ESAT-6、INF-γ、IL-10聯(lián)合ADA檢測在結(jié)核性腦膜炎早期診斷中的意義

趙 玉，劉玉祥，李 倩，陸連第，王義義

(1.天津市海河醫(yī)院 腦系二科，天津300350；2.國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥防治傳染病重點實驗室，天津300350；3.桐鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院 內(nèi)二科，浙江 桐鄉(xiāng)314500)

ESAT-6、INF-γ、IL-10聯(lián)合ADA檢測在結(jié)核性腦膜炎早期診斷中的意義

趙 玉1,2*，劉玉祥3，李 倩1,2，陸連第1,2，王義義1,2

(1.天津市海河醫(yī)院 腦系二科，天津300350；2.國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥防治傳染病重點實驗室，天津300350；3.桐鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院 內(nèi)二科，浙江 桐鄉(xiāng)314500)

結(jié)核病是因機體免疫功能減弱導致結(jié)核分枝桿菌感染而出現(xiàn)的傳染性疾病。結(jié)核性腦膜炎(TBM)是因結(jié)核分枝桿菌侵襲腦膜所致，由于腦脊液標本較難留取，且細胞數(shù)量較少，導致TBM早期診斷存在一定難度[1]。隨著結(jié)核病防治及卡介苗廣泛接種工作進行，TBM發(fā)病率有所降低，但部分地區(qū)仍較為常見，且多數(shù)患者確診時疾病已進展至晚期，錯過最佳治療時機[2]。TBM發(fā)病與機體免疫應答密切相關(guān)，機體經(jīng)結(jié)核分枝桿菌刺激可產(chǎn)生ESAT-6、INF-γ等免疫應答因子，因此臨床將TBM早期診斷研究重點轉(zhuǎn)向檢測上述因子[3]。本研究選取我院32例TBM患者，通過設(shè)置對照組，探究ESAT-6、INF-γ、IL-10聯(lián)合ADA檢測在TBM早期診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取2015年3月-2016年8月我院收治的32例TBM患者作研究組，另選取同期體檢健康者32例作對照組。研究組男18例，女14例；輕癥15例，重癥17例；年齡13-52歲，平均(32.32±6.11)歲。對照組男19例，女13例；年齡11-53歲，平均(32.24±6.07)歲。對比兩組基線資料，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，可進行對比研究。

1.2 研究組納入及排除標準

(1)納入標準：符合中華醫(yī)學會制定的TBM臨床診斷標準[4]；腦脊液結(jié)核培養(yǎng)結(jié)果呈陽性；簽署知情同意書；(2)排除標準：合并腫瘤疾病者；并發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染者。

1.3 方法

于入院后1 d內(nèi)在無菌調(diào)節(jié)下對兩組行腰椎穿刺處理，取2 ml腦脊液，離心處理(3 000 r/min，10 min)，取上清液置于-20℃環(huán)境內(nèi)儲存待檢；研究組于恢復期再次抽取腦脊液檢測，流程與首次相同；以酶聯(lián)免疫吸附法檢測ESAT-6、INF-γ、IL-10水平，以酶動力學終點法測定ADA水平；對TBM不同時期、不同病情嚴重程度與對照組ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表達水平，各項指標單獨診斷與聯(lián)合診斷準確度差異進行統(tǒng)計。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 對照組與TBM不同時期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表達水平對比

TBM急性期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA水平高于恢復期、對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，TBM恢復期各指標水平與對照組對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),結(jié)果見表1。

表1 對照組與TBM不同時期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表達水平對比

注：與對照組比較，*P<0.05；與TBM恢復期比較，#P<0.05

2.2 對照組與TBM輕癥組、重癥組ESAT-6、INF-

γ、IL-10、ADA表達水平對比

TBM重癥及輕癥組ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表達水平均高于對照組(P<0.05)，TBM重癥組各指標水平均高于TBM輕癥組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，結(jié)果見表2。

表2 對照組與TBM輕癥組、重癥組ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表達水平對比

注：與對照組比較，*P<0.05；與TBM輕癥組比較，#P<0.05

2.3 單獨診斷與聯(lián)合診斷TBM準確度對比

4項指標聯(lián)合診斷準確度90.63%(29/32)高于ESAT-6(65.63%，21/32)，INF-γ(62.50%，20/32)，IL-10(68.75%，22/32)和ADA(65.63%，21/32)。

