氣相色譜法同時測定復方氨酚烷胺片中4種成分的含量

董秋香，張月寒，付萍萍，劉志瑋（保定市食品藥品檢驗所，河北保定 071051）

氣相色譜法同時測定復方氨酚烷胺片中4種成分的含量

董秋香＊，張月寒，付萍萍，劉志瑋（保定市食品藥品檢驗所，河北保定 071051）

目的：建立同時測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏含量的方法。方法：采用氣相色譜法。色譜柱為HP-5石英毛細管柱，程序升溫，檢測器為氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度為300℃，載氣為氮氣，流速為1.5 mL/min，分流比為20∶1，進樣量為1 μL。結果：對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏檢測質量濃度線性范圍分別為156.0～4 990.4、125.7～4 023.2、19.14～612.4、2.515～80.48 μg/mL（r均為0.999 9）；定量限分別為1.4、0.5、1.1、0.9 ng，檢測限分別為0.4、0.2、0.3、0.3 ng；精密度、穩定性、重復性試驗的RSD＜2.0%；加樣回收率分別為99.59%～101.77%（RSD＝0.8%，n＝9）、99.56%～101.80%（RSD＝0.7%，n＝9）、98.44%～100.83%（RSD＝0.7%，n＝9）、100.05%～101.91%（RSD＝0.6%，n＝9）。結論：該方法簡便快速、準確可靠，適用于復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的同時測定。

復方氨酚烷胺片；氣相色譜法；對乙酰氨基酚；鹽酸金剛烷胺；咖啡因；馬來酸氯苯那敏；含量

復方氨酚烷胺片是常見的抗感冒藥，用于緩解普通感冒及流行性感冒引起的發熱、頭痛、鼻塞、咽痛等癥狀，也可用于流行性感冒的預防和治療。本品為復方制劑，由對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏及人工牛黃組成，收載于《國家藥品標準》[1]和國家食品藥品監督管理局標準YBH06802005[2]。現行標準中的含量測定分別采用滴定法和高效液相色譜法（HPLC）；滴定法操作煩瑣，易產生誤差，結果重復性差。該制劑中各成分的處方量、紫外吸收強度差異均較大，采用HPLC法測定其中主成分的含量，多為測定對乙酰氨基酚、咖啡因或馬來酸氯苯那敏中1～3種成分的含量[3-6]，若同時測定4種成分的含量需采用雙波長法[7]，無法實現真正意義上的同時檢測。因此，本試驗采用氣相色譜法（GC）建立了同時測定該制劑中對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏含量的方法，以期為全面評價藥品質量提供參考。

1 材料

1.1 儀器

7820A型GC儀，包括氫火焰離子化檢測器、G4513A自動進樣器、EC Chrom Elite工作站（美國Agilent公司）；BP211D型電子天平（德國Sartorius公司）；DK-2000-ⅢLA型電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

復方氨酚烷胺片（A廠，批號：141028、141023、140414、140931、20130613、141020、20141007；B廠，批號：1410087、1410071、1411092；C廠，批號：1501241、1411071；D廠，批號：20150106、20140911；E廠，批號：140701；F廠，批號：141216；G廠，批號：1141241）規格均為12片/盒；鹽酸金剛烷胺對照品（批號：100426-201002，純度：100%）、對乙酰氨基酚對照品（批號：100018-201409，純度：99.9%）、咖啡因對照品（批號：171215-200406，純度：100%）和馬來酸氯苯那敏對照品（批號：100047-200606，純度：99.7%）均購自中國食品藥品檢定研究院；無水乙醇、三氯甲烷為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；程序升溫：起始溫度為170℃，保持3 min，再以12℃/min升溫至260℃，保持2 min；檢測器：氫火焰離子化檢測器；檢測器溫度：300℃；載氣：氮氣；流速：1.5 mL/min；分流比：20∶1；進樣量：1 μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合對照品溶液 稱取馬來酸氯苯那敏對照品50.30 mg，置于25 mL量瓶中，加無水乙醇溶解并定容，搖勻，作為馬來酸氯苯那敏對照品溶液；稱取對乙酰氨基酚對照品124.76 mg、鹽酸金剛烷胺對照品100.58 mg、咖啡因對照品15.31 mg，置于25 mL量瓶中，加無水乙醇適量使溶解，再精密加入馬來酸氯苯那敏對照品溶液1 mL，加無水乙醇定容，搖勻，作為混合對照品貯備液。取上述混合對照品貯備液適量，置于25 mL量瓶中，加無水乙醇定容，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取樣品20片，精密稱定，研細，稱取細粉適量（約相當于對乙酰氨基酚125 mg），置于50 mL量瓶中，加無水乙醇適量，于80℃水浴加熱30 min，放冷至室溫，加無水乙醇定容，搖勻，經0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液 按樣品的處方比例和制備工藝制備缺對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的陰性樣品，再按“2.2.2”項下方法制備陰性對照溶液。

