癲癇患者血清白細(xì)胞介素-1β及腫瘤壞死因子-α表達(dá)及其與腦電圖的關(guān)系

鄭 艷 陳 嵐 余 倩

(貴州省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州 貴陽 550002)

癲癇患者血清白細(xì)胞介素-1β及腫瘤壞死因子-α表達(dá)及其與腦電圖的關(guān)系

鄭 艷 陳 嵐 余 倩

(貴州省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州 貴陽 550002)

目的 探討白細(xì)胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α在癲癇患者血清中的表達(dá)水平及其與腦電圖的關(guān)系。方法 61例癲癇患者(癲癇組)、80例急性腦梗死患者(腦梗阻)以及50例健康體檢者(對照組)為研究對象，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定三組血清IL-1β及TNF-α水平，并分析其與腦電圖檢查結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果 癲癇組、腦梗阻患者發(fā)作后1 h的血清IL-1β、TNF-α水平高于對照組，癲癇組高于腦梗阻(P<0.05)；癲癇組、腦梗阻發(fā)作后24 h的血清IL-1β、TNF-α水平低于發(fā)作后1 h(P<0.05)。發(fā)作后1、24 h腦電圖檢查異常癲癇患者的血清IL-1β、TNF-α水平均高于腦電圖檢查正常的癲癇患者，且隨著腦電圖檢查異常的逐漸嚴(yán)重，血清IL-1β、TNF-α水平越高(P<0.05)。經(jīng)Pearson秩相關(guān)分析，腦電圖檢查結(jié)果與血清IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.672、0.738，P<0.05)，癲癇發(fā)作1、24 h后，血清IL-1β與TNF-α均呈正相關(guān)(r=0.785、0.816，P<0.05)。結(jié)論 血清IL-1β及TNF-α在癲癇患者體內(nèi)呈高表達(dá)，并且與腦電圖檢查結(jié)果異常呈正相關(guān)，IL-1β及TNF-α可作為腦電圖檢查的輔助診斷指標(biāo)。

白細(xì)胞介素-1β；腫瘤壞死因子-α；癲癇；腦電圖

癲癇是由腦神經(jīng)元突然發(fā)生間歇性癲樣放電所致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)綜合征，以神經(jīng)元的反復(fù)、過度同步異常放電為主要特征，臨床癥狀呈反復(fù)性和短暫性發(fā)作性〔1，2〕。腦電圖是目前臨床診斷癲癇最重要、最有價值的輔助方式，但主要通過儀器檢測并人為去判讀結(jié)果，可能存在漏診和誤診〔3〕。因此，尋找有效的血清學(xué)指標(biāo)輔助腦電圖輔助診斷癲癇有重要的意義。有學(xué)者提出神經(jīng)免疫系統(tǒng)功能紊亂與癲癇的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其中白細(xì)胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞分泌的具有重要生物活性的細(xì)胞因子。研究顯示，IL-1β、TNF-α參與了機(jī)體的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞調(diào)節(jié)以及免疫應(yīng)答過程〔4，5〕。旨在探討血清中IL-1β、TNF-α在癲癇發(fā)病過程中的作用及其與腦電圖檢查結(jié)果的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年8月至2016年8月我院收治的61例癲癇患者作為癲癇組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①結(jié)合病史、腦電圖、CT及磁共振成像(MRI)等輔助檢查證實為原發(fā)性癲癇者；②不合并感染、免疫性疾病等可能影響本研究結(jié)果的疾病；③近3個月內(nèi)未接受過免疫抑制劑、激素類等藥物治療者；④不合并有其他腦組織病變者；⑤不合并藥物依賴史及酒精成癮史者；⑥不合并其他嚴(yán)重的臟器功能障礙者。其中男39例，女22例；年齡53～79歲，平均(68.3±5.5)歲；病程1.6～22年，平均(11.3±3.9)年；單純部分性發(fā)作31例，復(fù)雜部分性發(fā)作18例，部分繼發(fā)全面性發(fā)作12例。于同一時期隨機(jī)選取80例急性腦梗死患者為腦梗阻，納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)顱腦CT、MRI檢查確診為急性腦梗死者；②排除腦腫瘤、腦出血等可能影響本研究結(jié)果的疾病；③未接受其他可能影響本研究結(jié)果的藥物治療者。其中男49例，女31例；年齡52～77歲，平均(65.3±7.1)歲。同時期隨機(jī)抽取50例健康體檢者作為對照組，其中男31例，女19例；年齡49～76歲，平均(67.2±6.5)歲。三組性別、年齡等基線資料具有可比性(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血清IL-1β、TNF-α檢測 癲癇組和腦梗阻分別于發(fā)病后1、24 h清晨空腹抽取肘靜脈血3 ml，對照組體檢時于清晨收集肘靜脈血3 ml，2 000 r/min離心10 min，將收集得到的血清置于-80℃環(huán)境下保留，留待檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清IL-1β、TNF-α水平，試劑盒由北京中杉金橋技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行相關(guān)操作。

