種子質量檢測實操方法

江興龍

（安徽省繁昌縣職業教育中心，241200）

種子質量檢測實操方法

江興龍

（安徽省繁昌縣職業教育中心，241200）

種子質量檢測包括三個方面的內容，即種子生活力的測定、種子凈度分析、種子千粒重的測定。種子生活力的測定包括切種、染色、結果判定幾個步驟；種子凈度分析主要采用四分法分別計算凈種子、其他植物種子以及雜質的含量；千粒重的測定主要是對凈度分析后的小麥種子隨機數取2個重復的小麥種子，每個重復1000粒，然后取其平均數作為小麥的千粒重。種子質量檢測作為全國職業院校農業技能競賽中職組常設項目之一，掌握其檢測方法顯得至關重要。

種子生活力；種子凈度；千粒重

種子質量檢測是全國職業院校農業技能競賽中職組常設項目之一，競賽成績由理論測試和技能操作成績兩部分構成，理論考試主要以《作物種子繁育員》這套教材為藍本，考察學生應知應會的知識；技能實操內容為：在規定時間內完成小麥種子的凈度分析、小麥種子千粒重的測定和小麥種子生活力的四唑測定。在實操競賽中，參賽選手對實操順序的安排至關重要，即應先進行種子生活力的四唑測定，參賽選手先將浸泡好的小麥種子切開，將切開的種子放入恒溫箱中染色，因染色需要0.5～1h，此段時間參賽選手可以進行小麥種子凈度分析和千粒重測定，當小麥種子凈度分析和千粒重這兩步操作完成后，種胚在恒溫箱內染色的時間就充足了，這樣可以為比賽贏得時間，增加獲獎的幾率。現將實際操作方法簡介如下。

1 種子質量檢測需要的儀器

大小燒杯、雙面刀片、鑷子、培養皿、放大鏡、細毛刷、分樣直尺2把、電子天平、吸水濾紙、四唑溶液（也可以用5%紅墨水）。

2 如何測定小麥種子的生活力

2.1 切種子 左手用鑷子握住小麥種子，右手握住雙面刀片，沿小麥種子的腹線將種子縱向平均切開，種子切口要平滑，切位要準確。切種子時，需要墊上砧板，小麥種子切開后，舍棄一半，留下另一半作為待測種子，共切取樣品4個重復，每個重復50粒，種子切好后放入培養皿中，培養皿要貼上標簽。

2.2 種子染色 將切過的種子樣品放入培養皿中，加入0.5%的四唑溶液，并移置到30～35℃恒溫箱中保溫染色，染色時間為0.5～1h，當染色很明顯后，將染色后的種子用清水沖洗2～3次，用清水沖洗時，培養皿蓋子要蓋上，并輕輕搖動培養皿，直到洗液無紅色為止，此項操作需要參賽選手多練習，才能達到游刃有余的地步。

2.3 結果判定

2.3.1 有無生活力判定標準 小麥種胚被染成鮮紅色的為有生活力的種子；小麥種胚未染色部分超過允許的范圍，為不正常的種子；種胚完全未染色的種子為死種子；不正常的小麥種子和死種子均視為無生活力的種子，無生活力的種子即使給予充足的氧氣、適宜的溫度、足夠的水分也不能發芽。

2.3.2 借助放大鏡觀察 觀察需要借助放大鏡。禾本科植物：主要觀察胚，包括胚芽、胚軸、胚根、子葉（盾片）。在實驗操作中，除完全染色者為有生活力的種子外，下列有殘缺的種子也視為有生活力的種子：子葉上部或下部任一端未染色的部分小于1/3；小麥胚根頂端大部分不染色，但不定根的原始體著色的。

用四唑溶液給小麥種子染色，可以比照圖1來鑒定小麥種子的生活力：圖中黑色部分表示染成紅色，為有生活力的種子，白色部分表示未染色的無生活力的種子。有生活力的種子才能發芽，無生活力的種子不能發芽，圖中1～6表示有發芽力；7～16表示無發芽力。

2.3.3 實操易出錯的幾個問題 一是參賽學生種子切得不均勻，沒有從小麥種子腹溝平均切開，結果切得一邊厚，一邊薄，厚的部分含有種胚，薄的部分沒有種胚。如果將薄者作為試樣時，測定的生活力偏低；二是在取舍50%時，沒有細心甄別，有可能把帶有胚的一半丟棄，無胚的保留下來作為待測樣品，這樣測定的生活力也偏低；三是把本來無生活力的種子當成有生活力的種子，導致生活力偏高；四是沒有安排好比賽時間，前松后緊，最后種子染色時間不夠，導致實驗結果誤差很大。

2.3.4 計算方法 根據種胚著色情況，分別計算第1、2、3、4個重復具有生活力的種子百分率。注明重復間的最大允許差距：第1個重復用X1表示，第2個重復用X2表示，第3個重復用X3表示，第4個重復用X4表示，最后求出平均數X。