2.3 系統適用性試驗

精密量取“2.2”項下混合對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜，詳見圖1。由圖1可知，在該色譜條件下，各成分均能達到基線分離，分離度＞10；理論板數以鹽酸金剛烷胺峰計為17 614，保留時間為2.450、5.430、6.870、8.490 min。結果表明，其他成分對測定無干擾。

2.4 線性關系考察

取“2.2.1”項下混合對照品貯備液適量，倍比稀釋，制備乙酰氨基酚質量濃度分別為4 990.4、2 495.2、1 248.6、623.8、311.9、156.0 μg/mL，鹽酸金剛烷胺質量濃度分別為4 023.2、2 011.6、1 005.8、502.9、251.4、125.7 μg/mL，咖啡因質量濃度分別為612.4、306.2、153.1、76.55、38.28、19.14 μg/mL，馬來酸氯苯那敏質量濃度分別為80.48、40.24、20.12、10.06、5.030、2.515 μg/ mL的系列混合對照品溶液。取上述溶液適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。以待測成分質量濃度（x，μg/mL）為橫坐標、峰面積（y）為縱坐標進行線性回歸，得對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的回歸方程分別為y＝4.404×103x－7.304×104（r＝0.999 9）、y＝5.734×103x+4.927×104（r＝0.999 9）、y＝2.597×103x+1.356×102（r＝0.999 9）、y＝3.383×103x+ 1.789×103（r＝0.999 9）。結果表明，對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏檢測質量濃度線性范圍分別為156.0～4 990.4、125.7～4 023.2、19.14～612.4、2.515～80.48 μg/mL。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC Chromatograms

2.5 定量限和檢測限考察

取“2.2.1”項下混合對照品溶液適量，倍比稀釋，按“2.1”項下色譜條件連續進樣測定6次，記錄峰面積。當信噪比為10∶1時，得定量限（LOQ）；當信噪比為3∶1時，得檢測限（LOD）。結果，對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的LOQ分別為1.4、0.5、1.1、0.9 ng；LOD分別為0.4、0.2、0.3、0.3 ng。

2.6 精密度試驗

精密量取“2.2.1”項下混合對照品溶液適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果，鹽酸金剛烷胺、對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏峰面積的RSD分別為0.2%、0.3%、0.6%、0.4%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.7 穩定性試驗

取“2.2.2”項下供試品溶液（批號：141028）適量，分別于室溫下放置0、1、2、4、6、8、10、24 h時按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果，對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏峰面積的RSD分別為0.9%、1.2%、1.2%、1.5%（n＝8），表明供試品溶液在室溫下放置24 h內穩定性良好。

2.8 重復性試驗

取同一批樣品（批號：141028）適量，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算平均含量。結果，對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏的平均含量分別為99.2%、94.4%、100.7%、98.4%，RSD分別為0.8%、1.0%、0.8%、0.9%（n＝6），表明本方法重復性良好。

2.9 加樣回收率試驗

取已知含量的樣品（批號：141028），研細，精密稱取細粉適量（約相當于對乙酰氨基酚125 mg），共9份，各置于50 mL量瓶中，分別精密加入一定質量的對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏對照品，按“2.2.2”項下方法制備低、中、高質量濃度的供試品溶液。取上述溶液適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果（n＝9）Tab 1 Results of recovery test（n＝9）

2.10 樣品含量測定

取17批樣品各適量，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的含量，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（n＝3，%）Tab 2 Results of contents determination of samples（n＝3，%）