1.2.2 腦電圖檢查 采用16導(dǎo)數(shù)字化無紙記錄腦電圖儀對三組研究對象進(jìn)行檢查，依據(jù)國際10/20系統(tǒng)安置頭皮電極，并采用常規(guī)單極和雙極導(dǎo)聯(lián)進(jìn)行描記，研究對象在檢查期間作出睜眼、閉眼等反應(yīng)，同時進(jìn)行閃光刺激以及過度呼吸誘發(fā)試驗，每位研究對象被描記的時間均超過20 min。異常的腦電圖評價標(biāo)準(zhǔn)〔6〕：①輕度異常：α節(jié)律呈不規(guī)則或者不穩(wěn)定，無明顯甚至消失睜眼或者抑制反應(yīng)，出現(xiàn)高波幅β波，同時Q波在各區(qū)的活動增加，也可以某個區(qū)為主要活動區(qū)，在過度喚起的時段出現(xiàn)高幅的Q波；②中度異常：α節(jié)律呈明顯的不對稱，在某些地方甚至可能消失，Q波活動呈彌散性，可出現(xiàn)Q波的活動呈陣發(fā)性發(fā)作，在過度換氣后高波幅δ波成群出現(xiàn)；③重度異常：Q波和δ波的活動呈彌散性發(fā)作，α波變慢甚至消失，δ波陣發(fā)性出現(xiàn)并且自發(fā)或者誘發(fā)高波幅棘波、棘慢綜合波、尖波，偶爾會有爆發(fā)性活動。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0軟件進(jìn)行方差分析、t檢驗、Pearson秩相關(guān)分析和Pearson積矩相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清IL-1β、TNF-α水平比較 癲癇組、腦梗組發(fā)作后1 h的血清IL-1β、TNF-α水平高于對照組(F=12.031、10.895，P<0.05)，且癲癇組高于腦梗阻(P<0.05)；癲癇組、腦梗阻發(fā)作后24 h的血清IL-1β、TNF-α水平低于發(fā)作后1 h(P<0.05)。見表1。

表1 各組血清IL-1β、TNF-α水平比較

與對照組比較：1)P<0.05；與腦梗阻比較：2)P<0.05；與發(fā)作后1 h時比較：3)P<0.05

2.2 不同腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、TNF-α水平比較 發(fā)作后1、24 h，腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、TNF-α水平均高于腦電圖檢查正常的癲癇患者，并且隨著腦電圖檢查異常的逐漸嚴(yán)重，血清IL-1β、TNF-α水平越高(P<0.05)，見表2。經(jīng)Pearson秩相關(guān)分析，腦電圖檢查結(jié)果與血清IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.672、0.738，P<0.05)。

表2 不同腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、 TNF-α水平比較

與正常患者比較:1)P<0.05;與輕度異常患者比較:2)P<0.05;與中度異常患者比較:3)P<0.05

2.3 血清IL-1β、TNF-α的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，癲癇發(fā)作1、24 h后，血清IL-1β與TNF-α呈正相關(guān)(r=0.785、0.816，P<0.05)。

