足。本文通過對正常犬肝臟組織及局部壞死灶模型進行超聲介導活組織檢查，分別評價此操作的安全性、準確性以及TCB術后恢復情況。

1 試驗方法

1.1 試驗動物分組 本試驗選用12只小型成年雜種試驗犬，隨機選取6只試驗犬作為造模組，用于準確性研究；6只試驗犬作為非造模組，用于安全性研究。

1.2 肝臟局部壞死灶模型制作 全身麻醉后超聲介導下向造模組試驗犬左肝外葉腹側、背側及右肝外葉腹側、背側局部注射70%乙酸-氯化鈉溶液(0.05 mL/次)，制作肝臟局部壞死灶模型。

1.3 FNA 超聲介導下對造模組試驗犬肝臟局部壞死灶模型及非造模組試驗犬肝臟相同部位進行FNA。術后即刻進行超聲檢查；術后5 h進行超聲、血液常規檢查；術后24、48、72 h進行超聲、血液常規、血液生化檢驗。將活檢所得樣本進行細胞學檢查。

1.4 TCB 兩組試驗犬于FNA術后1周進行肝臟TCB。全身麻醉后超聲介導下對造模組試驗犬肝臟局部壞死灶模型及非造模組試驗犬肝臟相同部位進行TCB。術后定期對試驗犬進行影像學、血液學檢驗。將活檢所得樣本進行組織學檢查。

1.5 剖檢 于術后第2、4、6周隨機選擇兩組試驗犬各1只實施安樂死并進行剖檢，于術后第8周將剩余兩組試驗犬各3只實施安樂死并進行剖檢。取肝臟活檢部位及正常肝臟組織樣本進行組織學檢查。

2 試驗結果

2.1 肝臟局部壞死灶模型 于注射后即刻對相應部位進行超聲檢查，可見注射部位回聲顯著增強、局部伴不潔聲影、與周圍正常組織界限清晰可辨。24 h后再次進行超聲檢查，可見局部壞死灶呈橢圓形至不規則邊界清晰的強回聲區，大小較為固定(直徑0.51±0.03 cm)。

2.2 FNA

2.2.1 FNA準確性 本研究中造模組試驗犬共6只，肝臟局部壞死灶模型共24個。FNA活檢共27次，其中穿刺失敗3次(1次穿刺失準，2次樣本不合格)。本研究中肝臟FNA準確率為24/27(88%)。

造模組細胞學涂片可見大量紅染的滲出或細胞壞死崩解后產物。細胞成分包括正常的肝細胞及壞死細胞(見中插彩版圖1)。非造模組細胞學涂片均為正常肝細胞。

2.2.2 FNA安全性 穿刺過程中及穿刺完畢出針后即刻對穿刺部位進行超聲檢查以監測積液、出血等活組織檢查并發癥。術后即刻、5、24、48、72 h進行超聲檢查，其中部分犬肝臟周圍出現微量積液及穿刺路徑少量氣體殘留，基本于穿刺后72 h之內逐漸減小直至消失。對比術前術后測量數據差異不顯著，肝臟形態無明顯改變。術后5 h檢查試驗犬紅細胞壓積(HCT)與術前檢查所得數據進行對比，部分犬術后HCT較術前有所下降，但仍處于正常范圍內；下降幅度均未達到術前檢查數據的10%，結合超聲檢查結果得出未見嚴重出血的結論，無需進行手術或藥物干預。

2.3 TCB

2.3.1 TCB準確性 本試驗中造模組試驗犬共6只，肝臟局部壞死灶模型共24個。TCB活檢共31次，其中穿刺失敗7次(3次穿刺失準，4次樣本不合格)。本試驗中肝臟TCB準確率為24/31(77%)。

造模組組織學切片可見出血及壞死肝組織(見中插彩版圖2)。非造模組組織學切片為正常肝組織。

2.3.2 TCB安全性 穿刺過程中及出針后即刻對穿刺部位進行超聲掃查以監測積液、出血等活組織檢查并發癥。與FNA結果相似，部分試驗犬穿刺部位于術后出現無回聲暗區，且無回聲暗區基本于術后72 h之內逐漸減小直至消失。結合血液學檢查及超聲檢查得出未見嚴重出血的結論，無需進行手術或藥物干預。

