三種角膜修復(fù)劑促角膜損傷修復(fù)的臨床效果觀察*

王小東,李宏松,程 鈺,鹿子康,趙俊宏

西安市第一醫(yī)院(西安710002)

三種角膜修復(fù)劑促角膜損傷修復(fù)的臨床效果觀察*

王小東,李宏松,程 鈺,鹿子康,趙俊宏

西安市第一醫(yī)院(西安710002)

目的：觀察三種常用角膜修復(fù)劑治療干眼癥引起的角膜上皮損傷的臨床效果。方法：160例(211只眼)具有角膜上皮損傷的干眼癥患者隨機(jī)分為四組,分別使用三種不同的角膜修復(fù)劑(重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液、小牛血去蛋白提取物眼用凝膠、0.3%玻璃酸鈉滴眼液)及安慰劑(0.1%玻璃酸鈉)治療1周。在治療前后均使用活體共聚焦顯微鏡檢查,觀察記錄角膜表層上皮細(xì)胞形態(tài),并對(duì)圖像進(jìn)行分析、記錄。結(jié)果：治療前四組之間角膜表層上皮細(xì)胞密度、角膜表層上皮細(xì)胞面積比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；治療后,治療組較對(duì)照組單位面積的角膜表層上皮細(xì)胞數(shù)明顯增多,角膜表層上皮細(xì)胞面積明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 治療組間,小牛血去蛋白提取物眼用凝膠組較其他兩組單位面積的角膜表層上皮細(xì)胞數(shù)明顯增多,角膜表層上皮細(xì)胞面積明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其他兩組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：三種角膜修復(fù)劑在治療角膜損傷時(shí)均有明顯效果,其中以小牛血去蛋白提取物眼用凝膠療效最優(yōu)。

干眼癥是指任何原因造成的淚液質(zhì)或量異常或動(dòng)力學(xué)異常,導(dǎo)致淚膜穩(wěn)定性下降,并伴有眼部不適和(或)眼表組織病變特征的多種疾病的總稱[1]。嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致角膜上皮剝脫而有絲狀物粘附,這種損傷日久則可造成角結(jié)膜病變，并會(huì)影響視力[2]。干眼癥引起的角膜上皮損傷較其他疾病引起的角膜損傷比較輕微,并且相對(duì)容易治療。目前臨床常用的角膜修復(fù)劑主要分為三種：生長(zhǎng)因子、血清、高濃度玻璃酸鈉。代表的滴眼液分別為：重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液、小牛血去蛋白提取物眼用凝膠、0.3%玻璃酸鈉滴眼液。它們的促角膜修復(fù)機(jī)制不同,本研究通過(guò)隨機(jī)分組使用不同角膜修復(fù)劑治療,探討它們?cè)谥委熜Ч鲜欠翊嬖诓町悺?/p>

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 收集2015年2月到2016年8月門診診斷具有角膜損傷的干眼癥患者160例(211只眼),其中男56例(61只眼),平均年齡(45±16.5)歲,女104例(150只眼),平均年齡(48±9.6)歲,按隨機(jī)數(shù)表法隨機(jī)將患者分為四組,重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液組(A組)、小牛血去蛋白提取物眼用凝膠組(B組)、0.3%玻璃酸鈉滴眼液組(C組)和對(duì)照組(D組，0.1%玻璃酸鈉滴眼液)。患者納入標(biāo)準(zhǔn)：明確診斷的干眼癥患者；角膜熒光染色,角膜具有散在點(diǎn)染的患者；自愿接受檢查,同意作為研究對(duì)象的患者；能夠按時(shí)隨訪的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：患干燥綜合征、類風(fēng)濕病等影響腺體分泌的全身疾病,有明確感染、外傷等眼表角膜疾病的患者。

2 研究方法 ①治療方法：所有患者均使用普拉洛芬滴眼液點(diǎn)眼 4次/d 抗炎治療,按角膜修復(fù)劑不同分為四組,分別使用重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液點(diǎn)眼，4次/d,小牛血去蛋白提取物眼用凝膠點(diǎn)眼，4 次/d,0.3%玻璃酸鈉滴眼液點(diǎn)眼， 4 次/d,0.1%玻璃酸鈉滴眼液點(diǎn)眼，4 次/d。治療1周。②共焦顯微鏡檢查及圖像分析：檢查前點(diǎn)奧布卡因表麻眼液1次,開瞼器開眼瞼,使用海德堡全自動(dòng)共焦顯微鏡檢測(cè),檢測(cè)頭涂少許卡波姆凝膠,按米字形從周邊向中央進(jìn)行掃描,檢查并記錄角膜表層上皮細(xì)胞,上皮下神經(jīng)纖維叢[3]。使用海德堡全自動(dòng)共焦顯微鏡自帶圖像分析軟件,對(duì)每例患者100幀圖像進(jìn)行分析記錄平均值,計(jì)算角膜表層上皮細(xì)胞數(shù),角膜表層細(xì)胞面積[3]。

