犬糞包蟲抗原檢測調查及防治

祁小英 青海省樂都區畜牧獸醫站 810799

犬糞包蟲抗原檢測調查及防治

祁小英 青海省樂都區畜牧獸醫站 810799

包蟲病或稱棘球蚴病，是由帶科棘球屬和泡球屬絳蟲的中絳期（幼蟲）寄生于人和動物而引起的人畜共患寄生蟲病。為了了解樂都區犬包蟲病的感染情況，用酶聯免疫吸附試驗對驅蟲前后的260份犬糞進行了包蟲抗原檢測，檢出陽性4份，陽性率為1.54%。

犬糞；包蟲；酶聯免疫吸附試驗；防治

1 流行病學

據報道，包蟲病有棘球蚴病和泡球蚴病兩種，是嚴重危害人畜健康和妨礙畜牧業生產發展的常見地方病。我國是世界上包蟲病流行范圍最廣的國家之一，包蟲病流行區的面積占我國陸地面積的44.6%，受威脅人口約為8000萬。我國也是世界上包蟲病流行最嚴重的國家之一，按照國際有關組織的劃分屬于高流行區。而青海是畜間特高流行區，牛羊等家畜呈高度感染，犬、狐、狼等犬科動物均易感染棘球絳蟲，野生動物感染也較嚴重。

2 癥狀與病理變化

棘球蚴對人和動物的致病作用為機械性壓迫、毒素作用及過敏反應等。癥狀的輕重取決于棘球蚴的大小、寄生的部位及數量。棘球蚴多寄生于動物的肝臟，其次為肺臟，機械性壓迫可使寄生部位周圍組織發生萎縮和功能嚴重障礙，代謝產物被吸收后，致使周圍組織發生炎癥和全身過敏反應，嚴重者可致死。

3 包蟲抗原檢測

用酶聯免疫吸附試驗對犬糞進行檢測。如果待檢樣品中含有包蟲抗原，就會與包被板上的包蟲抗體及第二步加入的包蟲抗體酶標結合物特異性結合。間接結合在包被板上的包蟲抗體酶標結合物與底物反應的顯色狀況即可反映出樣品中是否含有包蟲抗原。

（1）材料與方法。采集新鮮的犬糞進行測試。診斷液由省動物疫控中心提供，深圳康百得生物科技有限公司生產。試驗器械為電子天平、酶標儀、恒溫箱和我移液器等。

（2）試驗操作準備。采集犬糞樣品。用蒸餾水或去離子水將洗滌液按1∶10稀釋，充分混勻待用。用蒸餾水或去離子水將樣品按1∶1稀釋，充分混勻待用。犬糞樣品需要預先低溫（-70℃以下）冷凍7天以上滅活蟲卵。稱取1g糞便加入1mL樣品稀釋液充分攪拌混勻，靜置10分鐘，再3000rpm離心10分鐘，取上清液待檢。

（3）檢測步驟。加樣反應。樣品孔中每孔加入100uL待檢樣品；空白對照2孔，每孔僅加入100uL樣品稀釋液；陰性對照2孔，每孔僅加入100uL陰性對照品；陽性對照2孔，每孔僅加入100ul陽性對照品。蓋好封板膜，37℃避光反應30分鐘。洗板。甩去孔內液體，每孔注滿規定濃度洗滌液洗板6次，每次均需靜置1分鐘，最后一次甩凈，拍干。加酶反應。除空白對照孔外，其余每孔加酶結合物100uL,蓋好封板膜，37℃避光反應30分鐘。甩去孔內液體，如上洗板，拍干。顯色反應。按所需用量，臨用前取等體積底物和顯示劑充分混勻后每孔加100uL蓋好封板膜，37℃避光反應10分鐘。終止反應。加終止液50uL，以空白對照調零，用酶標儀于450nm波長讀取OD值。

（4）注意事項。試劑盒各組份從冷藏環境中取出時必須平衡至室溫后方可開封啟用。未使用完的試劑組份及時放回2～8℃密封保存。加試劑前應將試劑輕搖、混勻。孵育時必須用封板膜密封板孔，封板膜不可以重復使用。用棄的試劑盒及樣品都應按污染物妥善處理。試劑盒內終止液有腐蝕性，必須小心使用。采集的犬糞樣品若不能及時檢測，應將糞樣低溫（～70℃）凍存，防止腐敗或反復凍融。如犬糞難以溶解，可適當搗碎處理。若沒有低溫冷凍條件，做試驗時一定要做好個人防護，如穿防護服、戴口罩、帽子、手套和腳套等。稱取樣品后的鑷子、剪子和試管架等用火燒烤，一次性防護用品、樣品管等都要焚燒，做無害化處理。

4 結果分析

（1）檢測結果表明我區家養犬有一定程度的棘球蚴感染。驅蟲前犬糞包蟲抗原檢測感染率為3.75%，驅蟲后感染率為0.56%，感染率下降了2個百分點，說明藥物驅蟲對犬包蟲有一定的治療作用。

（2）驅蟲后10月份檢測犬糞包蟲抗原感染率為零，這與鄉鎮獸醫站嚴格落實了省動物疫控制定的“月月驅蟲、犬犬投藥”的要求有關。犬糞的采集時間對檢測結果有很大的影響。據相關實驗，犬驅蟲后第二天采集犬糞進行檢測，因為蟲體破裂，感染率會比驅蟲前更高、更準確。蟲體不成熟，沒有排孕卵節片，感染率陰性。

（3）上述檢測結果只能代表小部分地區的感染強度，要了解全區的感染情況，今后需加大檢測量。

（4）犬糞抗原ELISA檢測法雖然是診斷包蟲感染的一種方法，但是由于采樣和試劑等因素，對準確、大面積診斷有一定的影響，有待完善。

5 防治措施

根據家畜棘球蚴病流行病學情況，按照因地制宜、分類指導的原則，采取以控制傳染源為主，以中間宿主防治、切斷傳播途徑等措施相結合的綜合性防治策略，全面開展家畜棘球蚴病的防治工作，減輕家畜棘球蚴病危害。早期診斷藥物治療可用吡喹酮犬5mg/kg體重，羊用丙硫咪唑驅蟲等。禁止用感染了棘球蚴的動物肝臟和肺臟等組織器官喂犬。對犬定期驅蟲，驅蟲后的犬糞進行無害化處理（深埋或焚燒）。保持畜舍、飼草料和飲水衛生，防止犬糞污染。包蟲病控制的焦點在于家畜間的控制，可以對新生羔羊進行羊棘球蚴病基因工程疫苗免疫。對家畜進行定點屠宰，加強檢疫，對感染有棘球蚴的動物組織和臟器進行無害化處理，污染的污物污水不能任意向河渠排放。