3 討論

TBM發(fā)病初期無明顯癥狀，病情進展迅速，診斷及治療難度較大。既往多通過細菌培養(yǎng)、腦脊液涂片檢查結(jié)核桿菌，并聯(lián)合頭顱CT等方式對TBM予以診斷，但由于多數(shù)患者無典型癥狀，導致涂片檢查結(jié)核桿菌陽性率較低，而細菌培養(yǎng)用時較長，易造成漏診或誤診。近些年，隨著免疫學研究深入發(fā)現(xiàn)，部分蛋白與細胞因子在TBM發(fā)病與進展中具有重要作用，因此推測通過檢測此類因子水平，可提高TBM診斷準確度。

ESAT-6為結(jié)核桿菌感染初期出現(xiàn)的分泌型低分子蛋白物質(zhì)，廣泛分布于致病性結(jié)核桿菌中，但在牛型分枝桿菌、大部分環(huán)境內(nèi)的分枝桿菌中極少分布，可將其作為結(jié)核桿菌感染標志物。馬江濤等[5]研究發(fā)現(xiàn)，ESAT單獨診斷TBM靈敏度與特異度分別為78.9%與90.0%。INF-γ為大顆粒淋巴細胞及T淋巴細胞經(jīng)結(jié)核抗原刺激作用后生成的一類細胞因子，屬免疫調(diào)節(jié)蛋白，在機體對結(jié)核桿菌細胞免疫中具有重要參與，可提高巨噬細胞與其溶酶體活化程度，促使結(jié)核桿菌抗原進行遞呈。當INF-γ表達水平過高時，可增強免疫反應，損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)。在抗結(jié)核免疫反應過程中，IL-10可抑制巨噬細胞，提高刺激因子表達水平，TBM患者中IL-10的抑制效果可弱化巨噬細胞免疫強度。魏麗玲等[6]認為，IL-10表達水平在活動性結(jié)核病患者血清及肺泡液中異常增高，且其能增加INF-γ含量，促使T細胞增殖。而ADA為機體嘌呤類核苷代謝過程所需的一種重要酶物質(zhì)，能催化腺苷發(fā)生不可逆性脫氧基反應。傅鈺等學者[7]研究證實，ADA表達水平變化對于TBM臨床診斷具有重要意義，其濃度高低可用于評估腦神經(jīng)損傷程度、預后效果等。在劉婷等[8]研究中，ESAT-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ聯(lián)合診斷可將靈敏度提升至89.1%。而本研究結(jié)果顯示，ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA聯(lián)合診斷準確度高于各指標單獨診斷，且TBM不同時期、不同病情程度間具有明顯差異(P<0.05)，有力佐證聯(lián)合檢測ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA在TBM臨床診斷中具有可行性，且有助于評估病情。

綜上可知，聯(lián)合檢測ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA可有效提高結(jié)核性腦膜炎診斷準確度，評估病情嚴重程度，對制定有效干預方案具有指導意義。

[1]劉衛(wèi)國,劉傳寶,王永亮,等.腦脊液單核細胞內(nèi)結(jié)核分枝桿菌早期分泌性抗原檢測對結(jié)核性腦膜炎早期診斷評價[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2016,26(14):3135.

[2]張昆南,文 安,楊 赟,等.ELISA法檢測濃縮腦脊液ESAT-6對結(jié)核性腦膜炎的診斷價值[J].中國神經(jīng)免疫學和神經(jīng)病學雜志,2014,21(5):360.

[3]張春曉,魯廣建,王永亮.腦脊液單核細胞早期分泌性抗原靶-6聯(lián)合腦脊液阿拉伯糖甘露糖脂抗體對結(jié)核性腦膜炎的診斷價值研究[J].實用心腦肺血管病雜志,2015,23(7):15.

[4]中華醫(yī)學會.臨床診療指南(結(jié)核病分冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.52-55.

[5]馬江濤,吳文苑,張立軍,等.ESAT-6、IL-8和INF-γ在結(jié)核性腦膜炎早期診斷中的應用[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2014,24(14):2027.

[6]魏麗玲,姚棉璇,曾 瓊,等.結(jié)核性腦膜炎腦脊液IL-17與IL-10的表達[J].中國醫(yī)師雜志,2016,18(5):731.

[7]傅 鈺,王永斌,何軍蘭,等.聯(lián)合檢測腦脊液中腺苷脫氨酶和結(jié)核桿菌DNA對結(jié)核性腦膜炎的診斷價值[J].臨床內(nèi)科雜志,2014,31(9):625.

[8]劉 婷,向延根,范任華,等.ESAT-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ在結(jié)核性腦膜炎輔助診斷中的意義[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2016,26(10):1420.

1007-4287(2017)02-0197-02

趙玉(1981-)，女，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的診斷與治療。

2016-06-18)

*通訊作者