結(jié) 果

1 治療前后各組角膜表層上皮細(xì)胞密度變化 見表1。

表1 治療前后各組角膜表層上皮細(xì)胞密度變化(cells/mm2)

注：與D組比較*P<0.05；與B組比較，△P<0.05

治療前四組之間角膜表層上皮細(xì)胞密度比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)； 治療后,治療組較對(duì)照組單位面積內(nèi)的角膜表層上皮細(xì)胞數(shù)明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 治療組間, B組較其他兩組單位面積內(nèi)的角膜表層上皮細(xì)胞數(shù)明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A組和C組之間的角膜表層上皮細(xì)胞密度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2 治療前后各組角膜表層上皮細(xì)胞面積變化 見表2。治療前四組之間角膜表層上皮細(xì)胞面積比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)； 治療后,治療組較對(duì)照組(D組)角膜表層上皮細(xì)胞面積明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療組間， B組較其他兩組角膜表層上皮細(xì)胞面積明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A組和C組之間角膜表層上皮細(xì)胞面積變化比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

表2 治療前后各組角膜表層上皮細(xì)胞面積變化(mm2)

注：與D組比較,*P<0.05；與B組比較,△P<0.05

討 論

玻璃酸鈉又稱透明質(zhì)酸鈉,廣泛存在于人體中,由N-乙酰葡萄糖醛酸聚合而成的高分子多糖體。目前的研究認(rèn)為玻璃酸鈉滴眼液可以促進(jìn)角膜修復(fù),尤其是0.3%的玻璃酸鈉滴眼液效果較其它濃度明顯[4]。研究表明,0.3%玻璃酸鈉滴眼液不僅可以增加眼表滯留時(shí)間,而且具有良好的流體力學(xué)特性,玻璃酸鈉滴眼液對(duì)角膜的修復(fù)呈濃度依賴性,濃度越高修復(fù)越好[5]。小牛血去蛋白提取物眼用凝膠的主要成分有：低分子肽、寡糖、游離氨基酸等。其對(duì)角膜的修復(fù)作用主要是增加角膜細(xì)胞對(duì)葡萄糖、氧氣的攝取利用,加快能量代謝。牛曉霞等[6]通過(guò)對(duì)不同類型的角膜損傷患者使用小牛血去蛋白眼用凝膠治療的研究,認(rèn)為其療效確切、安全性高。吳偉[7]對(duì)重組人表皮生長(zhǎng)因子與重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液療效對(duì)比研究認(rèn)為,重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液可以更好的促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞的修復(fù),故在生長(zhǎng)因子類滴眼液中我們選擇了重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液。重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(β-FGF)滴眼液屬于多功能生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物家族,能誘導(dǎo)神經(jīng)外胚層和中胚層來(lái)源的細(xì)胞增殖與分化[8]。其分子量約為16 kD,根據(jù)等電點(diǎn)的不同,分成酸性(α-FGF)和堿性(β-FGF)，人和動(dòng)物眼中存在著的FGF，主要由β-FGF起作用,它的作用比α-FGF強(qiáng)10～100倍[8]。FGF受體( FGFR)能與α、β兩種FGF結(jié)合，角膜上皮細(xì)胞有FGF存在,FGFR也存在于人角膜所有成分中[8]。FGF和FGFR結(jié)合后能促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞和角膜細(xì)胞分裂、趨化、移行和傷口愈合[8]。張瀟等[9]研究認(rèn)為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液和0.1%玻璃酸鈉滴眼液在治療干眼癥和LASIK術(shù)后患者時(shí),療效沒有差別,這與我們的研究結(jié)果不同,主要是本研究以角膜上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),而前者以患者的癥狀和淚液檢查為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。目前對(duì)角膜修復(fù)劑療效的研究也多是從癥狀、體征等大體形態(tài)學(xué)進(jìn)行研究,沒有在細(xì)胞學(xué)層面進(jìn)行研究， 細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查較癥狀、體征等大體形態(tài)學(xué)檢查更能準(zhǔn)確、及時(shí)的反應(yīng)細(xì)胞修復(fù)狀態(tài)。目前活體共聚焦顯微鏡檢查能夠快速、安全、準(zhǔn)確的觀察角膜各層細(xì)胞形態(tài),為我們從細(xì)胞學(xué)層面研究角膜損傷愈合提供了一個(gè)很好的方法和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。 我們從細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究，目前臨床常用的三種角膜修復(fù)劑，發(fā)現(xiàn)它們?cè)谥委熃悄p傷時(shí)均有明顯效果， 其中以小牛血去蛋白提取物眼用凝膠療效最優(yōu)。這為我們以后研究角膜損傷愈合的作用機(jī)制提供了一個(gè)基礎(chǔ)。