3 討論

3.1 耐用性考察

本試驗分別選擇兩種色譜柱[HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），美國Agilent公司]、[DM-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm），重慶迪馬工業有限責任公司]，對對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的分離度進行考察。結果表明，不同品牌色譜柱對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的分離度影響不大，測定結果均符合要求，表明本方法的耐用性較好。

3.2 提取條件的選擇

本品為復方制劑，筆者參考相關文獻[8]并根據樣品及各成分的理化性質，選取了毒性較低的無水乙醇為溶劑，采用超聲振蕩15 min提取相關成分。結果，咖啡因、馬來酸氯苯那敏提取不完全；后改為80℃水浴加熱30 min進行提取，對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏均能提取完全。因此，本試驗采用80℃水浴加熱30 min進行提取。

綜上所述，本方法簡便快速、準確可靠，適用于復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因、馬來酸氯苯那敏的同時測定。

[1] 國家食品藥品監督管理局.復方氨酚烷胺片[S].WS1-XG-015-2002.2003.

[2] 國家食品藥品監督管理局.復方氨酚烷胺片[S].YBH06802005.2005.

[3] 田洪根，王洪明.HPLC法測定復方氨酚烷胺片中馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].中國藥品標準，2008，9（3）：207-209.

[4] 石強.HPLC法同時測定復方氨酚烷胺片中咖啡因、馬來酸氯苯那敏的含量及含量均勻度[J].齊魯藥事，2012，31（10）：585-587.

[5] 王軍，權勤波，宋建建，等.UFLC同時測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].中國藥師，2009， 12（12）：1775-1777.

[6] 謝華，傅萍，張悅楊，等.HPLC測定復方氨酚烷胺片中的對乙酰氨基酚、咖啡因和馬來酸氯苯那敏[J].華西藥學雜志，2012，27（3）：307-308.

[7] 黃軍.RP-HPLC法測定復方氨酚烷胺片中4種主要成分的含量[J].生命科學儀器，2006，4（6）：16-18.

[8] 黃義純，劉旺培.HPLC測定氨咖黃敏中對乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].首都醫藥，2007，14（16）：472-474.

（編輯：劉 柳）

Simultaneous Determination of 4 Components in Compound Paracetamol and Amantadine Hydrochloride Tablet by GC

DONG Qiuxiang，ZHANG Yuehan，FU Pingping，LIU Zhiwei（Baoding Municipal Institute for Food and Drug Control，Hebei Baoding 071051，China）

OBJECTIVE：To establish a method for the simultaneous determination of paracetamol，amantadine hydrochloride，caffeine，chlorphenamine maleate in Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet.METHODS：GC was performed on the column of HP-5 sillica capillary，temperature programmed，detector was FID detector，with the temperature of 300℃，carrier gas was nitrogen gas，the flow rate is 1.5 mL/min，the split ratio was 20∶1 and injection volume was 1 μL.RESULTS：The linear range was 156.0-4 990.4 μg/mL for paracetamol，125.7-4 023.2 μg/mL for amantadine hydrochloride，19.14-612.4 μg/mL for caffeine and 2.515-80.48 μg/mL for chlorphenamine maleate（all r＝0.999 9）；the limits of quantification were 1.4，0.5，1.1，0.9 ng，limits of detection were 0.4，0.2，0.3，0.3 ng；RSDs of precision，stability and reproducibility tests were lower than 2.0%；recoveries were 99.59%-101.77%（RSD＝0.8%，n＝9），99.56%-101.80%（RSD＝0.7%，n＝9），98.44%-100.83%（RSD＝0.7%，n＝9）and 100.05%-101.91%（RSD＝0.6%，n＝9），respectively.CONCLUSIONS：This method is simple，rapid，accurate and reliable，and suitable for the simultaneous determination of paracetamol，amantadine hydrochloride，caffeine，chlorphenamine maleate in Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet.

Compound paracetamol and amantadine hydrochloride tablet；GC；Paracetamol；Amantadine hydrochloride；Caffeine；Chlorphenamine maleate；Content

R917

A

1001-0408（2017）06-0844-04

2016-02-28

2016-11-12）

＊主管藥師，碩士。研究方向：化學藥品檢驗。電話：0312-5906322。E-mail：739998331@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.06.34