Sysmex XN-3000全自動血細胞分析流水線血小板聚集報警信息的可信性分析

曹科，羅小娟，李世興，劉新剛，陶明俊，王丹，馬東禮

(深圳市兒童醫(yī)院，廣東深圳 518038)

Sysmex XN-3000全自動血細胞分析流水線血小板聚集報警信息的可信性分析

曹科，羅小娟，李世興，劉新剛，陶明俊，王丹，馬東禮

(深圳市兒童醫(yī)院，廣東深圳 518038)

目的 分析Sysmex XN-3000全自動血細胞分析流水線(以下簡稱XN-3000)血小板聚集報警信息的可信性，并探討其對血小板聚集的最佳診斷閾值。方法 選取血液標本503例份，分別采用XN-3000和人工鏡檢判斷血小板聚集情況。以人工鏡檢結果為金標準，分析XN-3000警示值對血小板聚集的判斷價值，并分析兩種方法檢測結果的關系。繪制受試者工作特征(ROC)曲線，分析XN-3000對血小板聚集的最佳診斷閾值。結果 XN-3000檢測血小板聚集陽性158例份、陰性345例份，人工鏡檢血小板聚集陽性181例份、陰性322例份。XN-3000警示值判斷血小板聚集的敏感性為76.2%，特異性為93.8%，陽性預測值為87.3%，陰性預測值為87.5%，準確性為87.5%。Pearson相關分析顯示，XN-3000警示值與人工鏡檢血小板聚集陽性率呈正相關(r=0.987，P<0.01)。ROC曲線分析顯示，XN-3000警示值判斷血小板聚集的最佳臨界值為80，此時敏感性為87.8%、特異性為91.6%、AUC為0.92。結論 XN-3000警示值判斷血小板聚集的可信性較高，其最佳診斷閾值為80。

全自動血細胞分析儀；血小板聚焦；警示信息

血小板聚集可導致血小板計數(shù)假性降低，容易造成臨床誤診、誤治[1～4]。兒童靜脈血管小且不顯露，患兒采血時常不配合，很容易造成血小板聚集，從而影響檢測結果。為了提高工作效率，實驗室只對血細胞分析儀提示異常信息的血液標本進行選擇性地人工鏡檢，因此儀器對血小板聚集篩查報警信息的準確性就顯得尤為重要[5]。Sysmex XN-3000全自動血細胞分析流水線(以下簡稱XN-3000)檢測血常規(guī)時可提供血小板聚集警示信息并提供不同警示值(0～300)的直方圖[6]，具有檢測速度快、提供參數(shù)多、異常報警信息全、結果準確等優(yōu)點。但目前鮮見其對血小板聚集報警信息可靠性的報道。為此，我們進行了如下研究。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇2016年2～4月深圳市兒童醫(yī)院住院部收集的血液標本503例份，均經EDTA-K3抗凝靜脈血，EDTA-K3濃度為1.5～2.0 mg/mL，檢驗科接收標本時確認標本量充足、無肉眼凝塊。主要儀器：XN-3000購于日本希森美康株氏會社；Olympus BX53光學顯微鏡購于日本Olympus公司。儀器配套校準品、質控品、血常規(guī)檢測試劑：WNR(批號：A5051)、WDF(批號：A6011)、RET(批號：A5021)、PLT(批號：A5030)、WPC(批號：A5022)，稀釋液：WNR(批號：A6005)、WDF(批號：A5033)、SLS(批號：A6003)、DFL(批號：A5010)、WPC(批號：A6001)、DCL(批號：G6068)。

1.2 質量控制 實驗前配套校準品校準血常規(guī)，每日采用配套高、中、低三水平室內質控品監(jiān)測血常規(guī)各參數(shù)的穩(wěn)定性。控制項目均在控。所有結果符合衛(wèi)生部臨床檢驗中心的室間質量評價要求。

1.3 血小板聚集檢測 ①XN-3000檢測： 嚴格按照XN-3000操作規(guī)程，將503例份血液標本上機檢測，儀器自動涂片推片、染色、烘干，以上操作均于標本采集后6 h內完成。記錄XN-3000檢測血小板聚集的警示值，以警示值為110～300判斷為血小板聚集陽性，0～100判斷為陰性。② 人工鏡檢：由2位技術熟練的主管技師對503例份血液標本進行血涂片，瑞氏-吉姆薩染色后顯微鏡下觀察其尾部和體尾交界處，確認是否有血小板聚集。以血涂片中血小板聚集個數(shù)≥5個，并在觀察區(qū)域中出現(xiàn)聚集頻率≥5次判斷為鏡下血小板聚集陽性。

1.4 XN-3000警示值判斷血小板聚集的價值及最佳閾值分析 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。以人工鏡檢結果作為判斷血小板聚集的金標準，采用Kappa檢驗判斷XN-3000警示值和人工鏡檢結果的一致性：Kappa值≥0.75說明兩者一致性相當滿意，≥0.4～<0.75說明兩者一致性尚可，<0.4說明兩者一致性不夠理想[7]。計算XN-3000警示值判斷血小板聚集的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值和準確性。將XN-3000警示值分為0、10～100、110～200、210～300四個等級，采用Pearson相關分析法分析XN-3000警示值與人工鏡檢血小板聚焦陽性率的關系。采用非參數(shù)法計算XN-3000警示值對血小板聚集的判斷價值，以“1-特異性”為橫坐標、敏感性為縱坐標、繪制受試者工作特征(ROC)曲線，分析其最佳診斷閾值；曲線下面積(AUC)<0.7說明判斷價值較差，0.7～0.9說明判斷價值中等，>0.9說明判斷價值較高。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 XN-3000檢測與人工鏡檢結果 Kappa檢驗結果顯示，XN-3000檢測與人工鏡檢結果的Kappa值為0.72，說明兩者一致性尚可。XN-3000檢測與人工鏡檢具體結果見表1。