2.4 活檢術后恢復情況 造模組犬肝臟受壞死灶影響，難以評價TCB活檢部位恢復情況。故于TCB術后2、4、6、8周對非造模組犬實施安樂死并進行尸體剖檢。眼觀活檢部位未見結締組織粘連，針孔處隨時間變化逐漸平滑，顏色逐漸與周圍肝組織一致。

取活檢部位肝臟組織進行組織學檢查(見中插彩版圖3)。總體結果恢復時間越長，針道直徑越小、修復情況越好。遺憾的是，于第8周剖檢所得樣本中結締組織均未完全充滿整個針道、紅細胞溶解的情況依舊持續存在。根據結締組織、新生血管、組織細胞及紅細胞溶解的程度可得出損傷未完全修復的結論。

3 分析與討論

3.1 超聲介導肝臟活檢準確性 比較本試驗肝臟FNA、TCB穿刺準確率可知FNA穿刺準確率高于TCB。FNA穿刺針(18～22G)直徑小，穿刺時無需用力即可輕易穿透皮膚、腹壁及靶器官包膜，且對固定靶器官要求較低[2]。TCB活檢針(14～18G)直徑大，即使預先做皮膚切口，在穿透腹壁、靶器官包膜時亦需要用力較大，否則靶器官容易移位。

3.2 超聲介導肝臟活檢安全性 Watson等人認為，發生血小板減少癥(血小板計數小于120×109/L)或凝血障礙(活化部分凝血活酶時間APTT大于18 s，凝血酶原時間PT大于9.1 min)時為活檢禁忌癥，應謹慎進行風險評估[3]。本試驗中試驗犬均體況良好、術前檢查未見明顯異常，故試驗中未出現嚴重并發癥，無需手術干預或用藥治療。Christensen等人指出也可在術前12 h使用維生素K進行保護性用藥[4]。

超聲檢查表明，在試驗條件下，活組織檢查并發癥少且程度輕微。實時超聲掃查中可見穿刺部位出現無回聲暗區。根據靶器官的性質判斷應為少量出血或積液。該超聲征象僅出現在活組織檢查完畢即刻及術后5 h，一般于術后24 h便無法探查。推斷其原因有兩點：一是出血或積液量很少，散布在腹膜腔中迅速吸收；二是出血后形成散在的血凝塊，其超聲征象不易與周圍軟組織區分。無論是FNA還是TCB，出針后應立即用無菌紗布或止血明膠[5]壓迫穿刺部位，壓迫時間應根據靶器官、進針位點皮膚組織情況適當調整。TCB術后壓迫時間可較長，待未見出血后再進行超聲檢查。

術后血液學檢查結果表明，FNA、TCB對靶器官功能影響差異不顯著。

3.3 肝臟活檢術后組織恢復情況 術后第2天活檢部位超聲征象便與術前檢查無明顯差異，但剖檢與組織學切片顯示損傷尚未修復。本試驗試驗犬靶器官損傷于術后8周仍未恢復，故8周內對同一部位進行連續活檢無臨床診斷意義。

[1] Cuccovillo A , Lamb C R. Cellular features of sonographic target lesions of the liver and spleen in 21 dogs and a cat[J]. Veterinary Radiology & Ultrasound, 2002. 43(3): 275-278.

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[3] Watson A T, Penninck D, Knoll J S,etal. Safety and correlation of test results of combined ultrasound-guided fine-needle aspiration and needle core biopsy of the canine spleen[J]. Veterinary Radiology & Ultrasound, 2011， 52(3): 317-322.

[4] Christensen N I, Canfield P J, Martin P A,etal. Cytopathological and histopathological diagnosis of canine splenic disorders[J]. Australian veterinary journal, 2009， 87(5): 175-181.

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2016-03-24

國家重點研發計劃(2016YFD0501010)

蘇喆(1989-)，男，碩士，從事小動物臨床影像診斷工作，E-mail：sz1412@126.com

謝富強，E-mail: xiefuqiang@cau.edu.cn

4.4

B

0529-6005(2017)03-0078-02