基于MspA蛋白質納米孔傳感器的主客體化學研究

段靜+卓莎+姚付軍+張亞妮+亢曉峰

摘 要 以大腸桿菌原核系統表達的方法制備了MspA蛋白質納米孔， 并利用表面活性劑高溫提取獲得高活性MspA蛋白納米孔。實驗結果表明， 0.5%的提取劑90℃提取30 min為最佳提取條件。利用制備的MspA納米孔在單分子水平上研究了其與多種環糊精的相互作用， 結果表明， 在眾多環糊精分子中， 全6氨基β環糊精（am7βCD）與MspA蛋白納米孔相互作用較強且阻塞平臺較一致， 其滯留時間隨電壓增大而逐漸減小， 但阻塞電流受電壓影響不大。篩選使用am7βCD作為適配體非共價鍵裝配MspA納米孔， 在單分子水平上研究主客體化學反應。加入am7βCD后， 當鹽酸金剛烷胺小分子濃度為50 nmol/L時，即出現二級阻塞平臺， 其滯留時間隨電壓增大而逐漸減小。這種新型蛋白質納米孔單分子傳感器可用于有機小分子的檢測識別， 極大拓寬了MspA納米孔分析技術的的應用范圍。endprint