表1 XN-3000檢測與人工鏡檢血小板聚集結果(例份)

2.2 XN-3000警示值對血小板聚集的判斷價值 XN-3000警示值判斷血小板聚集的敏感性為76.2%(138/181)，特異性為93.8%(302/322)，陽性預測值為87.3%(138/158)，陰性預測值為87.5%(302/345)，準確性為87.5%(440/503)。

2.3 XN-3000警示值與人工鏡檢血小板聚集陽性率的關系 XN-3000警示值為0、10～100、110～200、210～300的血液標本分別為106、239、83、75例份，其中人工鏡檢血小板聚集陽性率分別為9.4%(10/106)、13.8%(33/239)、80.7%(67/83)、94.7%(71/75)。Pearson相關分析顯示，XN-3000警示值與人工鏡檢血小板聚集陽性率呈正相關(r=0.987，P<0.01)。

2.4 XN-3000警示值判斷血小板聚集的最佳診斷閾值 ROC曲線結果顯示，XN-3000警示值為230時，判斷血小板聚集的特異性最高(99.7%)，但敏感性較低(37.0%)。以Youden指數(shù)最大的切點為臨界點，XN-3000警示值判斷血小板聚集的最佳臨界值為80，此時敏感性為87.8%、特異性為91.6%、Youden指數(shù)為0.795、AUC為0.92。見圖1。

圖1 XN-3000警示值判斷血小板聚集的ROC曲線

3 討論

血小板是外周血細胞中體積最小的顆粒細胞，具有黏附和聚集功能，其計數(shù)準確性受檢測方法、血小板形態(tài)等因素的影響。若存在血液未及時充分抗凝(如采血速度慢、采血過程不順利、未充分混勻等)、血液與抗凝劑比例過高、患者合并血栓前狀態(tài)(如高鎂血癥)、標本采集后室溫下放置時間過短等因素[8～10]，血小板常聚集在一起，導致其計數(shù)假性降低，從而造成臨床的判斷失誤，甚至誤診、誤治[10]。血細胞分析儀作為過篩儀器，在檢測血常規(guī)時能否準確提示血小板是否發(fā)生聚集顯得尤為重要。XN-3000是Sysmex最新款的血細胞分析流水線，具有檢測速度快、提供參數(shù)多、異常報警信息全、結果準確等優(yōu)點，但其對血小板聚集預警信息的可靠性評價目前鮮見報道。

因目前國內外尚未對鏡下血小板聚集作出規(guī)定，我們根據(jù)日常工作經驗總結，以血涂片中血小板聚集個數(shù)≥5個，并在觀察區(qū)域中出現(xiàn)聚集頻率≥5次，作為鏡下血小板聚集陽性的判斷標準，以此計算XN-3000警示值。本研究結果顯示，XN-3000警示值判斷血小板聚集的敏感性為76.2%，特異度為93.8%，準確性為87.5%，與人工鏡檢結果的一致性尚可。ROC曲線分析顯示，XN-3000警示值判斷血小板聚集的最佳診斷閾值為80，AUC為0.92，此時判斷血小板聚集的價值較高；隨著XN-3000警示值的升高，人工鏡檢血小板聚集陽性率也逐漸升高，兩者呈正相關。與李寶青等[11]、袁麗萍等[12]研究結果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，XN-3000警示值越高，鏡下血小板聚集陽性率越高。當XN-3000警示值為230時，判斷血小板聚集的特異性接近100%，說明XN-3000警示值可用于初步判斷血小板有無聚集及其嚴重程度。同時本研究結果發(fā)現(xiàn)，部分XN-3000警示值為0的血液標本，人工鏡檢血小板聚集陽性率達9.4%，說明對血小板發(fā)生少量聚集的標本，儀器可能檢測不到，從而造成假陰性。

本研究人工鏡檢結果顯示，血小板聚集陽性的181例份標本中，有19例份XN-3000檢測血小板計數(shù)低于100×109/L(正常值下限)，經重新抽血檢測，結果顯示血小板計數(shù)均高于正常值下限。考慮到兒童抽血相對困難，對于XN-3000檢測血小板計數(shù)高于正常值下限的患兒，本研究并未要求重新抽血檢測，因此可能會造成XN-3000檢測結果的假性偏低，導致臨床醫(yī)生對部分血液病患者(比如血小板增多癥)的誤診、誤治。因此，建議檢驗技師在審核結果時通過對比歷史結果、臨床診斷、儀器警示值等因素綜合判斷是否需要重新抽血復檢。

綜上所述，XN-3000警示值判斷血小板聚集的可信性較高，其最佳診斷閾值為80，對警示值高于80的標本應行人工鏡檢或重新抽血復查等以便為臨床提供準確的檢測報告。與人工鏡檢相比，XN-3000檢測仍存在一定的局限性，其在鑒別血細胞的形態(tài)和結構等方面還不夠完善，對異常細胞的篩檢也不甚理想[13,14]。臨床應根據(jù)血細胞分析儀的性能，建立和完善適合自身需要的全自動血細胞復檢規(guī)則[15]。

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羅小娟(E-mail： luoxiaojuan1983@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.08.030

R446.1

B

1002-266X(2017)08-0091-03

2016-08-10)