FQ-PCR法檢測HBV-DNA與HBVM關系的探討

徐 慶 鄒 莉

（谷城縣人民醫院，湖北 襄陽 441700）

FQ-PCR法檢測HBV-DNA與HBVM關系的探討

徐 慶 鄒 莉

（谷城縣人民醫院，湖北 襄陽 441700）

目的探討FQ-PCR法檢測HBV-DNA與HBV血清標志物（HBVM）的相關性。方法對587例臨床血清標本采用FQ-PCR法進行HBV-DNA檢測，同時采用ELISA法進行乙肝免疫學對比檢測。結果血清HBV-DNA水平與HBV血清標志物的表現模式相關。以含有HBeAg（+）的（HBsAg（+）/HBeAg（+）/HBcAg（+））模式和（HBsAg（+）/HBeAg（+））模式的HBV-DNA陽性檢出率最高，分別為91.35%（169/183）和100%（17/17），均顯著高于其他HBVM模式（P＜0.01）。結論HBeAg和HBV-DNA有明顯的相關性，定量檢測HBV-DNA能真實反映HBV復制情況，為乙型肝炎的療效評價提供實驗室依據。

乙型肝炎病毒；FQ-PCR；血清標志物

目前，檢測HBV血清標志物（HBVM）及HBV-DNA是臨床診斷乙型肝炎病毒感染最常見的兩種方法。HBV-DNA一般先于血清標志物出現，且其就方法而言更為靈敏，因此HBV-DNA檢測在早期乙肝感染和抗病毒藥物的療效觀察、病情預測等方面具有重要的臨床價值。但老式的定性PCR具有易污染、假陽性高、試劑制品致癌等缺點，熒光定量PCR（FQ-PCR）正是克服了這些缺點現得到臨床的廣泛應用。本文采用587例臨床標本同時進行FQ-PCR和ELISA法檢測，將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源：選擇2013年10月至2014年12月我院門診乙肝5項查出的HBV不同感染模式者的血清587例，其中男性305例，女性282例，年齡6～79歲。采用無菌負壓管抽取空腹靜脈血5 mL，2 h內送檢。

1.2 方法

1.2.1 HBVM測定：采用ELISA法，試劑盒由中山生物工程有限公司提供；儀器為AP-960全自動酶聯免疫分析儀。

1.2.2 HBV-DNA測定：采用FQ-PCR法，試劑盒由達安基因診斷中心提供，儀器為ABI PRISM 7000全自動熒光定量PCR儀，嚴格按試劑說明書操作，設立陽性、陰性和臨界值對照以及4個標準梯度參控品，實際臨床可信靈敏度為1×10E3copies/mL，檢測HBV-DNA含量范圍在10E3～10E8copies/mL。……