3 討 論

全世界人口癲癇的發(fā)病率約為1%～2%〔7〕。腦電圖檢查是目前臨床診斷癲癇最主要的手段。但是關(guān)于癲癇發(fā)病的機(jī)制，目前人們研究較多的是免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)學(xué)說，相關(guān)文獻(xiàn)通過體內(nèi)外癲癇模型以及臨床研究均證實免疫異常參與了癲癇的發(fā)病過程〔8，9〕。研究者發(fā)現(xiàn)，炎癥性細(xì)胞因子在癲癇的免疫學(xué)機(jī)制中發(fā)揮了不可替代的作用〔10〕。IL-1β在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)是由神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞所分泌的具有多種生物學(xué)效應(yīng)的炎癥細(xì)胞因子，研究認(rèn)為IL-1β參與癲癇發(fā)作的機(jī)制主要包括：①IL-1β可以增強谷氨酰胺神經(jīng)元的功能，進(jìn)而促進(jìn)癲癇的發(fā)作以及維持癲癇發(fā)作的時間，IL-1β水平的上升能夠促進(jìn)包括腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長因子等親神經(jīng)性因子的表達(dá)，而上述這些因子在癲癇的發(fā)生過程中有重要作用；②驚厥發(fā)作后星形細(xì)胞以及小膠質(zhì)細(xì)胞可以促進(jìn)IL-1β mRNA的表達(dá)升高，使IL-1β水平升高，進(jìn)而誘導(dǎo)炎癥性反應(yīng)的發(fā)生以及細(xì)胞水腫，同時IL-1β水平的升高也可以誘導(dǎo)其自身的合成，正性反饋的環(huán)路使IL-1β水平再次升高，作用進(jìn)一步增強，IL-1β通過使某些激酶得到激活而形成對海馬神經(jīng)元的谷氨酰胺受體的抑制作用，進(jìn)而興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)而參與癲癇的發(fā)生過程〔11，12〕。研究顯示，TNF-α可以誘導(dǎo)IL-8的表達(dá)并使其分泌量明顯升高，使得在累及的組織內(nèi)免疫細(xì)胞浸潤、聚集并釋放多種具有生物活性的物質(zhì)，并最終造成局部組織的炎癥性反應(yīng)〔13〕。TNF-α參與癲癇的病理生理過程可能涉及以下機(jī)制：① TNF-α可以興奮海馬CA3錐體細(xì)胞，并使抑制性突觸后電位所致的異常癲癇樣放電減弱；②TNF-α通過使膠質(zhì)細(xì)胞中的谷氨酰胺合成酶活性受到抑制，進(jìn)而使谷氨酸的活性增強而參與癲癇發(fā)生；③TNF-α刺激膠質(zhì)細(xì)胞的增生并促使其產(chǎn)生其他與癲癇發(fā)生過程密切相關(guān)的細(xì)胞因子〔14，15〕。

有研究認(rèn)為IL-1β、TNF-α參與了癲癇的發(fā)生過程，也有研究通過meta分析發(fā)現(xiàn)IL-1β與癲癇發(fā)生無明顯關(guān)系〔16〕。本研究結(jié)果提示IL-1β、TNF-α可能參與了癲癇的發(fā)生過程，與有關(guān)研究結(jié)果一致〔17，18〕。本研究說明隨著時間的推移，血清IL-1β、TNF-α水平有逐漸下降的趨勢，可能是因為癲癇、急性腦梗死患者發(fā)病初期病情最猛，隨著時間的推移，病情有略微變緩的趨勢。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，IL-1β、TNF-α與腦電圖檢查結(jié)果有密切的關(guān)系。另外IL-1β、TNF-α可能通過影響神經(jīng)元細(xì)胞的興奮性來參與癲癇的發(fā)生發(fā)展過程，血清IL-1β、TNF-α水平越高，癲癇患者的腦電圖檢查異常越嚴(yán)重。而且IL-1β、TNF-α聯(lián)合檢測可作為腦電圖檢查的重要輔助指標(biāo)。

1 Englot DJ.Continued medical management of drug-resistant epilepsy：implications for surgical consideration〔J〕.Epilepsia，2016；57(9)：1525-6.

2 Swartz BE，Spitz J，Vu AL，etal.Heterogeneity of anatomic regions by MR volumetry in juvenile myoclonic epilepsy〔J〕.Acta Neurol Scand，2016;134(4)：300-8.