圖1 小麥種子染色示意圖

3 分析小麥種子凈度

3.1 正確分樣 采用四分法進行小麥送驗樣品的分取。分取方法：取出500g左右小麥送驗樣品，放置在試驗臺上，試驗臺要干凈，不能留有灰塵，然后用直尺分取規定重量的試樣，當供試樣品重量在120.0～130.0g范圍內時方可稱重，稱重的小麥樣品要求精確到1位小數。

3.2 小麥樣品分離 試樣稱重后，將樣品倒在分析臺上，用鑷子按順序逐粒觀察鑒定，將試樣分離成凈種子、其他植物種子和雜質3種成分，分別放入相應的容器內，容器要貼上標簽，以防弄錯。

3.3 樣品稱重與小數點精確位數 種子檢驗規程對小麥種子稱重時的小數點保留問題有明確規定：目前，稱量所用的電子天平只能稱量到小數點后2位數。而種子檢驗規程要求，所稱小麥樣品重量在1.000g以下的應保留4位小數；所稱小麥樣品重量在1.000～9.999g范圍的應保留3位小數；所稱小麥樣品重量在10.00～99.99g范圍的應保留2位小數；所稱小麥樣品重量在100.0～999.9g范圍的應保留1位小數；所稱樣品重量在1000.0g以上的小麥種子應保留到整數。計算結果小數點取舍原則：計算種子凈度百分率時需保留1位小數，并注意修約問題；計算小麥千粒重時保留2位小數；計算小麥種子生活力時應保留整數，不少參賽學生并沒有按照此要求去做。

3.4 計算方法 （1）核查增失差是否超過5%。如果增失差大于5%，就要重做。

（5）填寫原始記載表和結果報告單。原始記載表要用鉛筆填寫，實驗結果報告單用黑色簽字筆填寫。種子凈度分析結果以三種成分的重量百分率表示，其結果保留1位小數，最后還需進行修約。修約的原則：先檢查各種成分百分率總和是否為100.0%。如果各種成分百分率總和為99.9%或100.1%，那么要從最大值（通常為凈種子）中增加或者減去0.1%；如果修約值大于0.1%，操作者應檢查哪個環節出現了操作錯誤，在各種成分中，若出現重量百分率小于0.05%的微量成分，可忽略不計，在結果報告單上填寫“微量”；如出現一種成分的結果為零，須填“0.0”。當測定某一類雜質或某種其他植物種子的重量百分率達到或超過1%時，該雜質或者其他植物種子應在實驗結果報告單上備注。

（6）小麥凈種子、其他植物種子、雜質甄別標準。凈種子甄別標準 在小麥種子中，帶有胚乳的穎果視為完整的小麥種子單位；對于破損的小麥種子，剩余的部分超過種子原來大小的50%時認定為凈種子。其他植物種子甄別標準 如各種花草種子和其他植物種子（如高粱種子、油菜種子）。雜質甄別標準 明顯不含真種子的種子單位；破損種子為原來大小的一半或不到一半的；種皮完全脫落的豆科植物、十字花科植物的種子；大豆菟絲子的種子；砂粒、石礫及所有其他非小麥種子物質。

4 測定小麥種子千粒重

當小麥種子凈度分析實驗做完后，就從凈種子中隨機數取2個重復，每個重復1000粒小麥種子，分別放在培養皿中稱重，培養皿也要貼上標簽，測定千粒重時不用燒杯作為容器，而是用培養皿作為容器，培養皿也要先稱重，并記錄在草稿紙上，然后用算術平均數法計算小麥種子的千粒重。在這個環節中，要遵循隨機原則，只有遵循了隨機原則，數取的1000粒小麥種子才具有代表性，計算的千粒重才能代表整批小麥種子的千粒重。但在實踐操作中，參賽學生往往是刻意數取飽滿的小麥種子，而將不飽滿的小麥種子棄之，這樣計算的千粒重數值偏大。

如何遵循隨機原則：把分離出來的小麥凈種子均勻攤在試樣臺上，將小麥種子攤成4個長條形，從每個長條中隨機數取小麥種子250粒，共數取2個重復，分別進行稱量和計算。或者把小麥凈種子用四分法分成4份，從每份中數取250粒，每份1000粒，共數取2份，在計算千粒重平均值之前，仍然需要計算2個實驗重復的誤差大小。如2份重復試樣的小麥種子千粒重之差與平均數之比小于5%時，可直接用2份試樣的千粒重平均數作為小麥種子的千粒重，種子千粒重的單位為g，若2份重復試樣的小麥種子千粒重之差與平均數之比大于5%時，還要再數取第3份1000粒試樣進行稱量，用3份試樣中差值最小的2份試樣千粒重的平均數作為小麥種子的千粒重。

[1] 黃衛華．小麥種子凈度分析（6課時）[J]．吉林農業，2010（12）：199-201

[2] 羅志明．小麥種子質量檢測中常見問題分析及對策[J]．安徽農學通報（下半月刊），2012，18（16）：135-136

[3] 劉北萍．實驗室實訓中小麥種子凈度檢驗步驟與心得體會[J]．吉林農業，2014（3）：35

[4] 趙耀，劉康，李仕欽，等．種子質量檢測工作的思考體會[J]．中國種業，2011（6）：42-43

2016-12-26）