[1] 張 正,李銀花,丁亞麗,等. 干眼癥的發(fā)病機(jī)制及治療現(xiàn)狀[J].中華眼科醫(yī)學(xué)雜志, 2014,4(2)：106-108.

[2] 劉祖國(guó),楊文照.加強(qiáng)干眼的臨床研究[J].中華眼科雜志,2013,49：865-868.

[3] 王小東,程 鈺,李宏松,等.單純皰疹病毒性角膜炎對(duì)角膜表層上皮細(xì)胞的影響[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2016,45(10):1377-1379.

[4] 忻月華. 0.3%玻璃酸鈉滴眼液對(duì)白內(nèi)障超聲乳化術(shù)后眼表功能恢復(fù)的促進(jìn)作用[D].杭州: 浙江大學(xué), 2015.

[5] 殷越聰. 0.1%、0.3%玻璃酸鈉滴眼液理化特性對(duì)比研究[D]. 蘇州: 蘇州大學(xué), 2015.

[6] 牛曉霞,李云峰,戰(zhàn)露陽(yáng).小牛血去蛋白提取物眼用凝膠治療角膜上皮缺損的臨床觀察[J].國(guó)際眼科雜志,2014, 14(7):1313-1315.

[7] 吳 偉.重組人表皮生長(zhǎng)因子與堿性成纖維生長(zhǎng)因子促進(jìn)角膜上皮損傷修復(fù)及血管新生[D]. 廣州: 南方醫(yī)科大學(xué), 2012.

[8] 庭 剛.小牛血去蛋白提取物眼用凝膠治療角膜上皮缺損的初步臨床研究[D].重慶：第三軍醫(yī)大學(xué), 2007.

[9] 張 瀟,王忠海,李 瑩,等.玻璃酸鈉及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子滴眼液用于單純干眼和LASIK術(shù)后患者的臨床療效[J].眼科, 2014, 23(4)：274-279.

(收稿：2016-09-26)

Effects of three different eye drops on healing corneal injury

Wang Xiaodong,Li Hongsong,Cheng Yu,et al.

The No.1 Hospital of Xi’an(Xi’an 710002)

Objective: To investigate and evaluate the effects of three different eye drops on corneal epithelial wound in dry eye . Methods: 211 eyes of 160 patients with corneal epithelial wound in dry eye were assigned in the study. They were randomly divided into four groups according to different eye drops: Group A(Recombinant Bovine Basic Fibroblast Growth Factor Eye Drops), Group B( Deproteinized Calf Blood Extract Eye Gel) ,Group C(0.3% Sodium Hyaluronate Eye Drops) and Group D(0.1% Sodium Hyaluronate Eye Drops). Group D served as a control while the other groups served as treatment. The count and area of corneal epithelium wound were assessed by laser con-focal microscope examination on the prior treatment and 1 weeks after treatment. Results: Before treatment, the count and area of corneal epithelium wound was no significant deference in the four groups(P>0.05). 1 week after treatment , the count of corneal epithelium in the treatment groups showed significant improvement compared with Group D; the area of corneal epithelium in the treatment groups showed significant decrease compared with Group D(P<0.05). Besides, Group B was more significant than the other treatment groups(P<0.05); group A showed no significant compared with group C(P>0.05). Conclusion: The study suggests that Recombinant Bovine Basic Fibroblast Growth Factor Eye Drops, Deproteinized Calf Blood Extract Eye Gel and 0.3% Sodium Hyaluronate Eye Drops are effective in the treatment of corneal epithelial wound in dry eye. Besides, Deproteinized Calf Blood Extract Eye Ge is the most effective of the three eye drops.

Epithelium,corneal Corneal injuries Fibroblast growth factors Gels Hyaluronic acid

*陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2014K11-03-07)

上皮, 角膜 角膜損傷 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 凝膠劑 透明質(zhì)酸

R772.21

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.02.034