3 Asadi-Pooya AA，Xiao F，Zhou D.Real-time effects of centrotemporal spikes on cognition in rolandic epilepsy：an EEG-fMRI study〔J〕.Neurology，2016；87(5)：551-2.

4 Steinborn B，Zarowski M，Winczewska-Wiktor A，etal.Concentration of Il-1β，Il-2，Il-6，TNFα in the blood serum in children with generalized epilepsytreated by valproate〔J〕.Pharmacol Rep，2014；66(6)：972-5.

5 楊海龍，喬麗娜，譚連紅，等.耳穴區(qū)經(jīng)皮電刺激對顳葉癲癇大鼠癲癇發(fā)作頻率及海馬區(qū)白介素-1β、腫瘤壞死因子-α表達(dá)的影響〔J〕.針刺研究，2016；41(4)：283-90.

6 畢明慧，俞正霞，龔 青，等.老年腦梗死繼發(fā)癲癇喊著血清D-二聚體，IL-1β和TNF-α水平與腦電圖嚴(yán)重程度的關(guān)系〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013；13(11)：2110-2，2116.

7 de Goede AA，Ter Braack EM，van Putten MJ.Single and paired pulse transcranial magnetic stimulation in drug na?ve epilepsy〔J〕.Clin Neurophysiol，2016；127(9)：3140-55.

8 Dubey D，F(xiàn)arzal Z，Hays R，etal.Evaluation of positive and negative predictors of seizure outcomes among patients with immune-mediated epilepsy：a meta-analysis〔J〕.Ther Adv Neurol Disord，2016；9(5)：369-77.

9 Tiwari P，Dwivedi R，Mansoori N，etal.Do gene polymorphism in IL-1β，TNF-α and IL-6 influence therapeutic response in patients with drug refractory epilepsy〔J〕.Epilepsy Res，2012；101(3)：261-7.

10 郭 俐，李雪梅，張 蓉，等.血清炎癥因子與老年癲癇患者腦電圖檢查的相關(guān)性研究〔J〕.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015；22(13)：1380-2.

11 井曉榮，靳俊功，李煥發(fā)，等.癲癇發(fā)作間期血清中IL-1β和IL-6水平分析研究〔J〕.立體定向和功能性神經(jīng)外科雜志，2014；27(2)：73-8.

12 Diamond ML，Ritter AC，F(xiàn)ailla MD，etal.IL-1β associations with posttraumatic epilepsy development：a genetics and biomarker cohort study〔J〕.Epilepsia，2015；56(7)：991-1001.

13 劉 姝，蘇慶杰，曾超勝，等.208例成人癇性發(fā)作患者的視頻腦電監(jiān)測結(jié)果分析〔J〕.海南醫(yī)學(xué)，2014；25(20)：2981-3.

14 Ashhab MU，Omran A，Kong H，etal.Expressions of tumor necrosis factor alpha and microRNA-155 in immature rat model of status epilepticus and children with mesial temporal lobe epilepsy〔J〕.J Mol Neurosci，2013；51(3)：950-8.

15 劉益民，王倩倩，賀慧艷，等.經(jīng)皮三叉神經(jīng)電刺激減輕戊四氮誘導(dǎo)的大鼠癲癇發(fā)作并抑制海馬內(nèi)IL-1β和TNF-α的表達(dá)〔J〕.中國病理生理雜志，2014；30(2)：323-7.

16 魏統(tǒng)國，張冰麗，葉紅濤.白細(xì)胞介素1β與癲癇發(fā)作相關(guān)性的Meta分析〔J〕.華西醫(yī)學(xué)，2013；28(12)：1832-6.

17 紀(jì)新博，符碧薇，顧申紅.老年腦梗死繼發(fā)癲癇治療前后D-二聚體IL-1β和TNF-α水平的變化意義〔J〕.中國實用神經(jīng)疾病雜志，2016；19(13)：89-90.

18 Rotenberg A.Commentary on IL-1β associations with posttraumatic epilepsy development：a genetics and biomarker cohort study〔J〕.Epilepsia，2015;56(7)：989-90.

〔2016-09-01修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

陳 嵐(1969-)，女，主任醫(yī)師，主要從事腦血管病研究。

鄭 艷(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事癲癇研究。

R445

A

1005-9202(2017)05-1217-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.084